摘要 | 第2-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
英文缩略表 | 第9-13页 |
第1章 前言 | 第13-32页 |
1.1 昆虫嗅觉识别系统 | 第13页 |
1.2 昆虫嗅觉感受的分子识别机制 | 第13-15页 |
1.3 气味结合蛋白研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 气味结合蛋白的发现与基因特征 | 第15-17页 |
1.3.2 气味结合蛋白的嗅觉与非嗅觉功能研究 | 第17-18页 |
1.4 化学感受蛋白研究进展 | 第18-20页 |
1.4.1 化学感受蛋白的发现与基因特征 | 第18页 |
1.4.2 化学感受蛋白的表达特征与功能研究 | 第18-20页 |
1.5 气味受体研究进展 | 第20-25页 |
1.5.1 气味受体的发现与基因特征 | 第20-23页 |
1.5.2 气味受体的编码方式与功能研究 | 第23-25页 |
1.6 离子型受体研究进展 | 第25-27页 |
1.6.1 离子型受体的发现与特征 | 第25-27页 |
1.6.2 离子型受体的功能研究 | 第27页 |
1.7 感觉神经元膜蛋白研究进展 | 第27-28页 |
1.8 研究思路 | 第28-32页 |
1.8.1 立题依据 | 第28-30页 |
1.8.2 研究内容 | 第30-31页 |
1.8.3 技术路线 | 第31-32页 |
第2章 桔小实蝇在不同生理阶段的嗅觉敏感性与嗅觉基因表达变化 | 第32-54页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 材料与方法 | 第33-41页 |
2.2.0 试虫 | 第33页 |
2.2.1 嗅觉行为测定 | 第33-34页 |
2.2.2 桔小实蝇EAG记录 | 第34-35页 |
2.2.3 测定化合物与配制 | 第35页 |
2.2.4 EAG信号记录 | 第35-37页 |
2.2.5 数据统计 | 第37页 |
2.2.6 样品收集、RNA的抽提与cDNA合成 | 第37-38页 |
2.2.7 桔小实蝇嗅觉感受基因的qPCR研究 | 第38-41页 |
2.3 结果 | 第41-51页 |
2.3.1 未性成熟与性成熟/产卵期的嗅觉行为分析 | 第41-43页 |
2.3.2 未性成熟与性成熟/产卵期的触角电位分析 | 第43-45页 |
2.3.3 桔小实蝇交配行为的节律特点 | 第45页 |
2.3.4 桔小实蝇嗅觉感受基因性阶段表达分析 | 第45-46页 |
2.3.5 桔小实蝇嗅觉感受基因的节律表达分析 | 第46-51页 |
2.4 讨论 | 第51-54页 |
2.4.1 嗅觉敏感性与嗅觉感受基因的表达变化 | 第51-52页 |
2.4.2 嗅觉感受基因的日周期变化与交配行为 | 第52-54页 |
第3章 桔小实蝇OBP和CSP的配基结合能力功能分析 | 第54-72页 |
3.1 引言 | 第54页 |
3.2 材料与方法 | 第54-59页 |
3.2.1 测定化合物 | 第54页 |
3.2.2 主要试剂 | 第54-55页 |
3.2.3 试虫、RNA抽提与cDNA合成 | 第55页 |
3.2.4 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第55-57页 |
3.2.5 荧光结合实验 | 第57-58页 |
3.2.6 重组蛋白检索与三维结构预测 | 第58页 |
3.2.7 分子对接与分子动力学模拟 | 第58-59页 |
3.3 结果 | 第59-70页 |
3.3.1 重组蛋白的表达与纯化 | 第59-61页 |
3.3.2 重组蛋白与不同气味化合物的结合能力 | 第61-66页 |
3.3.3 蛋白三维建模 | 第66-70页 |
3.3.4 重组蛋白与不同气味化合物的分子对接 | 第70页 |
3.4 讨论 | 第70-72页 |
第4章 利用RNAi对BdorOBP83a-2 的识别功能研究 | 第72-89页 |
4.1 引言 | 第72-73页 |
4.2 材料与方法 | 第73-82页 |
4.2.1 试虫 | 第73页 |
4.2.2 系统发育分析与基因比对分析 | 第73页 |
4.2.3 RNA提取与克隆 | 第73-75页 |
4.2.4 dsRNA的合成 | 第75-76页 |
4.2.5 dsRNA的体外稳定性测定 | 第76-77页 |
4.2.6 dsRNA的微注射试验 | 第77页 |
4.2.7 嗅觉感受基因的定量分析 | 第77-78页 |
4.2.8 EAG测定 | 第78页 |
4.2.9 嗅觉行为测定 | 第78-82页 |
4.3 结果 | 第82-87页 |
4.3.1 BdorOBP83a-2 是桔小实蝇的重要气味结合蛋白 | 第82页 |
4.3.2 dsRNA构建效果 | 第82-83页 |
4.3.3 dsRNA稳定性测试 | 第83-84页 |
4.3.4 RNAi处理的EAG记录 | 第84-86页 |
4.3.5 RNAi处理的嗅觉行为测定 | 第86-87页 |
4.4 讨论 | 第87-89页 |
第5章 全文结论 | 第89-90页 |
5.1 气味结合蛋白表达与嗅觉行为反应、嗅觉敏感性关联分析 | 第89页 |
5.2 气味结合蛋白识别引诱化合物的功能分析 | 第89页 |
5.3 创新点 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-108页 |
附录A | 第108-109页 |
附录B | 第109-118页 |