| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 脂肪组织与脂肪细胞概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 脂肪组织及其功能 | 第12-13页 |
| 1.1.2 脂肪细胞及其分子调控 | 第13-16页 |
| 1.2 KLF4基因研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 KLFs家族概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 KLF4与脂肪细胞分化 | 第17-19页 |
| 第二章 山羊KLF4基因克隆及组织表达分析 | 第19-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 试验动物与组织的采集 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| 2.2.2 山羊KLF4基因的PCR扩增 | 第21页 |
| 2.2.3 PCR产物回收 | 第21-22页 |
| 2.2.4 目的基因的连接与转化 | 第22页 |
| 2.2.5 重组子的筛选和鉴定 | 第22页 |
| 2.2.6 序列比对 | 第22-23页 |
| 2.2.7 山羊KLF4基因组织表达差异分析 | 第23页 |
| 2.2.8 数据处理与分析 | 第23页 |
| 2.3 试验结果 | 第23-29页 |
| 2.3.1 山羊KLF4基因的克隆 | 第23-24页 |
| 2.3.2 山羊KLF4基因序列分析 | 第24-28页 |
| 2.3.3 山羊KLF4基因组织表达差异分析 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 山羊KLF4过表达载体的构建及siRNA的设计合成 | 第32-45页 |
| 3.1 试验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第32-33页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 腺病毒过表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.2.2 重组腺病毒载体的包装,收毒及扩增 | 第34-36页 |
| 3.2.3 KLF4 siRNA的设计合成及干扰效率的检测 | 第36-37页 |
| 3.3 试验结果 | 第37-43页 |
| 3.3.1 腺病毒过表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 3.3.2 腺病毒过表达载体的包装扩增 | 第40-41页 |
| 3.3.3 Ad-KLF4感染性滴度检测 | 第41页 |
| 3.3.4 KLF4过表达效率的检测 | 第41-42页 |
| 3.3.5 KLF4干扰效率的检测 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 KLF4对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响 | 第45-57页 |
| 4.1 试验材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 试验动物 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 4.2 试验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 KLF4在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化过程中的表达模式分析 | 第46页 |
| 4.2.2 过表达KLF4对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响 | 第46页 |
| 4.2.3 干扰KLF4对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响 | 第46-47页 |
| 4.2.4 油红O染色 | 第47-48页 |
| 4.3 试验结果 | 第48-54页 |
| 4.3.1 KLF4基因在山羊肌内脂肪前体细胞分化过程中的表达模式 | 第48页 |
| 4.3.2 油红O染色 | 第48-49页 |
| 4.3.3 KLF4对脂肪细胞分化标志基因mRNA表达水平的影响 | 第49-51页 |
| 4.3.4 KLF4对KLFs家族其他成员mRNA表达水平的影响 | 第51-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.5 小结 | 第56-57页 |
| 第五章 RNA-Seq分析KLF4对山羊肌内前体脂肪分化的影响 | 第57-73页 |
| 5.1 试验材料 | 第57页 |
| 5.1.1 试验动物 | 第57页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第57页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第57页 |
| 5.2 试验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 RNA样品收集 | 第57-58页 |
| 5.2.2 转录组测序 | 第58页 |
| 5.2.3 测序数据质量评估 | 第58页 |
| 5.2.4 差异基因筛选及聚类分析 | 第58-59页 |
| 5.2.5 差异表达基因的qPCR验证 | 第59页 |
| 5.3 试验结果 | 第59-67页 |
| 5.3.1 RNA质量检测结果 | 第59-60页 |
| 5.3.2 测序数据质量检测结果 | 第60-61页 |
| 5.3.3 RNA-Seq相关性分析 | 第61-62页 |
| 5.3.4 差异表达基因及聚类分析 | 第62-64页 |
| 5.3.5 GO富集结果 | 第64页 |
| 5.3.6 KEGG富集结果 | 第64-67页 |
| 5.3.7 差异表达基因的qPCR验证 | 第67页 |
| 5.4 讨论 | 第67-71页 |
| 5.4.1 差异基因表达分析 | 第68-70页 |
| 5.4.2 GO富集分析 | 第70页 |
| 5.4.3 KEGG富集分析 | 第70-71页 |
| 5.5 小结 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-90页 |
| 附录1 研究生期间发表的论文 | 第90-91页 |
| 附录2 研究生期间主持及参与的科研项目 | 第91-92页 |
| 附录3 山羊KLF4基因核苷酸序列及编码氨基酸序列 | 第92-93页 |
| 附录4 山羊KLF4过表达载体测序结果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
