| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-25页 |
| 第一章 斜纹夜蛾与杆状病毒研究进展 | 第13-25页 |
| ·农林害虫斜纹夜蛾 | 第13-15页 |
| ·农林害虫斜纹夜蛾的习性特征 | 第13-14页 |
| ·斜纹夜蛾对农业生产的危害 | 第14页 |
| ·农业害虫的治理 | 第14-15页 |
| ·生物防治 | 第15-16页 |
| ·利用害虫天敌防治害虫 | 第15页 |
| ·利用作物对病虫害的抗性防治 | 第15页 |
| ·利用病原微生物防治害虫 | 第15-16页 |
| ·昆虫杆状病毒 | 第16-25页 |
| ·昆虫杆状病毒分类与命名 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒的感染周期 | 第17-18页 |
| ·杆状病毒基因组 | 第18-21页 |
| ·昆虫杆状病毒的应用 | 第21-25页 |
| 第二部分 实验研究报告 | 第25-84页 |
| 第二章 研究意义及研究方案 | 第25-31页 |
| ·立题依据和意义 | 第25-29页 |
| ·SpltNPVⅡ的基因组分析 | 第25-27页 |
| ·SpltNPVⅡ的ORF50 序列分析 | 第27-29页 |
| ·研究方案 | 第29-30页 |
| ·主要研究路线 | 第30-31页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第31-50页 |
| ·实验材料 | 第31-38页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·工具酶及Kit | 第31-32页 |
| ·主要实验试剂与配制 | 第32-38页 |
| ·常用实验仪器设备 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-50页 |
| ·SpltNPVⅡODVs 组成蛋白样品的制备 | 第39页 |
| ·SpltNPVⅡBVs 组成蛋白样品的制备 | 第39页 |
| ·SpltNPVⅡ基因组DNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·基因片段的PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·玻璃奶法纯化回收DNA 片段 | 第41页 |
| ·DNA 片段与载体连接 | 第41页 |
| ·E.coli 热激感受态细胞的小量制备 | 第41-42页 |
| ·质粒DNA 或连接产物的热转化 | 第42页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| ·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第43页 |
| ·DNA 和RNA 浓度测定 | 第43页 |
| ·酶切 | 第43页 |
| ·菌种保存 | 第43页 |
| ·重组表达菌的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·融合表达蛋白的鉴定 | 第44页 |
| ·BL21 的IPTG 诱导大量表达 | 第44页 |
| ·包涵体蛋白的洗涤与变性溶解 | 第44页 |
| ·Ni 柱纯化His Tag 蛋白 | 第44-45页 |
| ·Bradford 法测定蛋白浓度 | 第45页 |
| ·Ni+-NTA 树脂的再生 | 第45-46页 |
| ·ELISA 酶联免疫吸附测定：间接法测定效价 | 第46页 |
| ·酶联免疫吸附测定（Western blotting） | 第46-47页 |
| ·萤光素酶标记的启动子活性分析 | 第47页 |
| ·利用Trizol 抽提组织总RNA | 第47-48页 |
| ·RT-PCR | 第48-49页 |
| ·荧光定量PCR（Realtime Quantitative PCR） | 第49-50页 |
| 第四章 SpltNPVⅡODVs 与BVs 组成型蛋白比较分析 | 第50-55页 |
| ·引言 | 第50-51页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·SpltNPVⅡ病毒 | 第51页 |
| ·实验试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-54页 |
| ·SDS-PAGE 结果 | 第52-53页 |
| ·质谱分析 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 SpltNPVⅡORF50 基因的的克隆与表达 | 第55-61页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-60页 |
| ·PCR 扩增与TA 克隆 | 第57-58页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中诱导融合表达 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第六章 gp50 蛋白的纯化及其抗体的制备 | 第61-69页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-63页 |
| ·实验材料 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-68页 |
| ·Ni+-NTA 树脂蛋白纯化结果及分析 | 第63-64页 |
| ·纯化蛋白的质谱分析鉴定 | 第64-65页 |
| ·Bradford 法测定浓缩纯化蛋白浓度 | 第65-66页 |
| ·gp50 抗体的制备与鉴定 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| 第七章 SpltNPVⅡORF50 基因的启动子活性分析 | 第69-75页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·材料与方法 | 第69-71页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-73页 |
| ·pMD18T-50P 克隆载体的构建与DNA 测序鉴定 | 第71-72页 |
| ·启动子分析载体pGL3-Basic-50P 的构建及鉴定 | 第72页 |
| ·SpltNPVⅡORF50 基因的启动子基因50P 活性分析 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 第八章 SpltNPVⅡORF50 基因的时相转录表达分析 | 第75-82页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-77页 |
| ·感染病毒的细胞与虫体分时相收取 | 第75-76页 |
| ·组织总RNA 抽提 | 第76页 |
| ·RT-PCR | 第76页 |
| ·荧光定量PCR（Real time Quantitative PCR） | 第76-77页 |
| ·Western blotting 时相分析 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-81页 |
| ·RT-PCR 时相分析 | 第77页 |
| ·荧光定量PCR 时相分析 | 第77-81页 |
| ·蛋白免疫印迹检测表达时相分析 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| 第九章 全文总结 | 第82-84页 |
| ·斜纹夜蛾与杆状病毒 | 第82页 |
| ·斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ及其ORF50 | 第82-83页 |
| ·ORF50 的转录表达时相分析 | 第83页 |
| ·有待进一步研究内容 | 第83页 |
| ·结束语 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 附录 | 第90-96页 |
| 1 研究所用载体图谱 | 第90-92页 |
| 2 测序图谱 | 第92-96页 |
| 缩略语表 | 第96-97页 |
| 在读期间发表论文 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
