| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-12页 |
| Abstract | 第12-19页 |
| 目次 | 第19-23页 |
| 绪论 | 第23-27页 |
| 1 第一部分 维甲酸信号通路调控人间充质干细胞向成骨细胞分化的作用及其机制研究 | 第27-65页 |
| ·引言 | 第27-29页 |
| ·实验材料与仪器 | 第29-32页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·药物与主要试剂 | 第29-31页 |
| ·实验仪器与主要材料 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·hMSCs定向诱导成骨分化 | 第32页 |
| ·台盼蓝拒染法检测hMSCs细胞增殖活性 | 第32页 |
| ·茜素红染色 | 第32-33页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第33页 |
| ·碱性磷酸酶活性的检测 | 第33页 |
| ·RT-PCR测定相关基因表达水平的变化 | 第33-35页 |
| ·Western Blotting检测相关蛋白表达水平的变化 | 第35-36页 |
| ·基因芯片分析 | 第36-40页 |
| ·F9 report assay检测内源的RA分泌 | 第40页 |
| ·慢病毒的包装、滴度测定及靶细胞转染 | 第40-41页 |
| ·数据分析 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-61页 |
| ·RA对hMSCs细胞增殖能力的影响 | 第42-44页 |
| ·RA对hMSCs成骨分化能力的影响 | 第44-46页 |
| ·RA对hMSCs碱性磷酸酶活性的影响 | 第46-48页 |
| ·RA联合Dex对hMSCs细胞增殖能力的影响 | 第48页 |
| ·RA对hMSCs成骨分化调控基因和相关标记物表达的影响 | 第48-49页 |
| ·RA对hMSCs成骨分化上游信号通路的影响 | 第49-51页 |
| ·RA对hMSCs基因表达谱的影响 | 第51-52页 |
| ·hMSCs细胞内源性RA的检测 | 第52-53页 |
| ·RARαS77A对hMSCs的成骨分化能力的影响 | 第53-58页 |
| ·BMP8和FGF8f在hMSCs的过表达及其对hMSCs成骨分化能力的影响 | 第58-61页 |
| ·讨论 | 第61-65页 |
| 2 第二部分 人骨肉瘤肿瘤起始细胞以及骨肉瘤肿瘤形成细胞的鉴定 | 第65-109页 |
| ·引言 | 第65-67页 |
| ·实验材料与仪器 | 第67-69页 |
| ·细胞株 | 第67页 |
| ·药物与主要试剂 | 第67-68页 |
| ·实验仪器与主要材料 | 第68页 |
| ·实验动物 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-75页 |
| ·细胞培养 | 第69页 |
| ·裸小鼠异位移植瘤模型评价骨肉瘤细胞成瘤能力 | 第69页 |
| ·裸小鼠原位移植瘤模型 | 第69-70页 |
| ·移植瘤的体外培养 | 第70页 |
| ·移植瘤的H&E染色 | 第70页 |
| ·干细胞球的培养 | 第70页 |
| ·基因芯片分析 | 第70-71页 |
| ·流式细胞术检测骨肉瘤细胞表面抗原表达情况 | 第71页 |
| ·细胞分选 | 第71-72页 |
| ·流式细胞术检测CD49f~+骨肉瘤细胞的抗原谱系表达 | 第72页 |
| ·分选的骨肉瘤细胞定向诱导成骨和脂肪分化 | 第72页 |
| ·茜素红染色 | 第72页 |
| ·油红O染色 | 第72-73页 |
| ·基于XTT的细胞增殖检测法 | 第73页 |
| ·Realtime PCR测定相关基因表达水平的变化 | 第73-74页 |
| ·数据分析 | 第74-75页 |
| ·实验结果 | 第75-105页 |
| ·连续的裸小鼠移植瘤实验对人骨肉瘤U20S细胞成瘤能力的影响 | 第75-78页 |
| ·UT2细胞的干细胞特性的鉴定 | 第78-82页 |
| ·OSICs可产生形成肿瘤组织的CD49f~+细胞 | 第82-87页 |
| ·CD49f~-细胞亚群和CD49f~+细胞亚群的生物学鉴定 | 第87-94页 |
| ·其他肿瘤干细胞标记抗原的鉴定 | 第94-99页 |
| ·CD49f~-CD133~+作为OSICs潜在分选标记物的鉴定 | 第99-105页 |
| ·讨论 | 第105-109页 |
| 3 第三部分调控骨生成和骨肉瘤发生的差异基因表达谱研究 | 第109-130页 |
| ·引言 | 第109-111页 |
| ·实验材料与仪器 | 第111页 |
| ·细胞株 | 第111页 |
| ·药物与主要试剂 | 第111页 |
| ·仪器 | 第111页 |
| ·实验方法 | 第111-112页 |
| ·基因芯片分析 | 第111-112页 |
| ·实验结果 | 第112-127页 |
| ·调控骨肉瘤发生的基因表达谱概述 | 第112-114页 |
| ·调控骨生成和骨肉瘤发生的差异基因表达谱研究 | 第114-127页 |
| ·讨论 | 第127-130页 |
| 参考文献 | 第130-138页 |
| 综述 | 第138-152页 |
| 参考文献 | 第148-152页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第152-154页 |
