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拟南芥雄性不育基因APAM2和APAM3的鉴定及表达模式研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
缩略词表第11-13页
第1章 文献综述第13-32页
   ·拟南芥雄配子体的发育第13-19页
     ·拟南芥雄蕊的发育过程第13-15页
     ·拟南芥花粉囊发育的细胞生物学过程第15-19页
   ·参与拟南芥雄配子体发育的基因第19-26页
     ·参与早期雄蕊发生和细胞分化的基因第20-23页
     ·参与小孢子和绒毡层正常发育的基因第23-26页
   ·参与拟南芥雄配子体发育的基因的研究展望第26页
   ·WD40蛋白在拟南芥中的研究第26-28页
   ·拟南芥嘌呤从头合成过程的研究第28-30页
   ·本实验研究的目的和意义第30-32页
第2章 实验材料与方法第32-51页
   ·实验材料第32-33页
     ·植物材料第32页
     ·质粒和菌株第32页
     ·工具酶和其他试剂第32-33页
   ·实验仪器第33-34页
   ·主要培养基配方第34-35页
     ·拟南芥种子萌发培养基第34页
     ·细菌培养基配方第34页
     ·液体花粉萌发培养基配方第34-35页
   ·主要试剂配制第35-37页
     ·植物培养所需试剂配制第35页
     ·GUS染液配方第35页
     ·制作番红-固绿切片所需试剂配制第35-36页
     ·CTAB法提取RNA所需试剂配制第36页
     ·质粒提取试剂配制第36页
     ·RNaseA水的配制第36页
     ·电泳所需试剂配制第36页
     ·大肠杆菌感受态制备所需试剂第36-37页
     ·大量提取植物DNA所需试剂第37页
     ·小量提取植物DNA所需试剂第37页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备所需试剂第37页
   ·常用分子生物学实验方法第37-41页
     ·质粒提取第37页
     ·电泳检测第37-38页
     ·小分子DNA凝胶回收第38页
     ·扩增片段连接T载体第38页
     ·片段与载体的连接第38-39页
     ·大肠杆菌感受态的制备第39页
     ·热激转化大肠杆菌感受态细胞第39-40页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第40页
     ·电击转化农杆菌感受态细胞第40页
     ·农杆菌介导转化拟南芥植株第40-41页
   ·实验方法第41-51页
     ·植物培养与生长条件第41-42页
     ·植物杂交:去雄和授粉第42页
     ·花粉形态的四分体分析和体外萌发第42页
     ·Southern blot第42-44页
     ·RNA提取及RT-PCR分析基因的表达谱第44-46页
     ·GUS染色观察基因在各组织中的表达情况第46页
     ·花粉囊发育的切片制作与观察第46-48页
     ·APAM2基因cDNA与APAM3基因cDNA的克隆第48-50页
     ·载体的构建与转化植物第50页
     ·蛋白结构功能的预测和同源基因的比对第50-51页
第3章 实验结果分析第51-77页
   ·引言第51-52页
   ·突变体与qrt1杂交及四分体花粉体外萌发第52-53页
     ·+/apam3突变体花粉形态的四分体分析和体外萌发第52页
     ·+/apam2突变体花粉形态的四分体分析和体外萌发第52-53页
   ·突变体花粉囊的石蜡切片观察第53-57页
     ·+/apam3突变体花粉囊番红固绿-石蜡切片观察第54-56页
     ·+/apam2突变体花粉囊番红固绿-石蜡切片观察第56-57页
   ·RT-PCR分析突变基因表达模式第57-58页
     ·RT-PCR分析APAM3基因的表达谱第57-58页
     ·RT-PCR分析APAM2基因的表达谱第58页
   ·GUS染色分析突变基因在各组织中的表达第58-61页
     ·GUS染色观察APAM3基因在各组织中的表达第59-60页
     ·GUS染色观察APAM2基因在各组织中的表达第60-61页
   ·Southern blot分析apam3突变体中Ds插入拷贝数第61-62页
   ·APAM3基因功能的初探第62-70页
     ·引言第62-63页
     ·过表达载体的构建、植物的转化和转基因植株表型观察第63-66页
     ·APAM2基因恢复apam2花粉异形的观察与分析第66-70页
   ·蛋白结构域分析和功能预测第70-74页
     ·APAM3蛋白结构分析第70页
     ·APAM2蛋白结构分析、同源基因的比对和功能的预测第70-74页
   ·APAM2基因cDNA扩增第74-77页
第4章 讨论第77-81页
   ·+/apam3表型分析第77页
   ·APAM3基因表达模式的研究第77-78页
   ·APAM3蛋白结构分析第78-79页
   ·APAM3基因功能的初探第79-80页
     ·过表达载体的构建、植物的转化和转基因植株表型观察第79页
     ·APAM3基因恢复apam3花粉异形的观察与分析第79-80页
   ·+/apam2表型分析第80页
   ·APAM2基因表达模式的研究第80页
   ·APAM2蛋白的预测第80-81页
第5章 结论与展望第81-83页
参考文献第83-89页
附表第89-90页
致谢第90-92页
硕士期间发表的论文第92页

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