中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-17页 |
引言 | 第17-27页 |
1. 瘤胃纤维素分解菌概况 | 第17页 |
2. 国内外研究进展 | 第17-19页 |
·国内研究进展 | 第17-18页 |
·国外研究进展 | 第18-19页 |
3. 天然纤维素的成分和结构 | 第19-21页 |
·天然纤维素的主要成分 | 第19-20页 |
·纤维素的化学结构 | 第20-21页 |
4. 纤维素酶学性质与酶解机理 | 第21-23页 |
·纤维素酶学性质 | 第21-22页 |
·内切-1,4-β-葡聚糖酶 | 第21页 |
·外切-1,4-β-葡聚糖酶 | 第21页 |
·β-葡萄糖苷酶 | 第21-22页 |
·纤维素酶解机理 | 第22-23页 |
5. 分解纤维素原料相关酶系的测定方法 | 第23-25页 |
·纤维素酶溶解活性 | 第23-24页 |
·浊度法 | 第23页 |
·透明圈法 | 第23页 |
·失重法 | 第23-24页 |
·滤纸酶糖化活性 | 第24-25页 |
·滤纸酶活性 | 第24页 |
·棉花酶活性 | 第24-25页 |
·纤维素酶各组分酶活力的测定 | 第25页 |
·CBH 酶活性 | 第25页 |
·EG 酶活性 | 第25页 |
·BG 酶活 | 第25页 |
6. 纤维素分解菌的研究展望 | 第25-27页 |
实验一 奶牛瘤胃兼性厌氧纤维素分解菌的分离鉴定 | 第27-45页 |
1. 材料与方法 | 第27-35页 |
·材料 | 第27-28页 |
·试剂 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·试验动物 | 第28页 |
·奶牛瘤胃液 | 第28页 |
·纤维素分解菌的分离、纯化培养基 | 第28页 |
·羧甲基纤维素钠(CMC—Na)培养基 | 第28页 |
·加富羧甲基纤维素钠培养基 | 第28页 |
·种子液 | 第28页 |
·纤维素分解菌的分离、筛选 | 第28-29页 |
·细菌的鉴定 | 第29-35页 |
·形态学特征 | 第29页 |
·生化鉴定 | 第29页 |
·16SrDNA 序列分析法鉴定 | 第29-34页 |
·模板 DNA 的提取 | 第29-30页 |
·聚合酶链式反应 | 第30-31页 |
·PCR 产物电泳 | 第31页 |
·PCR 产物回收 | 第31-32页 |
·DNA 连接反应 | 第32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
·连接产物的转化 | 第33页 |
·单克隆细菌的扩增 | 第33页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第33-34页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第34页 |
·阳性克隆序列测定 | 第34页 |
·细菌系统发育树的构建 | 第34-35页 |
·细菌生长特性测定 | 第35页 |
·细菌致病性测定 | 第35页 |
2. 结果与分析 | 第35-42页 |
·细菌的分离 | 第35页 |
·细菌的形态学特征 | 第35-36页 |
·刚果红染色筛选 | 第36页 |
·细菌的鉴定 | 第36-41页 |
·生化试验结果 | 第36页 |
·16SrDNA 序列分析 | 第36-41页 |
·细菌的生长特性 | 第41页 |
·细菌的致病性 | 第41-42页 |
3. 讨论与结论 | 第42-45页 |
·纤维素分解细菌的筛选 | 第42-43页 |
·粗饲料微生物添加剂 | 第43-44页 |
·细菌的鉴定 | 第44-45页 |
实验二 肺炎克雷伯氏菌和苏云金芽孢杆菌产纤维素酶的研究 | 第45-59页 |
1. 材料与方法 | 第45-50页 |
·材料 | 第45-46页 |
·菌株 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·试剂 | 第45-46页 |
·浓度为1 mg/mL 的葡萄糖标准溶液 | 第45页 |
·3,5-二硝基水杨酸(DNS)溶液 | 第45-46页 |
·0.05 mol/L pH4.5 的柠檬酸缓冲液 | 第46页 |
·0.05 mol/L pH5.0 的柠檬酸缓冲液 | 第46页 |
·0.51%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液 | 第46页 |
·0.5%水杨酸苷溶液 | 第46页 |
·方法 | 第46-50页 |
·纤维素酶粗酶液的制备 | 第47页 |
·葡萄糖标准曲线的制作 | 第47-48页 |
·滤纸酶活力的测定 | 第48页 |
·C-1 酶活力的测定 | 第48-49页 |
·Cx 酶活力的测定 | 第49页 |
·β-葡萄糖苷酶活力的测定 | 第49-50页 |
2. 结果与分析 | 第50-58页 |
·葡萄糖标准曲线 | 第50-51页 |
·酶活力测定结果 | 第51-54页 |
·酶活力与发酵时间的折线图 | 第54-57页 |
·酶活力分析 | 第57-58页 |
3. 讨论与小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第74页 |