| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-27页 |
| 1.1 乳腺癌的现状 | 第9页 |
| 1.2 乳腺癌的致病因素 | 第9-10页 |
| 1.3 乳腺癌的分型 | 第10-11页 |
| 1.4 乳腺癌的预防和治疗 | 第11页 |
| 1.5 Long non-coding RNA概述 | 第11-15页 |
| 1.5.1 Long non-coding RNA简介 | 第11-12页 |
| 1.5.2 Long non-coding RNA作用的分子机制 | 第12-13页 |
| 1.5.3 Long non-coding RNA与肿瘤 | 第13-15页 |
| 1.6 microRNA概述 | 第15-20页 |
| 1.6.1 microRNA的基本介绍 | 第15-16页 |
| 1.6.2 microRNA的生物发生 | 第16-18页 |
| 1.6.3 microRNA参与肿瘤的发生发展 | 第18-20页 |
| 1.7 竞争性内源RNA (ceRNA) | 第20-23页 |
| 1.8 乳腺癌的转移 | 第23-27页 |
| 第二章 长非编码RNA Linc00460通过调控miR-489-5p/FGF7/AKT信号轴促进乳腺癌的发生发展 | 第27-51页 |
| 2.1 实验结果 | 第27-48页 |
| 2.1.1 增高的Linc00460表达水平预示着乳腺癌病人的不良预后 | 第27-31页 |
| 2.1.2 Linc00460从体外和体内促进乳腺癌细胞进程 | 第31-34页 |
| 2.1.3 Linc00460在乳腺癌细胞中吸附miR-489-5p | 第34-36页 |
| 2.1.4 miR-489-5p在乳腺癌细胞中充当肿瘤抑制因子的角色 | 第36-38页 |
| 2.1.5 Linc00460和FGF7在乳腺癌细胞中竞争miR-489-5p的结合位点 | 第38-42页 |
| 2.1.6 Linc00460通过miR-489-5p/FGF7/AKT信号轴促进乳腺癌的进程 | 第42-48页 |
| 2.2 结论 | 第48-51页 |
| 第三章 材料与方法 | 第51-69页 |
| 3.1 乳腺癌病人临床组织样本 | 第51页 |
| 3.2 乳腺癌细胞系的培养 | 第51-52页 |
| 3.3 乳腺癌组织和细胞中总RNA和microRNA的提取 | 第52页 |
| 3.4 RNA的逆转录和实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第52-53页 |
| 3.5 相关质粒的构建 | 第53-57页 |
| 3.5.1 Linc00460过表达载体的构建(用于Linc00460的过表达) | 第53-54页 |
| 3.5.2 Linc00460的shRNA载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.5.3 Linc00460全长荧光报告载体的构建(用于荧光报告实验) | 第55页 |
| 3.5.4 Linc00460突变荧光报告载体构建(用于荧光报告实验) | 第55-56页 |
| 3.5.5 FGF7 3'-UTR的荧光报告载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.6 慢病毒的生产和稳转细胞系的构建 | 第57-58页 |
| 3.7 蛋白质抽提和免疫印迹(western blot) | 第58页 |
| 3.8 细胞活力测定实验(MTT) | 第58-60页 |
| 3.9 克隆形成实验 | 第60-61页 |
| 3.10 细胞体外迁移和侵袭实验 | 第61-62页 |
| 3.11 转染和荧光报告实验 | 第62-63页 |
| 3.12 生物素标记的pull-down实验 | 第63-65页 |
| 3.13 抗AGO2的RNA免疫沉淀实验 | 第65-66页 |
| 3.14 小鼠荷瘤实验 | 第66页 |
| 3.15 小鼠尾静脉检测肺转移实验 | 第66页 |
| 3.16 苏木素·伊红染色(HE染色)分析 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 附录A 实验试剂 | 第79-81页 |
| 附录B 实验主要仪器设备 | 第81-83页 |
| 附录C 实验室常规溶液配制 | 第83-87页 |
| 附录D 常规实验方法 | 第87-97页 |
| 附录E 文中所用所有寡核苷酸序列信息 | 第97-101页 |
| 附录F 文中所用所有抗体信息 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第105页 |
