| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-42页 |
| 第一章 热应激对机体免疫作用的研究进展 | 第17-23页 |
| 1 应激的概念和基本特征 | 第17页 |
| 2 应激反应的神经内分泌调节 | 第17-21页 |
| ·应激反应与糖皮质激素 | 第17-18页 |
| ·应激反应与炎症因子 | 第18-19页 |
| ·糖皮质激素与免疫调节 | 第19-21页 |
| 3 应激与免疫器官变化 | 第21页 |
| 4 应激反应与免疫抑制 | 第21-22页 |
| 5 急性和慢性应激对动物免疫的影响 | 第22-23页 |
| 第二章 细胞TLR 在机体免疫作用中的研究进展 | 第23-34页 |
| 1 TLR 的概念 | 第23页 |
| 2 TLR 的结构 | 第23-24页 |
| 3 TLR 家族 | 第24页 |
| 4 TLR 分布 | 第24-27页 |
| ·TLR2 分布 | 第24-26页 |
| ·TLR4 的分布 | 第26-27页 |
| 5 TLR 信号转导 | 第27-28页 |
| 6 TLR 缺陷 | 第28页 |
| 7 TLR 与免疫的关系 | 第28-33页 |
| ·TLR2 与免疫的关系 | 第28-29页 |
| ·TLR4 与免疫的关系 | 第29-30页 |
| ·TLR 与细胞因子的关系 | 第30-33页 |
| 8 小结与展望 | 第33-34页 |
| 第三章 热休克蛋白与 TLR 在免疫调节中的相关性 | 第34-37页 |
| 第四章 内参基因概念、表达特征及其筛选 | 第37-42页 |
| 1 内参基因的概念 | 第37页 |
| 2 内参基因的作用 | 第37-38页 |
| 3 内参基因使用的的局限性 | 第38-40页 |
| ·内参基因的表达易受试验处理及外界刺激的影响 | 第38-39页 |
| ·内参基因在不同器官组织表达不同 | 第39页 |
| ·内参基因表达受疾病状态的影响 | 第39-40页 |
| ·内参基因表达受许多其他因素的影响 | 第40页 |
| 4 内参基因的筛选方法 | 第40-41页 |
| ·通过geNorm 宏程序筛选内参基因 | 第40-41页 |
| ·通过NormFinder 宏程序筛选内参基因 | 第41页 |
| ·通过其他的软件程序 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 第二部分 试验研究 | 第42-100页 |
| 第五章 巴马香猪 TLR2、TLR4 及 TLR4-ASV 基因 cDNA 的克隆及生物信息学分析 | 第42-66页 |
| 试验一 巴马香猪 TLR2 基因 cDNA 的克隆及生物信息学分析 | 第42-53页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-51页 |
| ·RNA 完整性及PCR 产物的特异性分析 | 第48页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定 | 第48页 |
| ·TLR2 基因测序结果及分析 | 第48页 |
| ·巴马香猪TLR2 的同源性分析 | 第48-50页 |
| ·三维结构预测 | 第50页 |
| ·TLR2 信号肽预测 | 第50页 |
| ·跨膜结构分析 | 第50页 |
| ·保守结构域分析 | 第50-51页 |
| ·N-连接的糖基化位点分析 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 试验二 巴马香猪 TLR4 基因 cDNA 的克隆及生物信息学分析 | 第53-60页 |
| 1 材料与方法 | 第54页 |
| ·试验材料 | 第54页 |
| ·试验方法 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-57页 |
| ·RNA 完整性及PCR 产物的特异性分析 | 第54-55页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定 | 第55页 |
| ·TLR4 基因测序结果及分析 | 第55页 |
| ·巴马香猪TLR4 的同源性分析 | 第55页 |
| ·三维结构预测 | 第55-57页 |
| ·TLR4 信号肽预测 | 第57页 |
| ·跨膜结构分析 | 第57页 |
| ·保守结构域分析 | 第57页 |
| ·糖基化位点分析 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 试验三 巴马香猪 TLR4 mRNA 选择性剪接变异体的鉴定及生物信息学分析 | 第60-66页 |
| 1 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·试验材料 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| ·RNA 完整性鉴定及PCR 产物的特异性分析 | 第62页 |
| ·TLR4-ASV 氨基酸序列分析 | 第62-63页 |
| ·三维结构预测 | 第63页 |
| ·TLR4-ASV 信号肽预测 | 第63页 |
| ·非经典分泌蛋白预测 | 第63页 |
| ·跨膜结构分析 | 第63页 |
| ·保守结构域分析 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 第六章 热应激对巴马香猪 PBMC TLRs mRNA、皮质醇以及 IL-2 和 IL-8 表达水平的影响 | 第66-84页 |
| 试验一热应激条件下巴马香猪PBMC 内参基因的筛选 | 第66-73页 |
| 1 材料与方法 | 第67-70页 |
| ·试验材料 | 第67页 |
| ·试验方法 | 第67-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-71页 |
| ·内参基因扩增效率的评价 | 第70页 |
| ·ACTB、GAPDH、TBP、B2M、18sRNA 和 RPL 内参基因的稳定性分析 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-72页 |
| 4 小结 | 第72-73页 |
| 试验二 热应激对巴马香猪体内 PBMC TLRs mRNA、皮质醇、IL-2 和 IL-8 表达水平的影响 | 第73-84页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| ·试验材料 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-78页 |
| ·目的基因扩增效率评价 | 第74页 |
| ·热应激对PBMC TLR2 及TLR4-All m RNA 转录水平的影响 | 第74-76页 |
| ·热应激对血浆皮质醇、IL-2 和IL-8 浓度的影响 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78-83页 |
| ·热应激对巴马香猪PBMC TLR2 m RNA 水平的影响 | 第78-79页 |
| ·热应激对巴马香猪PBMC TLR4 m RNA 水平的影响 | 第79-80页 |
| ·热应激对巴马香猪血浆皮质醇浓度的影响 | 第80-81页 |
| ·热应激对巴马香猪血浆IL-2 浓度的影响 | 第81-83页 |
| ·热应激对巴马香猪血浆 IL-8 浓度的影响 | 第83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第七章 热应激对体外培养的巴马香猪 PBMC TLRs mRNA、IL-12 和IFN-γ 表达水平的影响 | 第84-99页 |
| 试验一 热打击条件下体外培养的巴马香猪PBMC 内参基因筛选 | 第84-88页 |
| 1 材料与方法 | 第84-85页 |
| ·材料 | 第84-85页 |
| ·试验方法 | 第85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-87页 |
| 4 小结 | 第87-88页 |
| 试验二 热打击对体外培养的巴马香猪 PBMC TLRs mRNA、IL-12 和 IFN-γ 表达水平的影响 | 第88-99页 |
| 1 材料与方法 | 第88-89页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·试验方法 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-93页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC TLR2、TLR4-All 及TLR4 ASV m RNA 转录水平的影响 | 第89-91页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC 培养液上清IL-12 和IFN-γ表达水平的影响 | 第91-93页 |
| 3 讨论 | 第93-98页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC TLR2 m RNA 转录水平的影响 | 第93-94页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC TLR4-All mRNA 转录水平的影响 | 第94-96页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC TLR4-ASV m RNA 转录水平的影响 | 第96页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC IFN-γ表达水平的影响 | 第96-97页 |
| ·热应激对体外培养的PBMC IL-12 表达水平的影响 | 第97-98页 |
| 4 小结 | 第98-99页 |
| 第八章 总论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 作者简介 | 第115-116页 |
| 导师简介 | 第116-118页 |
| 附录有关图片及其说明 | 第118-121页 |
