摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
1 引言 | 第8-13页 |
·黄曲霉毒素的介绍 | 第8页 |
·黄曲霉毒素的结构、毒性和致癌性 | 第8页 |
·黄曲霉毒素的检测 | 第8-9页 |
·薄层色谱法( TLC ) | 第9页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第9页 |
·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第9页 |
·抗体的发展 | 第9-10页 |
·抗体的发展 | 第9页 |
·小分子抗体scFv,Fv | 第9-10页 |
·噬菌体单链抗体文库 | 第10-11页 |
·噬菌体抗体的筛选 | 第10-11页 |
·原核及真核表达系统研究进展 | 第11-12页 |
·大肠杆菌表达系统研究进展 | 第11页 |
·真核表达系统研究进展 | 第11-12页 |
·研究的意义和内容 | 第12-13页 |
·研究的意义 | 第12页 |
·研究的内容 | 第12-13页 |
2 实验材料与方法 | 第13-23页 |
·实验材料 | 第13-16页 |
·基因、菌株和质粒 | 第13页 |
·实验主要仪器 | 第13-14页 |
·实验主要试剂 | 第14页 |
·培养基配制 | 第14-15页 |
·溶液的配制 | 第15-16页 |
·所用引物序列 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-23页 |
·抗黄曲霉毒素B1 单链抗体基因H4 的定点突变 | 第17-19页 |
·BL21(DE3)-pET226-H4-Glu 的构建和诱导表达 | 第19-20页 |
·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的构建和诱导表达 | 第20-21页 |
·抗体性质的测定 | 第21-23页 |
3 结果与讨论 | 第23-36页 |
·抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因 H4 的定点突变 | 第23-25页 |
·pUCX05-H4 的验证 | 第23页 |
·pUCX05-H4-Glu 的验证 | 第23-25页 |
·BL21(DE3)-PET228-H4-GLU 的构建和诱导表达 | 第25-27页 |
·pUCX05-H4-Glu(Nco I,Not I)和pET226-H4-Glu 的构建 | 第25-26页 |
·BL21(DE3)-pET226-H4-Glu 诱导表达 | 第26-27页 |
·抗体的特异性鉴定 | 第27页 |
·大肠杆菌中抗体的表达量 | 第27页 |
·GG799-PKLAC1-H4-GLU 的构建和诱导表达 | 第27-30页 |
·表达载体pKLAC1-H4-Glu 的验证 | 第27-28页 |
·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的构建、验证及单拷贝多拷贝的鉴定 | 第28-29页 |
·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的诱导表达 | 第29-30页 |
·原核和真核表达系统表达抗AFB1 单链抗体的比较 | 第30-31页 |
·抗体性质的研究 | 第31-36页 |
·包被抗原和单链抗体浓度范围的确定 | 第31页 |
·包被抗原和单链抗体最佳工作浓度的确定 | 第31-32页 |
·半数抑制率IC_(50) 和抗体交叉反应的测定 | 第32-33页 |
·冷藏对抗体活性的影响 | 第33-34页 |
·冷冻干燥对抗体活性的影响 | 第34页 |
·温度对抗体活性的影响 | 第34-35页 |
·pH 对抗体活性的影响 | 第35-36页 |
4 结论与展望 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43-44页 |