| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·金属硫蛋白简介 | 第10-13页 |
| ·金属硫蛋白的定义及特点 | 第10页 |
| ·金属硫蛋白的结构 | 第10-11页 |
| ·金属硫蛋白的主要功能 | 第11-13页 |
| ·环境中的重金属污染及治理方法 | 第13-16页 |
| ·环境中重金属的污染情况 | 第13-14页 |
| ·重金属污染的治理方法 | 第14-16页 |
| ·MT 转基因在重金属污染修复方面的应用 | 第16-21页 |
| ·转MT 基因的工程菌在清除重金属污染方面的应用 | 第17-18页 |
| ·转MT 基因植物在重金属污染处理中的应用 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 蚯蚓金属硫蛋白（efMT）基因的克隆与表达 | 第22-42页 |
| ·主要实验材料 | 第22-23页 |
| ·蚯蚓、菌株与质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·培养基、缓冲液及其他溶液配方 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-35页 |
| ·蚯蚓MT（efMT）基因的获得及其TA 克隆 | 第25-30页 |
| ·efMT 基因阅读框架片段的制备 | 第30-31页 |
| ·载体pET-28a 和pET-DsbA 大片段的制备 | 第31-32页 |
| ·表达载体pET-28a 与pET-DsbA 与efMT 基因的连接及转化 | 第32页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定及对表达宿主菌DE3 的转化 | 第32-33页 |
| ·pET-DsbA-efMT 在E.coli DE3 中的诱导表达及SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·重组菌对ZnCl_2 的抗性分析 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·efMT 基因片段的克隆 | 第35-37页 |
| ·表达载体pET-28a-efMT 和pET-DsbA-efMT 的构建 | 第37-38页 |
| ·pET-DsbA-efMT 在E.coli 中的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·重组菌的ZnCl_2 抗性分析结果 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·蚯蚓的重金属诱导 | 第40页 |
| ·表达载体的选择 | 第40-41页 |
| ·影响efMT 基因在E.coli 中表达的因素分析 | 第41页 |
| ·efMT 基因的应用前景 | 第41-42页 |
| 第3章 efMT 基因对拟南芥的转化 | 第42-56页 |
| ·主要实验材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·培养基及其他溶液配方 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-50页 |
| ·efMT 基因植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·三亲交配法将载体pBI-efMT 和pPZP-efMT 导入农杆菌 | 第47-48页 |
| ·拟南芥的种植 | 第48-49页 |
| ·拟南芥的转化 | 第49页 |
| ·拟南芥Kan 筛选浓度实验 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·植物表达载体pBI-X 双酶切 | 第50页 |
| ·重组质粒的大小鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·农杆菌中表达载体的PCR 鉴定 | 第52-53页 |
| ·野生型拟南芥Kan 筛选浓度结果 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·表达载体转化农杆菌后的鉴定 | 第54页 |
| ·拟南芥栽培条件的摸索 | 第54页 |
| ·花序浸染法的体会 | 第54-55页 |
| ·最适Kan 筛选浓度的确定 | 第55-56页 |
| 第4章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
