| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 英文缩写注释 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| 1 材料 | 第15-17页 |
| ·主要材料与试剂 | 第15页 |
| ·主要实验仪器 | 第15-16页 |
| ·引物序列 | 第16-17页 |
| 2 方法 | 第17-22页 |
| ·H9c2细胞培养及处理 | 第17页 |
| ·脂质体瞬时转染 | 第17页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第17页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量RCR(Real-time quantitative PCR) | 第18-19页 |
| ·免疫印迹分析(Western blot analysis) | 第19页 |
| ·间接细胞免疫荧光 | 第19页 |
| ·Hoechst 33258染色,镜下凋亡形态学观察及凋亡百分率计算 | 第19页 |
| ·流式细胞术 | 第19页 |
| ·Caspase活性检测 | 第19-20页 |
| ·PGL3-Basic-Bid promoter荧光素酶报告基因重组载体的构建及鉴定 | 第20页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第20页 |
| ·Target Detection Assay | 第20-21页 |
| ·统计学处理 | 第21-22页 |
| 第三章 实验结果 | 第22-37页 |
| 1.真核表达质粒及瞬时转染效果鉴定 | 第22-23页 |
| ·Mipu1真核表达质粒的鉴定 | 第22页 |
| ·Mipu1瞬时转染H9c2细胞中Mipu1蛋白的表达 | 第22-23页 |
| 2.Mipu1对TNFα所致H9c2细胞凋亡的影响 | 第23-26页 |
| ·Hoechst染色观察Mipu1过表达对TNFα所致H9c2细胞凋亡的影响 | 第23-24页 |
| ·流式细胞术检测Mipu1过表达对TNFα所致H9c2细胞凋亡的影响 | 第24-25页 |
| ·Mipu1过表达对TNFα所致H9c2心肌细胞Caspase活化的影响 | 第25-26页 |
| 3.Mipu1对凋亡相关基因Bid表达的影响 | 第26-32页 |
| ·细胞间接免疫荧光法观察Mipu1过表达对Bid蛋白表达的影响 | 第26-27页 |
| ·Western-blot检测Mipu1过表达对Bid蛋白表达水平的影响 | 第27-29页 |
| ·Mipu1过表达对Bid mRNA表达的影响 | 第29-32页 |
| 4.Mipu1对Bid基因启动子区转录活性的影响 | 第32-35页 |
| ·Bid基因启动子区荧光素酶报告基因重组质粒的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·Mipu1过表达对Bid基因转录活性的影响 | 第33-35页 |
| 5.Target Detection Assay检测Mipu1与Bid基因启动区的结合作用 | 第35-37页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第37-40页 |
| 第五章 结论 | 第40-41页 |
| 附表 | 第41-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 综述 | 第46-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第57页 |
