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抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因的改造、表达纯化和性质研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
1 引言第8-13页
   ·黄曲霉毒素的介绍第8页
   ·黄曲霉毒素的结构、毒性和致癌性第8页
   ·黄曲霉毒素的检测第8-9页
     ·薄层色谱法( TLC )第9页
     ·高效液相色谱法(HPLC)第9页
     ·酶联免疫吸附法(ELISA)第9页
   ·抗体的发展第9-10页
     ·抗体的发展第9页
     ·小分子抗体scFv,Fv第9-10页
   ·噬菌体单链抗体文库第10-11页
     ·噬菌体抗体的筛选第10-11页
   ·原核及真核表达系统研究进展第11-12页
     ·大肠杆菌表达系统研究进展第11页
     ·真核表达系统研究进展第11-12页
   ·研究的意义和内容第12-13页
     ·研究的意义第12页
     ·研究的内容第12-13页
2 实验材料与方法第13-23页
   ·实验材料第13-16页
     ·基因、菌株和质粒第13页
     ·实验主要仪器第13-14页
     ·实验主要试剂第14页
     ·培养基配制第14-15页
     ·溶液的配制第15-16页
     ·所用引物序列第16页
   ·实验方法第16-23页
     ·抗黄曲霉毒素B1 单链抗体基因H4 的定点突变第17-19页
     ·BL21(DE3)-pET226-H4-Glu 的构建和诱导表达第19-20页
     ·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的构建和诱导表达第20-21页
     ·抗体性质的测定第21-23页
3 结果与讨论第23-36页
   ·抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因 H4 的定点突变第23-25页
     ·pUCX05-H4 的验证第23页
     ·pUCX05-H4-Glu 的验证第23-25页
   ·BL21(DE3)-PET228-H4-GLU 的构建和诱导表达第25-27页
     ·pUCX05-H4-Glu(Nco I,Not I)和pET226-H4-Glu 的构建第25-26页
     ·BL21(DE3)-pET226-H4-Glu 诱导表达第26-27页
     ·抗体的特异性鉴定第27页
     ·大肠杆菌中抗体的表达量第27页
   ·GG799-PKLAC1-H4-GLU 的构建和诱导表达第27-30页
     ·表达载体pKLAC1-H4-Glu 的验证第27-28页
     ·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的构建、验证及单拷贝多拷贝的鉴定第28-29页
     ·GG799-pKLAC1-H4-Glu 的诱导表达第29-30页
   ·原核和真核表达系统表达抗AFB1 单链抗体的比较第30-31页
   ·抗体性质的研究第31-36页
     ·包被抗原和单链抗体浓度范围的确定第31页
     ·包被抗原和单链抗体最佳工作浓度的确定第31-32页
     ·半数抑制率IC_(50) 和抗体交叉反应的测定第32-33页
     ·冷藏对抗体活性的影响第33-34页
     ·冷冻干燥对抗体活性的影响第34页
     ·温度对抗体活性的影响第34-35页
     ·pH 对抗体活性的影响第35-36页
4 结论与展望第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-43页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第43-44页

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