摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
目录 | 第9-10页 |
英文缩写注释 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-19页 |
1 材料 | 第13-14页 |
·细胞、细菌和质粒 | 第13页 |
·主要试剂 | 第13页 |
·主要仪器 | 第13页 |
·引物及寡核苷酸序列 | 第13-14页 |
2 方法 | 第14-19页 |
·细胞培养及CoCl_2处理 | 第14页 |
·脂质体瞬时转染 | 第14-15页 |
·细胞总RNA提取 | 第15页 |
·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第15-16页 |
·细胞核蛋白的提取 | 第16页 |
·蛋白质浓度的测定(Bradford法) | 第16页 |
·寡核苷酸单链的变性 | 第16-17页 |
·间接免疫荧光 | 第17页 |
·免疫印迹分析(Western Blot) | 第17页 |
·荧光素酶报告基因分析 | 第17-18页 |
·凝胶电泳迁移率分析(EMSA)及supper shift | 第18页 |
·统计学分析 | 第18-19页 |
第三章 实验结果 | 第19-25页 |
1 RT-PCR观察不同处理因素对H9c2细胞HIF-1αmRNA表达的影响 | 第19-20页 |
2 间接免疫荧光观察HIF-1α蛋白在H9c2细胞中的表达及定位情况 | 第20-21页 |
3 RT-PCR观察HIF-1α对H9c2细胞Mipul mRNA表达的影响 | 第21-22页 |
4 Western Blot观察HIF-1α对H9c2细胞Mipul蛋白表达的影响 | 第22-23页 |
5 荧光素酶报告基因分析HIF-1对H9c2细胞Mipul启动子转录活性的影响 | 第23-24页 |
6 EMSA和supershift观察HIF-1与Mipul启动子区HRE的结合情况 | 第24-25页 |
第四章 分析与讨论 | 第25-27页 |
第五章 结论 | 第27-28页 |
附表:文中统计图数据 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-32页 |
综述 | 第32-43页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第44页 |