中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
1 前言 | 第10-17页 |
·荒漠沙蜥简介 | 第10页 |
·蜥蜴皮肤及其感受器的研究现状及意义 | 第10-11页 |
·荒漠沙蜥皮肤的结构及功能 | 第11-14页 |
·荒漠沙蜥皮肤的形态结构 | 第11-12页 |
·蜕皮周期 | 第12页 |
·荒漠沙蜥皮肤的功能 | 第12-14页 |
·皮肤感受器的形态结构与功能 | 第14-15页 |
·皮肤感受器的形态及分布 | 第14页 |
·皮肤感受器的表皮结构 | 第14页 |
·皮肤感受器的功能 | 第14-15页 |
·皮肤发育有关的主要蛋白及转录因子 | 第15-17页 |
·β—keratin | 第15页 |
·Shh基因 | 第15-17页 |
2 荒漠沙蜥皮肤及感受器的组织形态学研究 | 第17-24页 |
·实验仪器与材料 | 第17-18页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·实验材料 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-19页 |
·组织切片的制作 | 第18-19页 |
·结果与分析 | 第19-22页 |
·荒漠沙蜥皮肤及感受器的组织结构 | 第19-22页 |
·皮肤 | 第19页 |
·感受器 | 第19-22页 |
·讨论 | 第22-24页 |
3 荒漠沙蜥皮肤β—keratin基因的克隆、序列分析及原位杂交 | 第24-38页 |
·实验仪器与材料 | 第24-28页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·实验材料 | 第25页 |
·大肠杆菌DH5α | 第25页 |
·引物设计 | 第25页 |
·pGEM(?)-T Easy载体 | 第25-26页 |
·培养基及溶液的配制 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-34页 |
·β—keratin基因的扩增及克隆 | 第28-31页 |
·总RNA的提取 | 第28-29页 |
·RT-PCR | 第29-30页 |
·扩增产物的电泳检测 | 第30页 |
·扩增产物的回收纯化 | 第30页 |
·纯化产物与pGEM-T Easy载体连接 | 第30-31页 |
·连接后的转化及蓝白斑筛选 | 第31页 |
·质粒DNA的提取纯化 | 第31页 |
·酶切检测 | 第31页 |
·生物信息学分析 | 第31-32页 |
·EF—2探针的制备 | 第32-33页 |
·探针的制备 | 第32页 |
·酶切线性化质粒DNA | 第32页 |
·DIG标记RNA探针 | 第32-33页 |
·DIG标记的RNA探针在组织中的表达—原位杂交 | 第33-34页 |
·如果与分析 | 第34-37页 |
·RNA提取及检测 | 第34页 |
·RT-PCR扩增及电泳 | 第34-35页 |
·质粒DNA酶切纯化结果 | 第35页 |
·序列及同源性分析 | 第35-36页 |
·原位杂交结果 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
4 Shh基因在荒漠沙蜥皮肤及感受器中的表达 | 第38-44页 |
·实验仪器与材料 | 第38-39页 |
·pEGFP-N1载体 | 第38-39页 |
·其它材料、试剂、仪器与3相同(详见3部分) | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·Shh探针的制备 | 第39-40页 |
·Shh pEGFP-N1-质粒的转化 | 第39页 |
·Shh质粒DNA提取 | 第39页 |
·DNA模板的酶切线性化 | 第39-40页 |
·Shh探针的标记 | 第40页 |
·DIG标记的RNA探针在组织中的表达—原位杂交 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-42页 |
·Shh原位杂交结果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
5 参考文献 | 第44-49页 |
6 附录1 AJ890445基因序列在Genebank的登陆信息 | 第49-51页 |
7 致谢 | 第51页 |