目录 | 第1-6页 |
图表索引 | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第10-13页 |
材料与方法 | 第13-31页 |
一.试验材料 | 第13-20页 |
1 细胞 | 第13页 |
2 试验动物 | 第13页 |
3 主要试剂 | 第13页 |
4 分子量Marker | 第13页 |
5 主要试剂盒 | 第13-14页 |
6 分子生物学试剂 | 第14页 |
7 抗体 | 第14页 |
8 其它主要试剂 | 第14-15页 |
9 引物 | 第15-16页 |
10 重要试剂的配制 | 第16-19页 |
11 仪器设备 | 第19-20页 |
二.实验方法 | 第20-31页 |
1 细胞传代 | 第20页 |
2 细胞冻存 | 第20-21页 |
3 细胞复苏 | 第21页 |
4 细胞融合 | 第21页 |
5 细胞克隆的挑选 | 第21页 |
6 流式细胞仪检测活细胞表面标记 | 第21-22页 |
7 免疫荧光 | 第22页 |
8 流式细胞仪测定DNA含量检测 | 第22页 |
9 细胞形态观察 | 第22页 |
10 细胞粘附分析 | 第22-23页 |
11 软琼脂集落形成 | 第23页 |
12 半定量RT-PCR | 第23-25页 |
13 荧光定量PCR | 第25-27页 |
14 Western-blot | 第27-29页 |
15 免疫缺陷鼠移植瘤 | 第29页 |
16 全基因组芯片分析 | 第29-31页 |
17 细胞周期检测 | 第31页 |
18 抗癌药物敏感性测定 | 第31页 |
19 电子显微镜制片 | 第31页 |
20 统计学分析 | 第31页 |
实验结果 | 第31-54页 |
1 融合细胞的筛选鉴定 | 第31-35页 |
1) 流式细胞仪分选 | 第32页 |
2) 融合细胞克隆挑选 | 第32页 |
3) hMSCs表面标记检测 | 第32-33页 |
4) 上皮特征的检测 | 第33-34页 |
5) 细胞DNA含量分析 | 第34-35页 |
2 MSC对EC9706细胞成瘤的抑制作用 | 第35-40页 |
1) 软琼脂集落形成 | 第35-37页 |
2) 免疫缺陷鼠皮下成瘤 | 第37-40页 |
3 MSC对EC9706成瘤抑制作用机理 | 第40-50页 |
1) 全基因组cDNA microarray | 第40-44页 |
2) realtime-PCR对DUSP6/MKP3变化的验证 | 第44-48页 |
3) 细胞周期分析 | 第48-49页 |
4) 电镜下凋亡小体检测 | 第49-50页 |
4 融合细胞的其它生物学特性变化 | 第50-54页 |
1) 对5-FU的敏感性 | 第50-51页 |
2) 光镜下形态变化 | 第51页 |
3) 间质细胞的分子特性 | 第51-53页 |
4) 融合细胞对Matrigel的粘附能力变化 | 第53-54页 |
讨论 | 第54-65页 |
一.胞融合对食管鳞癌细胞成瘤能力的影响 | 第54-58页 |
二.SC与人食管鳞癌细胞融合后安全性分析 | 第58-65页 |
1 MSC与鳞状上皮癌细胞融合和肉瘤的关系 | 第58-60页 |
2 MSC与鳞状上皮癌细胞融合和肿瘤干细胞的关系 | 第60-65页 |
小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
致谢 | 第76-78页 |
论文综述 细胞融合与肿瘤干细胞 | 第78-101页 |
参考文献 | 第90-101页 |
课题资助基金 | 第101-102页 |