摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 前言 | 第11-25页 |
·海洋污染监测 | 第11-17页 |
·理化监测 | 第12页 |
·生物监测 | 第12-17页 |
·指示动物监测技术 | 第13-14页 |
·指示植物监测技术 | 第14-15页 |
·指示微生物监测技术 | 第15-16页 |
·现代生物监测技术 | 第16-17页 |
·半知菌作为指示微生物的研究 | 第17-21页 |
·指示半知菌的研究背景 | 第17-18页 |
·指示半知菌的筛选 | 第18页 |
·指示半知菌的检测 | 第18-21页 |
·形态学检测 | 第18页 |
·分子生物学检测 | 第18-21页 |
·PCR技术在指示半知菌检测中的影响因素 | 第21-23页 |
·PCR技术的类型 | 第21-22页 |
·PCR条件的优化 | 第22-23页 |
·本章小节 | 第23-24页 |
·本研究的主要内容 | 第24-25页 |
第二章 近海沉积物中半知菌优势指示菌的分离筛选和鉴定 | 第25-43页 |
第一节 近海沉积物样品重金属和氮磷含量测定 | 第25-29页 |
·材料 | 第25页 |
·样品采集及处理 | 第25页 |
·试剂与仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·重金属含量测定 | 第25-26页 |
·总氮含量测定 | 第26-27页 |
·总磷含量测定 | 第27页 |
·结果 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第二节 沉积物样品中半知菌优势种的分离和鉴定 | 第29-39页 |
·材料 | 第29-30页 |
·样品采集及处理 | 第29页 |
·分离培养基 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·沉积物半知菌优势种的分离计数 | 第30页 |
·优势种形态学特征鉴定 | 第30页 |
·优势种分子生物学鉴定 | 第30-33页 |
·结果 | 第33-39页 |
·沉积物可培养半知菌种群数量统计 | 第33-34页 |
·菌株形态和系统发育学鉴定结果 | 第34-39页 |
·讨论 | 第39页 |
第三节 半知菌优势指示菌的筛选 | 第39-42页 |
·材料 | 第39-40页 |
·供试菌株 | 第39页 |
·供试重金属元素离子浓度 | 第39-40页 |
·培养基 | 第40页 |
·方法 | 第40页 |
·孢子悬浮液制备 | 第40页 |
·优势指示菌筛选 | 第40页 |
·结果 | 第40-42页 |
·Cu元素的影响 | 第40-41页 |
·Zn元素的影响 | 第41页 |
·其余元素的影响 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42页 |
第四节 本章小结 | 第42-43页 |
第三章 半知菌 JYX-201 菌株(Penicillium griseofulvum)对海洋污染重金属反应研究 | 第43-54页 |
1 材料 | 第43页 |
·供试重金属元素离子浓度 | 第43页 |
·培养基 | 第43页 |
·供试菌株 | 第43页 |
2 方法 | 第43-45页 |
·菌株孢子萌发测定 | 第43-44页 |
·菌落生长变化测定 | 第44页 |
·菌株防御酶活测试 | 第44页 |
·GOD活性测定 | 第44页 |
·CAT活性测定 | 第44页 |
·菌株金属硫蛋白活性测定 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-51页 |
·不同浓度的重金属离子对孢子萌发的影响 | 第45-48页 |
·Cu~(2+)对孢子萌发的影响 | 第45-46页 |
·Zn~(2+)对孢子萌发的影响 | 第46-48页 |
·重金属对菌落生长的影响 | 第48-49页 |
·Cu~(2+)的影响 | 第48页 |
·Zn~(2+)的影响 | 第48-49页 |
·菌株酶活测定结果 | 第49-50页 |
·Cu~(2+)对酶活的影响 | 第49-50页 |
·Zn~(2+)对酶活的影响 | 第50页 |
·金属硫蛋白活性测定 | 第50-51页 |
·Cu~(2+)对金属硫蛋白活性的影响 | 第50-51页 |
·Zn~(2+)对金属硫蛋白活性的影响 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
5 本章小结 | 第52-54页 |
第四章 近岸污染指示半知菌 JYX-201 灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)的分子检测 | 第54-65页 |
1 材料 | 第54页 |
·供试菌株 | 第54页 |
·培养基 | 第54页 |
2 方法 | 第54-57页 |
·菌株DNA提取 | 第54-55页 |
·菌丝体DNA提取 | 第54-55页 |
·分生孢子的收集及其DNA的提取 | 第55页 |
·沉积物中菌株DNA的提取 | 第55页 |
·引物设计与PCR扩增 | 第55-56页 |
·引物AS1/RS4设计 | 第55页 |
·引物IAO1/IAO2设计 | 第55页 |
·常规PCR反应 | 第55-56页 |
·套式PCR反应 | 第56页 |
·PCR扩增检测 | 第56-57页 |
·基因组DNA的灵敏度检测 | 第56页 |
·菌株分生孢子DNA的灵敏度检测 | 第56页 |
·近海沉积物样品中的菌株分生孢子DNA的灵敏度检测 | 第56-57页 |
·近海沉积物样品中菌株的检测 | 第57页 |
3 结果与分析 | 第57-63页 |
·引物设计 | 第57-58页 |
·引物AS1/RS4设计结果 | 第57页 |
·引物IAO1/IAO2设计结果 | 第57-58页 |
·引物特异性PCR扩增 | 第58-59页 |
·引物扩增的稳定性 | 第58页 |
·引物扩增的特异性 | 第58-59页 |
·PCR扩增基因组DNA的灵敏度检测结果 | 第59-61页 |
·分生孢子DNA的灵敏度检测结果 | 第61-62页 |
·菌株分生孢子DNA的检测结果 | 第61页 |
·近海沉积物中的菌株分生孢子DNA的检测结果 | 第61-62页 |
·近海沉积物样品中菌株的检测 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
5 本章小结 | 第64-65页 |
结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
附录 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第74-75页 |