| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 辣椒研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 辣椒驯化及品种改良 | 第13页 |
| 1.1.2 辣椒果实成熟研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 类胡萝卜素研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 类胡萝卜素营养价值 | 第14-15页 |
| 1.2.2 类胡萝卜素在辣椒中合成 | 第15-17页 |
| 1.3 PSY基因研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 VIGS研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 辣椒PSY基因家族鉴定与分析 | 第21-36页 |
| 2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 辣椒PSY基因家族的鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.2 辣椒PSY基因染色体定位、序列分析、保守基序及顺式调控元件分析 | 第22页 |
| 2.2.3 进化分析 | 第22页 |
| 2.2.4 选择压力分析 | 第22页 |
| 2.2.5 辣椒PSY基因表达模式分析 | 第22-23页 |
| 2.2.6 总RNA提取及第一链c DNA合成 | 第23-24页 |
| 2.2.7 qRT-PCR分析 | 第24页 |
| 2.2.8 辣椒胁迫处理 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-33页 |
| 2.3.1 辣椒PSY基因家族鉴定分析 | 第25-26页 |
| 2.3.2 辣椒PSY基因家族蛋白序列比对 | 第26页 |
| 2.3.3 辣椒PSY基因定位分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4 辣椒PSY基因家族结构分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 辣椒PSY基因家族进化分析 | 第28-29页 |
| 2.3.6 辣椒PSY基因家族选择压力分析 | 第29-30页 |
| 2.3.7 辣椒PSY基因组织特异性表达分析 | 第30-31页 |
| 2.3.8 qPCR检测辣椒PSY基因在果实发育中表达模式 | 第31页 |
| 2.3.9 辣椒PSY基因在不同品种辣椒中表达分析 | 第31-32页 |
| 2.3.10 辣椒PSY基因在胁迫下表达模式 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-36页 |
| 3 辣椒CaPSY1 基因分子克隆与鉴定 | 第36-49页 |
| 3.1 试验材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 载体及菌株 | 第36页 |
| 3.1.3 相关溶液配制 | 第36-37页 |
| 3.1.4 相关试剂 | 第37页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.6 引物及测序 | 第38页 |
| 3.2 主要方法 | 第38-44页 |
| 3.2.1 CaPSY1 基因生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.2.2 辣椒RNA提取及反转录 | 第38页 |
| 3.2.3 亚细胞定位载体pCAMBIA1300-Ca PSY1-GFP载体构建 | 第38-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-48页 |
| 3.3.1 辣椒Ca PSY1 蛋白二级结构分析 | 第44-45页 |
| 3.3.2 辣椒Ca PSY1 蛋白跨膜结构域分析 | 第45页 |
| 3.3.3 辣椒Ca PSY1 蛋白三级结构分析 | 第45-46页 |
| 3.3.4 辣椒Ca PSY1 基因亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
| 3.3.5 亚细胞定位载体构建与鉴定 | 第47页 |
| 3.3.6 烟草亚细胞定位分析 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 4 沉默CaPSY1 基因功能研究 | 第49-58页 |
| 4.1 试验材料 | 第49-50页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 4.1.2 载体及菌株 | 第49页 |
| 4.1.3 抗生素及培养基配制 | 第49页 |
| 4.1.4 VIGS缓冲液配制 | 第49页 |
| 4.1.5 相关试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.6 主要仪器 | 第50页 |
| 4.2 主要方法 | 第50-53页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第50页 |
| 4.2.2 目的片段扩增 | 第50-51页 |
| 4.2.3 目的片段与pTRV2 载体双酶切并连接 | 第51-52页 |
| 4.2.4 pTRV2-Ca PSY1 载体克隆及转化 | 第52页 |
| 4.2.5 VIGS体系建立 | 第52页 |
| 4.2.6 次生代谢物含量测定 | 第52-53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 4.3.1 VIGS载体pTRV2：CaPSY1 构建与鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3.2 VIGS沉默CaPSY1 表型 | 第54页 |
| 4.3.3 目标基因表达水平检测 | 第54-55页 |
| 4.3.4 类胡萝卜素合成相关基因在沉默PSY果实中表达分析 | 第55页 |
| 4.3.5 类胡萝卜素含量测定 | 第55-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 5 拟南芥遗传转化 | 第58-68页 |
| 5.1 试验材料 | 第58-59页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 5.1.2 载体及菌株 | 第58页 |
| 5.1.3 抗生素及培养基 | 第58页 |
| 5.1.4 相关试剂 | 第58-59页 |
| 5.1.5 主要仪器 | 第59页 |
| 5.2 主要方法 | 第59-64页 |
| 5.2.1 植物基因组DNA提取 | 第59-60页 |
| 5.2.2 辣椒CaPSY1 过表达载体构建 | 第60-63页 |
| 5.2.3 超表达Ca PSY1 转基因拟南芥植株的创制 | 第63页 |
| 5.2.4 转基因拟南芥种植及筛选 | 第63页 |
| 5.2.5 拟南芥叶绿素含量检测 | 第63-64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 5.3.1 过表达载体构建与鉴定 | 第64页 |
| 5.3.2 超表达Ca PSY1 的转基因拟南芥的验证 | 第64-65页 |
| 5.3.3 超表达Ca PSY1 基因的拟南芥表型差异 | 第65页 |
| 5.3.4 转基因拟南芥类胡萝卜素合成相关基因表达分析 | 第65-66页 |
| 5.3.5 转基因拟南芥叶绿素及类胡萝卜素含量测定 | 第66页 |
| 5.3.6 转基因拟南芥叶绿素合成相关基因表达分析 | 第66-67页 |
| 5.4 讨论 | 第67-68页 |
| 6 结论与展望 | 第68-70页 |
| 6.1 结论 | 第68-69页 |
| 6.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
