| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一章 整合素与细胞迁移相关研究进展 | 第11-24页 |
| ·中性粒细胞简述 | 第11-12页 |
| ·中性粒细胞概述 | 第11页 |
| ·中性粒细胞的功能 | 第11-12页 |
| ·细胞迁移简述 | 第12-15页 |
| ·细胞迁移的概念 | 第12页 |
| ·细胞迁移的信号调控 | 第12-13页 |
| ·细胞迁移的功能 | 第13-14页 |
| ·研究细胞迁移的意义 | 第14-15页 |
| ·整合素 | 第15-24页 |
| ·整合素的概念 | 第15页 |
| ·整合素的结构 | 第15-17页 |
| ·整合素的活性调控 | 第17-18页 |
| ·整合素配体 | 第18-19页 |
| ·整合素的功能 | 第19-22页 |
| ·整合素参与细胞迁移的过程 | 第22-23页 |
| ·研究整合素的意义 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-63页 |
| 第二章 整合素在中性粒细胞迁移中的定位研究 | 第24-50页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·主要试剂、抗体和工具酶 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·主要仪器与设备 | 第24页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第24-26页 |
| ·主要分子生物学软件及在线分析工具 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-35页 |
| ·免疫荧光染色 | 第27页 |
| ·RNA 提取 | 第27-28页 |
| ·反转录合成cDNA | 第28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的加尾 | 第29页 |
| ·PCR 产物的回收及 T 载体连接 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·连接产物（T-β_1、T-β_2）转化 DH5α大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| ·重组质粒(T-β_1、T-β_2)的提取 | 第30-31页 |
| ·整合素β_1、β_2 基因序列的测定与结果分析 | 第31页 |
| ·pEYFP-N_1-β_1 与pEYFP-N_1-β_2 质粒的构建 | 第31页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·慢病毒表达质粒pWPXLd-β_1、pWPXLd-β_2 的构建 | 第31-32页 |
| ·阳性重组质粒的大量提取 | 第32页 |
| ·重组表达质粒的 Western blot 检测 | 第32-34页 |
| ·真核重组表达质粒在dHL-60 细胞中的瞬时表达 | 第34页 |
| ·293T 细胞包装慢病毒 | 第34页 |
| ·包装病毒对HL-60 细胞的感染 | 第34页 |
| ·细胞运动检测 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-48页 |
| ·整合素β_1、β_2 亚基免疫荧光染色结果 | 第35-36页 |
| ·RNA 提取结果. | 第36页 |
| ·整合素β_1、β_2 亚基基因的 PCR 扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第37页 |
| ·测序结果及分析 | 第37-45页 |
| ·重组表达质粒的 Western blot 检测 | 第45页 |
| ·重组表达质粒瞬时表达dHL-60 细胞的运动检测 | 第45-47页 |
| ·整合素β_1、β_2 亚基在HL-60 细胞中的稳定表达 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三章 整合素与细胞迁移中主要信号分子的相互作用分析 | 第50-63页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·细胞株 | 第50页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·试剂配制 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-54页 |
| ·RNA 提取及cDNA 第一链合成 | 第51页 |
| ·整合素β_1、β_2 亚基胞内区的 PCR 扩增 | 第51页 |
| ·整合素β_1、β_2 亚基胞内区的基因克隆 | 第51-52页 |
| ·整合素β_1、β_2 基因胞内区在 E.coli BL21（DE3）宿主菌中的诱导表达 | 第52-53页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第53页 |
| ·目的蛋白的提取及纯化 | 第53-54页 |
| ·靶蛋白在 COS-7 细胞中的过表达. | 第54页 |
| ·GST Pull-down 实验筛选与整合素相互作用的信号分子 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-61页 |
| ·RNA 提取. | 第54-55页 |
| ·整合素β_1、β_2 胞内区的 PCR 扩增 | 第55页 |
| ·重组表达质粒 GST-β_1 和 GST-β_2 的鉴定 | 第55-56页 |
| ·基因序列测定及结果分析 | 第56页 |
| ·整合素β_1、β_2 基因胞内区 GST 融合蛋白的诱导表达 | 第56-59页 |
| ·原核融合蛋白的可溶性分析 | 第59页 |
| ·原核融合蛋白的纯化 | 第59-60页 |
| ·绿色荧光蛋白标记的靶蛋白在COS-7 细胞中的表达 | 第60-61页 |
| ·GST Pull-down 实验初步筛选与整合素相互作用的信号分子 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介 | 第74页 |
