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桔小实蝇气味结合蛋白的功能分析

摘要第2-5页
Abstract第5-8页
英文缩略表第9-13页
第1章 前言第13-32页
    1.1 昆虫嗅觉识别系统第13页
    1.2 昆虫嗅觉感受的分子识别机制第13-15页
    1.3 气味结合蛋白研究进展第15-18页
        1.3.1 气味结合蛋白的发现与基因特征第15-17页
        1.3.2 气味结合蛋白的嗅觉与非嗅觉功能研究第17-18页
    1.4 化学感受蛋白研究进展第18-20页
        1.4.1 化学感受蛋白的发现与基因特征第18页
        1.4.2 化学感受蛋白的表达特征与功能研究第18-20页
    1.5 气味受体研究进展第20-25页
        1.5.1 气味受体的发现与基因特征第20-23页
        1.5.2 气味受体的编码方式与功能研究第23-25页
    1.6 离子型受体研究进展第25-27页
        1.6.1 离子型受体的发现与特征第25-27页
        1.6.2 离子型受体的功能研究第27页
    1.7 感觉神经元膜蛋白研究进展第27-28页
    1.8 研究思路第28-32页
        1.8.1 立题依据第28-30页
        1.8.2 研究内容第30-31页
        1.8.3 技术路线第31-32页
第2章 桔小实蝇在不同生理阶段的嗅觉敏感性与嗅觉基因表达变化第32-54页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 材料与方法第33-41页
        2.2.0 试虫第33页
        2.2.1 嗅觉行为测定第33-34页
        2.2.2 桔小实蝇EAG记录第34-35页
        2.2.3 测定化合物与配制第35页
        2.2.4 EAG信号记录第35-37页
        2.2.5 数据统计第37页
        2.2.6 样品收集、RNA的抽提与cDNA合成第37-38页
        2.2.7 桔小实蝇嗅觉感受基因的qPCR研究第38-41页
    2.3 结果第41-51页
        2.3.1 未性成熟与性成熟/产卵期的嗅觉行为分析第41-43页
        2.3.2 未性成熟与性成熟/产卵期的触角电位分析第43-45页
        2.3.3 桔小实蝇交配行为的节律特点第45页
        2.3.4 桔小实蝇嗅觉感受基因性阶段表达分析第45-46页
        2.3.5 桔小实蝇嗅觉感受基因的节律表达分析第46-51页
    2.4 讨论第51-54页
        2.4.1 嗅觉敏感性与嗅觉感受基因的表达变化第51-52页
        2.4.2 嗅觉感受基因的日周期变化与交配行为第52-54页
第3章 桔小实蝇OBP和CSP的配基结合能力功能分析第54-72页
    3.1 引言第54页
    3.2 材料与方法第54-59页
        3.2.1 测定化合物第54页
        3.2.2 主要试剂第54-55页
        3.2.3 试虫、RNA抽提与cDNA合成第55页
        3.2.4 重组蛋白的诱导表达及纯化第55-57页
        3.2.5 荧光结合实验第57-58页
        3.2.6 重组蛋白检索与三维结构预测第58页
        3.2.7 分子对接与分子动力学模拟第58-59页
    3.3 结果第59-70页
        3.3.1 重组蛋白的表达与纯化第59-61页
        3.3.2 重组蛋白与不同气味化合物的结合能力第61-66页
        3.3.3 蛋白三维建模第66-70页
        3.3.4 重组蛋白与不同气味化合物的分子对接第70页
    3.4 讨论第70-72页
第4章 利用RNAi对BdorOBP83a-2 的识别功能研究第72-89页
    4.1 引言第72-73页
    4.2 材料与方法第73-82页
        4.2.1 试虫第73页
        4.2.2 系统发育分析与基因比对分析第73页
        4.2.3 RNA提取与克隆第73-75页
        4.2.4 dsRNA的合成第75-76页
        4.2.5 dsRNA的体外稳定性测定第76-77页
        4.2.6 dsRNA的微注射试验第77页
        4.2.7 嗅觉感受基因的定量分析第77-78页
        4.2.8 EAG测定第78页
        4.2.9 嗅觉行为测定第78-82页
    4.3 结果第82-87页
        4.3.1 BdorOBP83a-2 是桔小实蝇的重要气味结合蛋白第82页
        4.3.2 dsRNA构建效果第82-83页
        4.3.3 dsRNA稳定性测试第83-84页
        4.3.4 RNAi处理的EAG记录第84-86页
        4.3.5 RNAi处理的嗅觉行为测定第86-87页
    4.4 讨论第87-89页
第5章 全文结论第89-90页
    5.1 气味结合蛋白表达与嗅觉行为反应、嗅觉敏感性关联分析第89页
    5.2 气味结合蛋白识别引诱化合物的功能分析第89页
    5.3 创新点第89-90页
致谢第90-91页
参考文献第91-108页
附录A第108-109页
附录B第109-118页

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