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荒漠沙蜥皮肤及皮肤感受器的研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
1 前言第10-17页
   ·荒漠沙蜥简介第10页
   ·蜥蜴皮肤及其感受器的研究现状及意义第10-11页
   ·荒漠沙蜥皮肤的结构及功能第11-14页
     ·荒漠沙蜥皮肤的形态结构第11-12页
     ·蜕皮周期第12页
     ·荒漠沙蜥皮肤的功能第12-14页
   ·皮肤感受器的形态结构与功能第14-15页
     ·皮肤感受器的形态及分布第14页
     ·皮肤感受器的表皮结构第14页
     ·皮肤感受器的功能第14-15页
   ·皮肤发育有关的主要蛋白及转录因子第15-17页
     ·β—keratin第15页
     ·Shh基因第15-17页
2 荒漠沙蜥皮肤及感受器的组织形态学研究第17-24页
   ·实验仪器与材料第17-18页
     ·实验仪器第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·实验材料第18页
   ·实验方法第18-19页
     ·组织切片的制作第18-19页
   ·结果与分析第19-22页
     ·荒漠沙蜥皮肤及感受器的组织结构第19-22页
       ·皮肤第19页
       ·感受器第19-22页
   ·讨论第22-24页
3 荒漠沙蜥皮肤β—keratin基因的克隆、序列分析及原位杂交第24-38页
   ·实验仪器与材料第24-28页
     ·实验仪器第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·实验材料第25页
     ·大肠杆菌DH5α第25页
     ·引物设计第25页
     ·pGEM(?)-T Easy载体第25-26页
     ·培养基及溶液的配制第26-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·β—keratin基因的扩增及克隆第28-31页
       ·总RNA的提取第28-29页
       ·RT-PCR第29-30页
       ·扩增产物的电泳检测第30页
       ·扩增产物的回收纯化第30页
       ·纯化产物与pGEM-T Easy载体连接第30-31页
       ·连接后的转化及蓝白斑筛选第31页
       ·质粒DNA的提取纯化第31页
       ·酶切检测第31页
     ·生物信息学分析第31-32页
     ·EF—2探针的制备第32-33页
       ·探针的制备第32页
       ·酶切线性化质粒DNA第32页
       ·DIG标记RNA探针第32-33页
     ·DIG标记的RNA探针在组织中的表达—原位杂交第33-34页
   ·如果与分析第34-37页
     ·RNA提取及检测第34页
     ·RT-PCR扩增及电泳第34-35页
     ·质粒DNA酶切纯化结果第35页
     ·序列及同源性分析第35-36页
     ·原位杂交结果第36-37页
   ·讨论第37-38页
4 Shh基因在荒漠沙蜥皮肤及感受器中的表达第38-44页
   ·实验仪器与材料第38-39页
     ·pEGFP-N1载体第38-39页
     ·其它材料、试剂、仪器与3相同(详见3部分)第39页
   ·实验方法第39-41页
     ·Shh探针的制备第39-40页
       ·Shh pEGFP-N1-质粒的转化第39页
       ·Shh质粒DNA提取第39页
       ·DNA模板的酶切线性化第39-40页
       ·Shh探针的标记第40页
     ·DIG标记的RNA探针在组织中的表达—原位杂交第40-41页
   ·结果与分析第41-42页
     ·Shh原位杂交结果第41-42页
   ·讨论第42-44页
5 参考文献第44-49页
6 附录1 AJ890445基因序列在Genebank的登陆信息第49-51页
7 致谢第51页

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