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重组甜蛋白Brazzein和MBLⅡ基因植物表达载体构建及人参果再生体系的建立

摘要第1-7页
Summary第7-10页
缩略词表第10-14页
Ⅰ引言第14页
Ⅱ文献综述第14-33页
 1 人参果的生产和研究现状第14-15页
 2 甜蛋白研究概述第15-25页
   ·甜蛋白的种类、特性和应用第15-19页
   ·MabinlinⅡ甜蛋白基因(MBLⅡ)的结构特征第19-22页
   ·Brazzein 甜蛋白基因的结构特征第22-23页
   ·甜蛋白可能的甜味活性中心及甜味机理第23-25页
 3 真核基因表达调控第25-33页
   ·转录水平启动子的调控第25-28页
     ·E8 基因启动子第26-27页
     ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因启动子第27页
     ·2All 基因启动子第27页
     ·ACC 合成酶基因启动子第27-28页
   ·翻译及翻译后水平调控第28-30页
     ·翻译后的剪接第28-29页
     ·翻译后的修饰第29-30页
   ·重组马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ的翻译后加工方案第30-33页
Ⅲ本研究的目的意义第33-34页
Ⅳ研究技术路线第34-35页
Ⅴ材料与方法第35-57页
 1 材料第35-36页
   ·植物材料第35页
   ·菌种和质粒第35页
   ·工具酶和试剂第35页
   ·仪器第35页
   ·培养基第35-36页
   ·琼脂糖凝胶电泳缓冲液第36页
 2 方法第36-40页
   ·DNA 的提取制备第36-38页
     ·番茄基因组DNA 的提取第36页
     ·E.coli 质粒DNA 小量碱法提取第36-37页
     ·农杆菌Ti 质粒DNA 碱法小量提取第37-38页
   ·PCR 产物及酶切产物的回收第38-39页
   ·感受态细胞的制备及转化第39-40页
 3 人参果果实相关品质测定第40-42页
   ·人参果果实可溶性糖的测定第40-41页
   ·人参果果实可溶性固形物的测定第41页
   ·人参果果实Vc 含量的测定第41-42页
   ·人参果果实硬度的测定第42页
 4 基因克隆第42-49页
   ·植物果实特异性启动子E8 的克隆第42-45页
   ·甜蛋白基因Brazzein 的亚克隆第45-47页
   ·甜蛋白基因MabinlinⅡ的亚克隆及重组第47-49页
 5 植物表达载体的构建第49-55页
   ·E8 启动子驱动的中间载体的构建第52-54页
     ·载体pHANNIBAL-E8 的构建第52-53页
     ·中间载体pH-E8-Bra 的构建第53-54页
     ·中间载体pH-E8-Mab 的构建第54页
   ·植物表达载体的构建第54-55页
     ·植物表达载体pCA-E8-Bra 的构建第54-55页
     ·植物表达载体pCA-E8-Mab 的构建第55页
 6 甜蛋白基因植物表达载体转化农杆菌C58C1第55-56页
 7 人参果植株再生体系建立的初步研究第56-57页
Ⅵ结果与分析第57-72页
 1 人参果果实相关品质测定结果第57-58页
   ·标准曲线制定结果第57页
   ·人参果果实的相关品质测定结果第57-58页
 2 番茄基因组DNA 的提取第58页
 3 目的基因的克隆与亚克隆结果第58-66页
   ·E8 启动子基因的克隆与结果鉴定第58-62页
   ·植物甜蛋白基因Brazzein 的亚克隆与结果鉴定第62-64页
   ·重组MBLII 基因的亚克隆与鉴定第64-66页
 4 植物表达载体构建鉴定结果第66-70页
   ·中间载体构建鉴定结果第66-68页
     ·pHANNIBAL-E8 载体构建鉴定结果第66页
     ·pH-E8-Bra 载体构建鉴定结果第66-67页
     ·pH-E8-Mab 载体构建鉴定结果第67-68页
   ·植物表达载体构建鉴定结果第68-70页
     ·植物表达载体pCA-E8-Bra 构建鉴定结果第68-69页
     ·植物表达载体pCA-E8-Mab 构建鉴定结果第69-70页
 5 甜蛋白基因植物表达载体转化工程农杆菌的PCR 鉴定第70页
 6 人参果再生体系建立的初步研究第70-72页
Ⅵ讨论第72-75页
结论第75-76页
参考文献第76-83页
附图第83-84页
致谢第84-85页
导师简介第85-87页
作者简介第87页

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