摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
文献综述 | 第13-29页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展 | 第13-29页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒生物学特性 | 第14-15页 |
·病毒的形态特征 | 第14页 |
·病毒的侵入和释放 | 第14页 |
·病毒的培养特性 | 第14-15页 |
·病毒的抵抗力 | 第15页 |
·病毒的血凝特性 | 第15页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究 | 第15-18页 |
·病毒的基因组结构与特点 | 第15-16页 |
·PRRSV 的分子遗传变异 | 第16-18页 |
·ORF 1 的遗传变异 | 第16-17页 |
·结构蛋白编码区的遗传变异 | 第17-18页 |
·PRRSV 的流行病学研究 | 第18-19页 |
·PRRS 的临床症状 | 第19-21页 |
·诊断研究 | 第21-23页 |
·病毒分离 | 第21页 |
·抗原检测 | 第21-22页 |
·血清学试验检测抗体 | 第22页 |
·免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA) | 第22页 |
·荧光抗体试验(IFA) | 第22页 |
·血清中和试验(SN) | 第22页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第22页 |
·分子生物学检测方法 | 第22-23页 |
·原位杂交技术(ISH) | 第22-23页 |
·RT-PCR 技术 | 第23页 |
·免疫学研究 | 第23-27页 |
·感染免疫反应 | 第23-24页 |
·对免疫细胞的影响 | 第24页 |
·体液免疫 | 第24-25页 |
·细胞免疫 | 第25-26页 |
·细胞因子的产生 | 第26页 |
·抗体依赖性增强作用 | 第26-27页 |
·PRRSV 与其他病原体的相互作用 | 第27页 |
·疫苗免疫 | 第27-29页 |
试验研究 | 第29-67页 |
第二章 陕西省PRRSV 与CSFV、PCV2、PRV 混合感染的检测 | 第29-35页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·主要试验仪器 | 第29-30页 |
·主要试剂和耗材 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-32页 |
·病例与猪群的调查 | 第30页 |
·病料的采集及处理 | 第30页 |
·引物合成 | 第30-31页 |
·PRRSV 和CSFV 的RT-PCR 检测 | 第31页 |
·PCV2 和PRV 的PCR 检测 | 第31-32页 |
·结果 | 第32-34页 |
·猪病料中PRRSV、CSFV、PCV2 和PRV 的检测结果 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第三章 陕西省PRRSV 流行毒株的分离与初步鉴定 | 第35-43页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·主要试验仪器 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35-36页 |
·细胞与单克隆抗体 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-38页 |
·培养基的配制 | 第36页 |
·细胞培养用试剂的配制 | 第36-37页 |
·引物设计 | 第37页 |
·细胞培养 | 第37页 |
·病毒分离 | 第37页 |
·间接免疫荧光检测 | 第37-38页 |
·结果 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-43页 |
第四章 陕西省PRRSV 流行毒株主要基因片段的序列分析 | 第43-60页 |
·实验材料 | 第43-45页 |
·毒株 | 第43页 |
·菌株、质粒 | 第43页 |
·主要仪器 | 第43-44页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第44页 |
·PRRSV 分离株核苷酸序列 | 第44-45页 |
·分子生物学分析软件 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-49页 |
·PRRSV 病毒的增殖 | 第45页 |
·引物设计 | 第45-46页 |
·PRRSV 感染的MARC-145 细胞中病毒总RNA 的提取 | 第46页 |
·各段基因的扩增 | 第46-47页 |
·RT-PCR 产物的鉴定 | 第47页 |
·PCR 产物的纯化回收cDNA 片段 | 第47页 |
·纯化产物与pMD-18T Vector 连接 | 第47页 |
·感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第47-48页 |
·连接产物的转化 | 第48页 |
·重组质粒的提取 | 第48-49页 |
·重组质粒的PCR 鉴定 | 第49页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第49页 |
·重组质粒的测序分析 | 第49页 |
·本研究分离毒株基因序列变异分析 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-57页 |
·PRRSV 各个基因片段的RT-PCR 扩增结果 | 第49-50页 |
·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第50页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第50页 |
·各个基因片段的测序与序列拼接 | 第50-51页 |
·NSP2 的氨基酸序列分析 | 第51-52页 |
·各结构蛋白核苷酸序列及其推导氨基酸序列相似性比较 | 第52-54页 |
·系统进化分析 | 第54-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·关于PRRSV 的变异 | 第57-58页 |
·NSP2 区段的变异 | 第58页 |
·结构蛋白编码区的变异 | 第58页 |
·PRRSV 的系统进化分析 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的致病性研究 | 第60-67页 |
·试验材料 | 第60页 |
·毒株 | 第60页 |
·试剂 | 第60页 |
·试验动物 | 第60页 |
·试验方法 | 第60-62页 |
·病毒增殖 | 第60页 |
·病毒TCID50 的测定 | 第60页 |
·致病性试验 | 第60-62页 |
·血清中PRRSV 抗体的检测 | 第61页 |
·中和试验 | 第61-62页 |
·结果 | 第62-65页 |
·病毒的增殖 | 第62页 |
·TCID50 测定 | 第62页 |
·致病性试验 | 第62-65页 |
·体温变化 | 第62-63页 |
·临床症状 | 第63页 |
·抗原和抗体检测结果 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
英文缩略词及中英文对照 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77页 |