| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 植物种子储藏蛋白介绍 | 第8-9页 |
| 1.1.1 种子储藏蛋白特征 | 第8页 |
| 1.1.2 种子储藏蛋白分类 | 第8-9页 |
| 1.1.3 种子储藏蛋白在细胞中的加工 | 第9页 |
| 1.1.4 影响种子储藏蛋品质的因素 | 第9页 |
| 1.2 膜泡运输 | 第9-10页 |
| 1.3 SNARE蛋白 | 第10-13页 |
| 1.3.1 SNARE蛋白的结构 | 第10-11页 |
| 1.3.2 SNARE蛋白的分类 | 第11-13页 |
| 1.3.3 SNARE复合体的形成方式 | 第13页 |
| 1.4 植物中SNARE蛋白的生物学功能 | 第13页 |
| 1.4.1 SNARE蛋白能对胁迫信号作出响应 | 第13页 |
| 1.4.2 SNARE蛋白调控物质运输 | 第13页 |
| 1.4.3 SNARE蛋白参与细胞分裂 | 第13页 |
| 1.5 酵母Sec22p和Ykt61p | 第13-15页 |
| 2 实验材料及方法 | 第15-36页 |
| 2.1 植物材料及培养方法 | 第15页 |
| 2.2 菌株及质粒 | 第15页 |
| 2.3 突变体筛选 | 第15-18页 |
| 2.3.1 试剂准备 | 第15-16页 |
| 2.3.2 样品采集 | 第16页 |
| 2.3.3 CTAB法提取植物基因组DNA | 第16页 |
| 2.3.4 突变体T-DNA插入检测 | 第16-18页 |
| 2.4 质粒构建 | 第18-25页 |
| 2.4.1 cDNA模板制备 | 第18-20页 |
| 2.4.2 引物设计 | 第20页 |
| 2.4.3 AtSec22和AtYkt61CDs的PCR扩增 | 第20页 |
| 2.4.4 PCR产物回收 | 第20-21页 |
| 2.4.5 连接T-载体 | 第21页 |
| 2.4.6 DH5α感受态细胞制备 | 第21-22页 |
| 2.4.7 大肠杆菌转化(热击法) | 第22页 |
| 2.4.8 蓝白班筛选及阳性重组子的筛选与鉴定 | 第22-23页 |
| 2.4.9 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.4.10 测序 | 第24页 |
| 2.4.11 表达质粒构建 | 第24页 |
| 2.4.12 Gateway系统表达质粒构建 | 第24-25页 |
| 2.5 Western Blot | 第25-31页 |
| 2.5.1 蛋白样品制备 | 第27页 |
| 2.5.2 操作步骤 | 第27-31页 |
| 2.6 瞬时表达 | 第31-32页 |
| 2.6.1 试剂准备 | 第31-32页 |
| 2.6.2 操作步骤 | 第32页 |
| 2.7 酵母双杂交 | 第32-36页 |
| 2.7.1 试剂准备 | 第33-34页 |
| 2.7.2 操作步骤 | 第34-36页 |
| 3 实验结果及讨论 | 第36-47页 |
| 3.1 AtSec22和AtYkt61的亚细胞定位 | 第36-38页 |
| 3.1.1 AtSec22亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 3.1.2 AtYkt61亚细胞定位 | 第37-38页 |
| 3.2 突变体筛选 | 第38-39页 |
| 3.3 突变体种子储藏蛋白前体检测 | 第39-40页 |
| 3.4 AtSec22和AtYkt61与AtUfe1和AtSec20相互作用的检测 | 第40-44页 |
| 3.4.1 AtSec22和AtYkt61与AtUfe1相互作用的检测 | 第40-41页 |
| 3.4.2 AtSec22和AtYkt61与AtSec20相互作用的检测 | 第41-42页 |
| 3.4.3 AtSec22和AtYkt61与AtSYP31及AtSYP32的相互作用检测相互作用的检测 | 第42-44页 |
| 3.5 突变体生长发育情况的观察 | 第44-45页 |
| 3.6 本章小结 | 第45页 |
| 3.7 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
