摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
·龙眼分子生物学研究进展 | 第15-25页 |
·龙眼品种分类和鉴定 | 第15-18页 |
·龙眼品种的RAPD 鉴定 | 第15-16页 |
·龙眼品种的ISSR 和ITS 鉴定 | 第16-17页 |
·龙眼品种的AFLP 鉴定 | 第17-18页 |
·龙眼开花和成花逆转研究 | 第18-21页 |
·龙眼胚胎发育研究 | 第21-25页 |
·龙眼胚胎发育的生物大分子和激素研究 | 第21-23页 |
·龙眼胚胎发育的蛋白质组和转录组研究 | 第23-24页 |
·龙眼体细胞胚及转基因的研究 | 第24-25页 |
·cDNA-AFLP 技术的应用 | 第25-29页 |
·cDNA-AFLP 技术分析植物发育基因表达 | 第26-27页 |
·cDNA-AFLP 技术分析植物逆境基因表达 | 第27-28页 |
·cDNA-AFLP 技术分析植物抗病和抗虫基因表达 | 第28页 |
·cDNA-AFLP 技术分析植物生理过程基因表达 | 第28-29页 |
·本研究的目的和技术路线 | 第29-30页 |
第二章 龙眼子叶胚不同发育时期cDNA-AFLP分析 | 第30-52页 |
·材料 | 第30页 |
·供试材料 | 第30页 |
·仪器和试剂 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-39页 |
·龙眼子叶胚总RNA 的提取 | 第30-31页 |
·花后35 天龙眼子叶胚总RNA 的提取 | 第30-31页 |
·花后50 天龙眼子叶胚总RNA 的提取 | 第31页 |
·双链cDNA 的合成 | 第31-34页 |
·第一链cDNA 合成 | 第32页 |
·第一链cDNA 纯化 | 第32-33页 |
·cDNA 的 LD-PCR 扩增 | 第33页 |
·双链cDNA- PCR 产物纯化 | 第33-34页 |
·cDNA-AFLP 的引物合成和接头制备 | 第34页 |
·酶切和加接头 | 第34-35页 |
·预扩增 | 第35-36页 |
·选择性扩增 | 第36页 |
·琼脂糖电泳 | 第36页 |
·聚丙烯酰胺电泳 | 第36-37页 |
·银染 | 第37页 |
·银染试剂的配制 | 第37页 |
·银染操作步骤 | 第37页 |
·差异片段的克隆 | 第37-39页 |
·差异片段的二次扩增 | 第37-38页 |
·差异片段的PCR 产物回收 | 第38页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
·连接和转化 | 第39页 |
·鉴定 | 第39页 |
·差异片段序列分析 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-50页 |
·龙眼胚胎总RNA 提取和cDNA 合成 | 第39-40页 |
·限制性酶切、接头连接、预扩增和选择性扩增 | 第40-42页 |
·差异片段的克隆 | 第42页 |
·差异条带的BLAST 分析 | 第42-50页 |
·小结和讨论 | 第50-52页 |
第三章 龙眼子叶胚GAPDH 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第52-60页 |
·前言 | 第52页 |
·材料与方法 | 第52-53页 |
·材料 | 第52页 |
·RACE 反应体系建立 | 第52-53页 |
·GAPDH 生物信息学分析 | 第53页 |
·结果与分析 | 第53-59页 |
·GAPDH 基因的3′-RACE 和5′-RACE | 第54页 |
·GAPDH 基因cDNA ORF 的获得 | 第54页 |
·GAPDH 基因全长cDNA 序列分析 | 第54-59页 |
·小结和讨论 | 第59-60页 |
第四章 龙眼子叶胚YA82 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第60-69页 |
·前言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-61页 |
·材料 | 第60页 |
·YA82 基因的3′-RACE、5′- RACE 及cDNA 全长扩增 | 第60-61页 |
·龙眼YA82 生物信息学分析 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-68页 |
·YA82 基因的的3′-RACE 和5′-RACE | 第61-62页 |
·YA82 基因全长cDNA 的获得 | 第62-63页 |
·YA82 基因全长cDNA 序列分析 | 第63-67页 |
·YA82基因的RT-PCR表达分析 | 第67-68页 |
·小结和讨论 | 第68-69页 |
第五章 龙眼子叶胚Remorin、FVE 和CCR4-NOT 基因全长cDNA 克隆及其他基因部分cDNA 克隆与序列分析 | 第69-82页 |
·前言 | 第69页 |
·材料与方法 | 第69-70页 |
·材料 | 第69页 |
·3′- RACE 和 5′- RACE | 第69-70页 |
·生物信息学分析 | 第70页 |
·结果与分析 | 第70-80页 |
·Remorin 基因的 cDNA 克隆及序列分析 | 第70-72页 |
·FVE 基因的 cDNA 克隆及序列分析 | 第72-76页 |
·CCR4-NOT 基因的 cDNA 克隆及序列分析 | 第76-79页 |
·硫转运蛋白、几丁质酶和脱水应答相关蛋白基因的 3′或 5′- RACE 及 RT-PCR 表达分析 | 第79-80页 |
·小结和讨论 | 第80-82页 |
总结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |
附录 | 第90-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
在学期间发表论文 | 第94页 |