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龙眼子叶胚发育相关的若干基因克隆及序列分析

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·龙眼分子生物学研究进展第15-25页
     ·龙眼品种分类和鉴定第15-18页
       ·龙眼品种的RAPD 鉴定第15-16页
       ·龙眼品种的ISSR 和ITS 鉴定第16-17页
       ·龙眼品种的AFLP 鉴定第17-18页
     ·龙眼开花和成花逆转研究第18-21页
     ·龙眼胚胎发育研究第21-25页
       ·龙眼胚胎发育的生物大分子和激素研究第21-23页
       ·龙眼胚胎发育的蛋白质组和转录组研究第23-24页
       ·龙眼体细胞胚及转基因的研究第24-25页
   ·cDNA-AFLP 技术的应用第25-29页
     ·cDNA-AFLP 技术分析植物发育基因表达第26-27页
     ·cDNA-AFLP 技术分析植物逆境基因表达第27-28页
     ·cDNA-AFLP 技术分析植物抗病和抗虫基因表达第28页
     ·cDNA-AFLP 技术分析植物生理过程基因表达第28-29页
   ·本研究的目的和技术路线第29-30页
第二章 龙眼子叶胚不同发育时期cDNA-AFLP分析第30-52页
   ·材料第30页
     ·供试材料第30页
     ·仪器和试剂第30页
   ·试验方法第30-39页
     ·龙眼子叶胚总RNA 的提取第30-31页
       ·花后35 天龙眼子叶胚总RNA 的提取第30-31页
       ·花后50 天龙眼子叶胚总RNA 的提取第31页
     ·双链cDNA 的合成第31-34页
       ·第一链cDNA 合成第32页
       ·第一链cDNA 纯化第32-33页
       ·cDNA 的 LD-PCR 扩增第33页
       ·双链cDNA- PCR 产物纯化第33-34页
     ·cDNA-AFLP 的引物合成和接头制备第34页
     ·酶切和加接头第34-35页
     ·预扩增第35-36页
     ·选择性扩增第36页
     ·琼脂糖电泳第36页
     ·聚丙烯酰胺电泳第36-37页
     ·银染第37页
       ·银染试剂的配制第37页
       ·银染操作步骤第37页
     ·差异片段的克隆第37-39页
       ·差异片段的二次扩增第37-38页
       ·差异片段的PCR 产物回收第38页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第38-39页
       ·连接和转化第39页
       ·鉴定第39页
     ·差异片段序列分析第39页
   ·结果与分析第39-50页
     ·龙眼胚胎总RNA 提取和cDNA 合成第39-40页
     ·限制性酶切、接头连接、预扩增和选择性扩增第40-42页
     ·差异片段的克隆第42页
     ·差异条带的BLAST 分析第42-50页
   ·小结和讨论第50-52页
第三章 龙眼子叶胚GAPDH 基因的cDNA 克隆及序列分析第52-60页
   ·前言第52页
   ·材料与方法第52-53页
     ·材料第52页
     ·RACE 反应体系建立第52-53页
     ·GAPDH 生物信息学分析第53页
   ·结果与分析第53-59页
     ·GAPDH 基因的3′-RACE 和5′-RACE第54页
     ·GAPDH 基因cDNA ORF 的获得第54页
     ·GAPDH 基因全长cDNA 序列分析第54-59页
   ·小结和讨论第59-60页
第四章 龙眼子叶胚YA82 基因的cDNA 克隆及序列分析第60-69页
   ·前言第60页
   ·材料与方法第60-61页
     ·材料第60页
     ·YA82 基因的3′-RACE、5′- RACE 及cDNA 全长扩增第60-61页
     ·龙眼YA82 生物信息学分析第61页
   ·结果与分析第61-68页
     ·YA82 基因的的3′-RACE 和5′-RACE第61-62页
     ·YA82 基因全长cDNA 的获得第62-63页
     ·YA82 基因全长cDNA 序列分析第63-67页
     ·YA82基因的RT-PCR表达分析第67-68页
   ·小结和讨论第68-69页
第五章 龙眼子叶胚Remorin、FVE 和CCR4-NOT 基因全长cDNA 克隆及其他基因部分cDNA 克隆与序列分析第69-82页
   ·前言第69页
   ·材料与方法第69-70页
     ·材料第69页
     ·3′- RACE 和 5′- RACE第69-70页
     ·生物信息学分析第70页
   ·结果与分析第70-80页
     ·Remorin 基因的 cDNA 克隆及序列分析第70-72页
     ·FVE 基因的 cDNA 克隆及序列分析第72-76页
     ·CCR4-NOT 基因的 cDNA 克隆及序列分析第76-79页
     ·硫转运蛋白、几丁质酶和脱水应答相关蛋白基因的 3′或 5′- RACE 及 RT-PCR 表达分析第79-80页
   ·小结和讨论第80-82页
总结第82-83页
参考文献第83-90页
附录第90-93页
致谢第93-94页
在学期间发表论文第94页

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