| 缩写词表 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 一、前言 | 第16-34页 |
| 1 裂殖酵母细胞周期调控 | 第16-18页 |
| 1.1 裂殖酵母细胞周期 | 第16-17页 |
| 1.2 细胞周期检验点 | 第17-18页 |
| 2 纺锤体组装检验点(SAC) | 第18-26页 |
| 2.1 纺锤体组装检验点的组成及其功能 | 第18-21页 |
| 2.2 纺锤体极体(SPB) | 第21-22页 |
| 2.3 纺锤体组装检验点的激活与沉默 | 第22-26页 |
| 3 蛋白磷酸酶PP1 | 第26-28页 |
| 3.1 蛋白磷酸酶PP1的组成 | 第26-27页 |
| 3.2 蛋白磷酸酶PP1的功能 | 第27-28页 |
| 4 蛋白磷酸酶PP2A | 第28-30页 |
| 4.1 蛋白磷酸酶PP2A的组成 | 第28-29页 |
| 4.2 蛋白磷酸酶PP2A的功能 | 第29-30页 |
| 5 蛋白磷酸酶在纺锤体组装检验点沉默中的作用 | 第30-32页 |
| 5.1 SAC蛋白的去磷酸化 | 第30-31页 |
| 5.2 MCC复合物的解聚 | 第31-32页 |
| 6 本论文的研究目的、内容和意义 | 第32-34页 |
| 二、材料和方法 | 第34-54页 |
| 1 材料 | 第34-44页 |
| 1.1 大肠杆菌菌株 | 第34页 |
| 1.2 酵母菌株 | 第34-36页 |
| 1.3 质粒 | 第36-37页 |
| 1.4 引物 | 第37-38页 |
| 1.5 分子生物学工具酶 | 第38页 |
| 1.6 主要试剂及耗材 | 第38-39页 |
| 1.7 主要仪器及设备 | 第39-40页 |
| 1.8 常用培养基、主要缓冲溶液的配制 | 第40-44页 |
| 1.8.1 常用培养基的配制 | 第40-43页 |
| 1.8.2 主要缓冲溶液的配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-54页 |
| 2.1 裂殖酵母菌株的构建 | 第44-46页 |
| 2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| 2.3 裂殖酵母基因组提取-破碎法 | 第47页 |
| 2.4 裂殖酵母转化 | 第47-48页 |
| 2.5 质粒DNA的制备 | 第48-49页 |
| 2.6 琼脂糖胶回收DNA片段 | 第49-50页 |
| 2.7 PCR产物回收 | 第50页 |
| 2.8 质粒DNA的细菌转化 | 第50-51页 |
| 2.9 常规PCR | 第51页 |
| 2.10 定点突变PCR | 第51-52页 |
| 2.11 DNA限制性内切酶酶切反应 | 第52页 |
| 2.12 DNA连接 | 第52-53页 |
| 2.13 纺锤体组装检验点沉默分析实验 | 第53页 |
| 2.14 Cdc13-GFP/mCherry细胞核内定位信号的计数方法 | 第53-54页 |
| 三、实验结果与分析 | 第54-69页 |
| 1 磷酸酶PP2AB56(PAR1和PAR2)并不显著影响纺锤体组装检验点沉默 | 第54-58页 |
| 2 PP2A B56(PAR1和PAR2)能补偿PP1(DIS2)在纺锤体组装检验点信号通路中的部分功能 | 第58-63页 |
| 3 PP2A B56(PAR1和PAR2)在纺锤体组装检验点信号通路中对DIS2缺失的补偿效应是与PP2AC有关的 | 第63-65页 |
| 4 纺锤体组装检验点信号通路中PP1(DIS2)存在时PP2AC(PPA2)的效应不明显 | 第65-67页 |
| 5 PP2AB55在纺锤体组装检验点信号通路中作用的探究 | 第67页 |
| 6 磷酸酶在纺锤体组装检验点信号通路中可能的作用底物探究 | 第67-69页 |
| 四、讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 附录 | 第77-81页 |
| 1 磷酸酶DIS2对于纺锤体组装检验点沉默是必需的 | 第77-81页 |
| 1.1 dis2+缺失后Cdc13蛋白不能正常降解 | 第77-78页 |
| 1.2 dis2+缺失后前中期细胞比例增多 | 第78-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
