摘要 | 第1-7页 |
Summary | 第7-10页 |
缩略词表 | 第10-14页 |
Ⅰ引言 | 第14页 |
Ⅱ文献综述 | 第14-33页 |
1 人参果的生产和研究现状 | 第14-15页 |
2 甜蛋白研究概述 | 第15-25页 |
·甜蛋白的种类、特性和应用 | 第15-19页 |
·MabinlinⅡ甜蛋白基因(MBLⅡ)的结构特征 | 第19-22页 |
·Brazzein 甜蛋白基因的结构特征 | 第22-23页 |
·甜蛋白可能的甜味活性中心及甜味机理 | 第23-25页 |
3 真核基因表达调控 | 第25-33页 |
·转录水平启动子的调控 | 第25-28页 |
·E8 基因启动子 | 第26-27页 |
·多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因启动子 | 第27页 |
·2All 基因启动子 | 第27页 |
·ACC 合成酶基因启动子 | 第27-28页 |
·翻译及翻译后水平调控 | 第28-30页 |
·翻译后的剪接 | 第28-29页 |
·翻译后的修饰 | 第29-30页 |
·重组马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ的翻译后加工方案 | 第30-33页 |
Ⅲ本研究的目的意义 | 第33-34页 |
Ⅳ研究技术路线 | 第34-35页 |
Ⅴ材料与方法 | 第35-57页 |
1 材料 | 第35-36页 |
·植物材料 | 第35页 |
·菌种和质粒 | 第35页 |
·工具酶和试剂 | 第35页 |
·仪器 | 第35页 |
·培养基 | 第35-36页 |
·琼脂糖凝胶电泳缓冲液 | 第36页 |
2 方法 | 第36-40页 |
·DNA 的提取制备 | 第36-38页 |
·番茄基因组DNA 的提取 | 第36页 |
·E.coli 质粒DNA 小量碱法提取 | 第36-37页 |
·农杆菌Ti 质粒DNA 碱法小量提取 | 第37-38页 |
·PCR 产物及酶切产物的回收 | 第38-39页 |
·感受态细胞的制备及转化 | 第39-40页 |
3 人参果果实相关品质测定 | 第40-42页 |
·人参果果实可溶性糖的测定 | 第40-41页 |
·人参果果实可溶性固形物的测定 | 第41页 |
·人参果果实Vc 含量的测定 | 第41-42页 |
·人参果果实硬度的测定 | 第42页 |
4 基因克隆 | 第42-49页 |
·植物果实特异性启动子E8 的克隆 | 第42-45页 |
·甜蛋白基因Brazzein 的亚克隆 | 第45-47页 |
·甜蛋白基因MabinlinⅡ的亚克隆及重组 | 第47-49页 |
5 植物表达载体的构建 | 第49-55页 |
·E8 启动子驱动的中间载体的构建 | 第52-54页 |
·载体pHANNIBAL-E8 的构建 | 第52-53页 |
·中间载体pH-E8-Bra 的构建 | 第53-54页 |
·中间载体pH-E8-Mab 的构建 | 第54页 |
·植物表达载体的构建 | 第54-55页 |
·植物表达载体pCA-E8-Bra 的构建 | 第54-55页 |
·植物表达载体pCA-E8-Mab 的构建 | 第55页 |
6 甜蛋白基因植物表达载体转化农杆菌C58C1 | 第55-56页 |
7 人参果植株再生体系建立的初步研究 | 第56-57页 |
Ⅵ结果与分析 | 第57-72页 |
1 人参果果实相关品质测定结果 | 第57-58页 |
·标准曲线制定结果 | 第57页 |
·人参果果实的相关品质测定结果 | 第57-58页 |
2 番茄基因组DNA 的提取 | 第58页 |
3 目的基因的克隆与亚克隆结果 | 第58-66页 |
·E8 启动子基因的克隆与结果鉴定 | 第58-62页 |
·植物甜蛋白基因Brazzein 的亚克隆与结果鉴定 | 第62-64页 |
·重组MBLII 基因的亚克隆与鉴定 | 第64-66页 |
4 植物表达载体构建鉴定结果 | 第66-70页 |
·中间载体构建鉴定结果 | 第66-68页 |
·pHANNIBAL-E8 载体构建鉴定结果 | 第66页 |
·pH-E8-Bra 载体构建鉴定结果 | 第66-67页 |
·pH-E8-Mab 载体构建鉴定结果 | 第67-68页 |
·植物表达载体构建鉴定结果 | 第68-70页 |
·植物表达载体pCA-E8-Bra 构建鉴定结果 | 第68-69页 |
·植物表达载体pCA-E8-Mab 构建鉴定结果 | 第69-70页 |
5 甜蛋白基因植物表达载体转化工程农杆菌的PCR 鉴定 | 第70页 |
6 人参果再生体系建立的初步研究 | 第70-72页 |
Ⅵ讨论 | 第72-75页 |
结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
附图 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
导师简介 | 第85-87页 |
作者简介 | 第87页 |