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半知菌优势种与海洋环境污染之间的关系和检测

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-25页
   ·海洋污染监测第11-17页
     ·理化监测第12页
     ·生物监测第12-17页
       ·指示动物监测技术第13-14页
       ·指示植物监测技术第14-15页
       ·指示微生物监测技术第15-16页
       ·现代生物监测技术第16-17页
   ·半知菌作为指示微生物的研究第17-21页
     ·指示半知菌的研究背景第17-18页
     ·指示半知菌的筛选第18页
     ·指示半知菌的检测第18-21页
       ·形态学检测第18页
       ·分子生物学检测第18-21页
   ·PCR技术在指示半知菌检测中的影响因素第21-23页
     ·PCR技术的类型第21-22页
     ·PCR条件的优化第22-23页
   ·本章小节第23-24页
   ·本研究的主要内容第24-25页
第二章 近海沉积物中半知菌优势指示菌的分离筛选和鉴定第25-43页
 第一节 近海沉积物样品重金属和氮磷含量测定第25-29页
   ·材料第25页
     ·样品采集及处理第25页
     ·试剂与仪器第25页
   ·方法第25-27页
     ·重金属含量测定第25-26页
     ·总氮含量测定第26-27页
     ·总磷含量测定第27页
   ·结果第27-28页
   ·讨论第28-29页
 第二节 沉积物样品中半知菌优势种的分离和鉴定第29-39页
   ·材料第29-30页
     ·样品采集及处理第29页
     ·分离培养基第29-30页
   ·方法第30-33页
     ·沉积物半知菌优势种的分离计数第30页
     ·优势种形态学特征鉴定第30页
     ·优势种分子生物学鉴定第30-33页
   ·结果第33-39页
     ·沉积物可培养半知菌种群数量统计第33-34页
     ·菌株形态和系统发育学鉴定结果第34-39页
   ·讨论第39页
 第三节 半知菌优势指示菌的筛选第39-42页
   ·材料第39-40页
     ·供试菌株第39页
     ·供试重金属元素离子浓度第39-40页
     ·培养基第40页
   ·方法第40页
     ·孢子悬浮液制备第40页
     ·优势指示菌筛选第40页
   ·结果第40-42页
     ·Cu元素的影响第40-41页
     ·Zn元素的影响第41页
     ·其余元素的影响第41-42页
   ·讨论第42页
 第四节 本章小结第42-43页
第三章 半知菌 JYX-201 菌株(Penicillium griseofulvum)对海洋污染重金属反应研究第43-54页
 1 材料第43页
   ·供试重金属元素离子浓度第43页
   ·培养基第43页
   ·供试菌株第43页
 2 方法第43-45页
   ·菌株孢子萌发测定第43-44页
   ·菌落生长变化测定第44页
   ·菌株防御酶活测试第44页
     ·GOD活性测定第44页
     ·CAT活性测定第44页
   ·菌株金属硫蛋白活性测定第44-45页
 3 结果与分析第45-51页
   ·不同浓度的重金属离子对孢子萌发的影响第45-48页
     ·Cu~(2+)对孢子萌发的影响第45-46页
     ·Zn~(2+)对孢子萌发的影响第46-48页
   ·重金属对菌落生长的影响第48-49页
     ·Cu~(2+)的影响第48页
     ·Zn~(2+)的影响第48-49页
   ·菌株酶活测定结果第49-50页
     ·Cu~(2+)对酶活的影响第49-50页
     ·Zn~(2+)对酶活的影响第50页
   ·金属硫蛋白活性测定第50-51页
     ·Cu~(2+)对金属硫蛋白活性的影响第50-51页
     ·Zn~(2+)对金属硫蛋白活性的影响第51页
 4 讨论第51-52页
 5 本章小结第52-54页
第四章 近岸污染指示半知菌 JYX-201 灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)的分子检测第54-65页
 1 材料第54页
   ·供试菌株第54页
   ·培养基第54页
 2 方法第54-57页
   ·菌株DNA提取第54-55页
     ·菌丝体DNA提取第54-55页
     ·分生孢子的收集及其DNA的提取第55页
     ·沉积物中菌株DNA的提取第55页
   ·引物设计与PCR扩增第55-56页
     ·引物AS1/RS4设计第55页
     ·引物IAO1/IAO2设计第55页
     ·常规PCR反应第55-56页
     ·套式PCR反应第56页
   ·PCR扩增检测第56-57页
     ·基因组DNA的灵敏度检测第56页
     ·菌株分生孢子DNA的灵敏度检测第56页
     ·近海沉积物样品中的菌株分生孢子DNA的灵敏度检测第56-57页
     ·近海沉积物样品中菌株的检测第57页
 3 结果与分析第57-63页
   ·引物设计第57-58页
     ·引物AS1/RS4设计结果第57页
     ·引物IAO1/IAO2设计结果第57-58页
   ·引物特异性PCR扩增第58-59页
     ·引物扩增的稳定性第58页
     ·引物扩增的特异性第58-59页
   ·PCR扩增基因组DNA的灵敏度检测结果第59-61页
   ·分生孢子DNA的灵敏度检测结果第61-62页
     ·菌株分生孢子DNA的检测结果第61页
     ·近海沉积物中的菌株分生孢子DNA的检测结果第61-62页
   ·近海沉积物样品中菌株的检测第62-63页
 4 讨论第63-64页
 5 本章小结第64-65页
结论第65-67页
参考文献第67-71页
附录第71-73页
致谢第73-74页
攻读学位期间发表的学术论文目录第74-75页

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