| 中文目录 | 第1-8页 |
| 英文目录 | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-53页 |
| ·Axin的研究进展 | 第16-35页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·Axin生物学特性 | 第16页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠的研究进展 | 第16-19页 |
| ·Axin在信号转导通路中的作用 | 第19-35页 |
| ·Axin在Wnt信号通路的作用 | 第19-26页 |
| ·Axin在JNK信号通路中的作用 | 第26-30页 |
| ·Axin在JNK信号通路和Wnt信号通路之间转换调节 | 第30页 |
| ·Axin对p53的调节 | 第30-33页 |
| ·Axin对TGF-β信号通路的调节 | 第33-35页 |
| ·Axin在其他信号通路中的作用 | 第35页 |
| ·结语 | 第35页 |
| ·Wnt信号通路的研究进展 | 第35-42页 |
| ·引言 | 第35-36页 |
| ·Wnt基因家族 | 第36-37页 |
| ·Wnt信号的转导 | 第37-38页 |
| ·Wnt信号通路的生物学功能 | 第38-41页 |
| ·Wnt信号通路在胚胎发育中的作用 | 第38-39页 |
| ·Wnt信号通路在生殖系统发育中的作用 | 第39-40页 |
| ·Wnt信号通路在组织更新中的作用 | 第40页 |
| ·Wnt信号通路在肿瘤发生中的作用 | 第40-41页 |
| ·结语 | 第41-42页 |
| ·JNK信号通路 | 第42-47页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·JNK基因 | 第42页 |
| ·JNK的信号转导 | 第42-43页 |
| ·JNK信号通路的作用 | 第43-47页 |
| ·JNK信号通路在细胞凋亡中的作用 | 第43-44页 |
| ·JNK信号通路在抗凋亡中的作用 | 第44-45页 |
| ·JNK在肿瘤发生中的作用 | 第45-46页 |
| ·JNK信号通路在胚胎形态发生中的作用 | 第46-47页 |
| ·结语 | 第47页 |
| ·p53信号通路 | 第47-53页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·p53基因 | 第47-49页 |
| ·p53的生物学功能 | 第49-52页 |
| ·p53对细胞周期的调节 | 第49-50页 |
| ·p53与细胞凋亡的关系 | 第50-51页 |
| ·p53与肿瘤的关系 | 第51-52页 |
| ·结语 | 第52-53页 |
| 第二章 材料和方法 | 第53-75页 |
| ·常用的药品和试剂 | 第53页 |
| ·DNA相关实验方法 | 第53-62页 |
| ·质粒载体 | 第53-55页 |
| ·pBluescript SK(-) | 第53-54页 |
| ·pCMV5 | 第54页 |
| ·pGEX | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第55页 |
| ·DNA转化 | 第55-56页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第56-58页 |
| ·小规模质粒DNA的提取(STET煮沸法) | 第56页 |
| ·中等规模质粒DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·大规模质粒DNA的提取 | 第57-58页 |
| ·质粒DNA的工具酶处理 | 第58-59页 |
| ·DNA的限制性内切酶消化 | 第58页 |
| ·线性DNA末端平滑化 | 第58页 |
| ·线性DNA 5'端磷酸化 | 第58页 |
| ·线性DNA 5'端磷酸基团的去除 | 第58-59页 |
| ·DNA片段的纯化 | 第59-60页 |
| ·琼脂糖电泳分离DNA | 第59页 |
| ·DNA的回收 | 第59-60页 |
| ·DNA连接反应 | 第60页 |
| ·PCR反应 | 第60页 |
| ·哺乳动物细胞表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·Axin~(Fu-NT)和Axin~(Fu-CT)表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·Axin全长及缺失突变体表达质粒的构建 | 第61页 |
| ·APC、β-catenin、Wnt-1、GSK-3β、CKIα、 MEKK 1-CT、MEKK4-CT和FLAG-JNK的表达载体的构建 | 第61页 |
| ·细菌表达质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·GST-AxinNT400细菌表达质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·GST-C2b和GST-CT36细菌表达质粒的构建 | 第62页 |
| ·细胞培养及转染 | 第62-63页 |
| ·细胞培养 | 第62-63页 |
| ·细胞培养液的配制 | 第62页 |
| ·细胞的传代和接种 | 第62-63页 |
| ·瞬时转染 | 第63页 |
| ·蛋白质相关实验方法 | 第63-68页 |
| ·免疫沉淀 | 第63-64页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE电泳与Western blotting分析 | 第64-65页 |
| ·免疫激酶反应实验 | 第65-66页 |
| ·体内泛素化实验 | 第66页 |
| ·融合蛋白的纯化和多克隆抗体制备 | 第66-68页 |
| ·融合蛋白的表达和纯化 | 第66-67页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第67-68页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠的相关实验 | 第68-69页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠基因组DNA的提取 | 第68页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠基因型的鉴定 | 第68页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠大脑提取物的抽提 | 第68-69页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠大脑提取物的免疫沉淀 | 第69页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠大脑提取物的GST pull-down | 第69页 |
| ·斑马鱼的相关实验 | 第69-73页 |
| ·体外合成mRNA | 第69-70页 |
| ·显微注射 | 第70-71页 |
| ·整胚原位杂交 | 第71-73页 |
| ·标记探针 | 第71页 |
| ·斑马鱼的整胚原位杂交 | 第71-73页 |
| ·荧光素酶报告基因分析 | 第73-74页 |
| ·Hoechst核染色计数实验 | 第74-75页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第75-98页 |
| ·Axin~(Fu)小鼠体内存在Axin C端缺失的突变体Axin~(Fu-NT) | 第75-78页 |
| ·IAP插入可能出现的Axin突变的蛋白产物 | 第75-76页 |
| ·Axin抗体C2b和CT36的检测 | 第76-77页 |
| ·在Axin~(Fu)小鼠体内存在Axin~(Fu-NT)蛋白 | 第77-78页 |
| ·Axin~(Fu-NT)能类似于Axin下调Wnt信号 | 第78-82页 |
| ·Axin~(Fu-NT)抑制TOPFLASH和LEF-1的转录活性 | 第78-79页 |
| ·Axin~(Fu-NT)与Wnt信号通路的重要调节因子相互作用 | 第79-81页 |
| ·Axin~(Fu-NT)抑制母源β-catenin靶向基因的表达 | 第81-82页 |
| ·Axin在近N端处存在形成同源二聚体的的结构域 | 第82-85页 |
| ·Axin~(Fu-NT)与Axin相互作用 | 第82-83页 |
| ·Axin~(Fu-NT)能形成同源二聚体 | 第83-84页 |
| ·Axin形成同源二聚体结构域的定位 | 第84-85页 |
| ·GST-AxinNT400融合蛋白pull-down野生型Axin和Axin~(Fu-NT) | 第85页 |
| ·Axin~(Fu-NT)对Axin激活JNK具有显性负调控作用 | 第85-90页 |
| ·Axin~(Fu-NT)显性负调控Axin诱导的JNK活化 | 第85-86页 |
| ·Axin~(Fu-NT)通过破环Axin形成二聚体抑制Axin激活JNK | 第86-87页 |
| ·Axin~(Fu-NT)和MEKK1相互作用 | 第87页 |
| ·Axin~(Fu-NT)竞争Axin与MEKK1相结合 | 第87-88页 |
| ·Axin~(Fu-NT)和MEKK4相互作用 | 第88-89页 |
| ·Axin~(Fu-NT)竞争Axin与MEKK4相结合 | 第89-90页 |
| ·Axin~(Fu-NT)能引起腹部化的表型 | 第90-92页 |
| ·Axin~(Fu-NT)抑制Axin上调p53第46位丝氨酸的磷酸化 | 第92-96页 |
| ·Axin~(Fu-NT)抑制Axin激活p53-luc的转录活性 | 第92-93页 |
| ·Axin~(Fu-NT)抑制Axin增强p53第46位丝氨酸的磷酸化 | 第93页 |
| ·Axin~(Fu-NT)能与p53相互作用但不与HIPK2相作用 | 第93-94页 |
| ·Axin~(Fu-NT) ΔMID不影响Axin增强p53 Ser46的磷酸化 | 第94-95页 |
| ·Axin~(Fu-NT)能抑制Axin诱导的细胞凋亡 | 第95-96页 |
| ·讨论与小结 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-117页 |
| 图表索引 | 第117-119页 |
| 缩略语及中英文对照 | 第119-122页 |
| 在学期间发表的论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
