| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第11页 |
| 1.2 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.2.1 花药发育过程 | 第11-13页 |
| 1.2.2 花药发育的分子调控 | 第13-17页 |
| 1.2.3 花粉萌发的研究概况 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 水稻材料和生长条件 | 第19页 |
| 2.2 转化载体和菌株 | 第19页 |
| 2.3 载体构建和遗传转化 | 第19-20页 |
| 2.4 基因序列及进化关系分析 | 第20-21页 |
| 2.5 核酸操作方法 | 第21-23页 |
| 2.5.1 DNA提取、PCR阳检及基因型鉴定 | 第21-22页 |
| 2.5.2 RNA提取、反转录和实时荧光定量PCR检测 | 第22-23页 |
| 2.5.3 原位杂交 | 第23页 |
| 2.6 突变体表型鉴定 | 第23-26页 |
| 2.6.1 水稻成熟花粉育性检测 | 第23-24页 |
| 2.6.2 水稻成熟花粉DAPI染色 | 第24页 |
| 2.6.3 花粉离体萌发 | 第24页 |
| 2.6.4 花粉管原位染色 | 第24-25页 |
| 2.6.5 花粉微丝标记染色 | 第25页 |
| 2.6.6 水稻花药发育细胞学切片 | 第25-26页 |
| 2.6.7 农艺性状统计 | 第26页 |
| 2.7 GO注释和共表达分析 | 第26-27页 |
| 2.8 引物信息 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-49页 |
| 3.1 小孢子有丝分裂相关基因PMR的功能研究 | 第29-41页 |
| 3.1.1 PMR的来源 | 第29-30页 |
| 3.1.2 PMR的基本结构和进化分析 | 第30-31页 |
| 3.1.3 PMR的时空表达模式 | 第31-32页 |
| 3.1.4 PMR-RNAi植株中目的基因表达量下降 | 第32-33页 |
| 3.1.5 PMR-RNAi植株的花粉育性和种子结实率显著降低 | 第33-34页 |
| 3.1.6 PMR-RNAi植株花粉败育是小孢子有丝分裂期异常所致 | 第34-37页 |
| 3.1.7 PMR-RNAi植株中花粉发育相关基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.1.8 PMR-CRISPR突变体的获取与表型鉴定 | 第38-39页 |
| 3.1.9 PMR的共表达网络分析 | 第39-41页 |
| 3.2 水稻花粉萌发相关基因OsSTA99的功能研究 | 第41-49页 |
| 3.2.1 OsSTA99的来源 | 第41-42页 |
| 3.2.2 OsSTA99的基本结构和进化分析 | 第42-43页 |
| 3.2.3 OsSTA99的表达分析 | 第43页 |
| 3.2.4 OsSTA99-RNAi植株中目的基因表达量下降 | 第43-44页 |
| 3.2.5 OsSTA99-RNAi植株的花粉萌发率和结实率均有显著降低 | 第44-46页 |
| 3.2.6 花药和花粉亚显微形态观察 | 第46页 |
| 3.2.7 OsSTA99-RNAi植株中花粉萌发相关基因的表达分析 | 第46-47页 |
| 3.2.8 OsSTA99-RNAi的水合花粉中微丝形态异常 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| 4.1 关于PMR的讨论 | 第49-51页 |
| 4.1.1 PMR参与调控花粉小孢子有丝分裂 | 第49-50页 |
| 4.1.2 PMR调控花粉的有丝分裂可能与细胞周期相关 | 第50页 |
| 4.1.3 PMR蛋白的三个结构域可能参与花粉有丝分裂调控 | 第50-51页 |
| 4.2 关于OsSTA99的讨论 | 第51-53页 |
| 4.2.1 OsSTA99影响水稻花粉萌发 | 第51-52页 |
| 4.2.2 OsSTA99的调节机制可能涉及细胞骨架和囊泡转运 | 第52-53页 |
| 4.3 总结与展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-64页 |
| 附录1 | 第64-66页 |
| 附录2 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
