中文摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
英文缩略词 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 癫痫概述 | 第12-18页 |
1.1.1 癫痫的概念 | 第12页 |
1.1.2 流行病学 | 第12-13页 |
1.1.3 病因 | 第13-14页 |
1.1.4 发病机制 | 第14-16页 |
1.1.5 癫痫分类 | 第16-17页 |
1.1.6 治疗现状 | 第17-18页 |
1.2 miRNA概述 | 第18-25页 |
1.2.1 miRNA的认识 | 第18-19页 |
1.2.2 miRNA与疾病 | 第19-21页 |
1.2.3 miRNA与癫痫 | 第21-22页 |
1.2.4 miR-155的认识 | 第22-24页 |
1.2.5 miR-155与癫痫 | 第24-25页 |
1.3 本课题研究的内容及意义 | 第25-26页 |
第二章 实验材料与方法 | 第26-43页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 实验动物 | 第26页 |
2.1.2 癫痫模型材料 | 第26页 |
2.1.3 提取RNA/miRNA、逆转录、qPCR所用试剂 | 第26页 |
2.1.4 提取蛋白质、蛋白质免疫印迹所用试剂 | 第26-27页 |
2.1.5 养细胞用的材料 | 第27页 |
2.1.6 实验中所用的RT-PCR相关引物 | 第27页 |
2.1.7 癫痫患者临床资料 | 第27-28页 |
2.2 实验仪器设备 | 第28-29页 |
2.3 主要试剂配制 | 第29-30页 |
2.4 实验方法 | 第30-41页 |
2.4.1 原代培养 | 第30-31页 |
2.4.2 细胞转染 | 第31-32页 |
2.4.3 细胞提RNA | 第32页 |
2.4.4 总RNA的逆转录 | 第32-33页 |
2.4.5 实时荧光定量PCR反应 | 第33页 |
2.4.6 人血中miRNA的提取 | 第33-34页 |
2.4.7 人血中miRNA的逆转录 | 第34页 |
2.4.8 miRNA实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
2.4.9 细胞总蛋白提取 | 第35-36页 |
2.4.10 测定蛋白质浓度(BCA法)及制样 | 第36-37页 |
2.4.11 Western blot实验 | 第37-38页 |
2.4.12 小鼠癫痫模型建立 | 第38-39页 |
2.4.13 小鼠侧脑室立体定向注射并记录脑电图 | 第39页 |
2.4.14 小鼠心脏灌流 | 第39-40页 |
2.4.15 取脑组织及脱水 | 第40页 |
2.4.16 脑组织包埋及冷冻切片 | 第40-41页 |
2.4.17 Fluoro-Jade B染色 | 第41页 |
2.5 统计方法 | 第41-43页 |
第三章 实验结果与分析 | 第43-48页 |
3.1 miR-155水平在KA诱导的癫痫发作小鼠中升高 | 第43-44页 |
3.2 抑制miR-155的表达可减轻癫痫的损害 | 第44-45页 |
3.3 miR-155分布与靶基因在细胞模型中的实验性验证 | 第45-47页 |
3.4 miR-155在颞叶癫痫患者的血液中表达升高 | 第47-48页 |
第四章 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
附录 | 第57页 |