摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 文献综述:肿瘤细胞的自噬和窖蛋白-1 | 第9-14页 |
1.1 什么是自噬 | 第9-10页 |
1.2 肿瘤细胞中的自噬 | 第10-11页 |
1.3 肿瘤细胞的自噬与Caveolin-1 | 第11-12页 |
1.3.1 肿瘤细胞中Caveolin-1的作用 | 第11页 |
1.3.2 肿瘤自噬标志基因和Caveolin-1 | 第11-12页 |
1.4 本论文的研究意义 | 第12-13页 |
1.5 论文的主要研究内容 | 第13-14页 |
2 Caveolin-1稳定敲低人肝癌细胞系的建立 | 第14-24页 |
2.1 前言 | 第14页 |
2.2 材料与仪器 | 第14-16页 |
2.2.1 材料和试剂 | 第14页 |
2.2.2 主要仪器 | 第14-16页 |
2.3 实验方法 | 第16-21页 |
2.3.1 细胞培养 | 第16-17页 |
2.3.2 Caveolin-1特异性siRNA表达载体的扩增 | 第17页 |
2.3.3 细胞转染和筛选 | 第17-18页 |
2.3.4 考马斯亮蓝法定蛋白 | 第18页 |
2.3.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第18-20页 |
2.3.6 WesternBlot | 第20-21页 |
2.3.7 统计分析 | 第21页 |
2.4 结果 | 第21-22页 |
2.4.1 Caveolin-1特异性siRNA表达载体酶切鉴定 | 第21页 |
2.4.2 Caveolin-1基因敲低的肝癌细胞系的建立 | 第21-22页 |
2.5 讨论 | 第22-23页 |
2.6 小结 | 第23-24页 |
3 敲低Caveolin-1对人肝癌细胞放射敏感性的影响 | 第24-32页 |
3.1 前言 | 第24页 |
3.2 材料与仪器 | 第24-25页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第24页 |
3.2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
3.3 实验方法 | 第25-27页 |
3.3.1 细胞培养 | 第25-26页 |
3.3.2 X射线辐射处理 | 第26页 |
3.3.3 克隆形成实验 | 第26页 |
3.3.4 细胞周期检测 | 第26-27页 |
3.3.5 WesternBlot | 第27页 |
3.3.6 统计分析 | 第27页 |
3.4 结果 | 第27-29页 |
3.4.1 敲低Caveolin-1增强肝癌细胞辐射敏感性 | 第27-28页 |
3.4.2 敲低Caveolin-1抑制X射线诱导的细胞周期进程 | 第28-29页 |
3.4.3 敲低Caveolin-1抑制X射线诱导的细胞周期蛋白表达的影响 | 第29页 |
3.5 讨论 | 第29-31页 |
3.6 小结 | 第31-32页 |
4 敲低Caveolin-1对人肝癌细胞DNA损伤修复的影响 | 第32-44页 |
4.1 前言 | 第32-33页 |
4.2 材料与仪器 | 第33-34页 |
4.2.1 材料和试剂 | 第33页 |
4.2.2 主要仪器 | 第33-34页 |
4.3 实验方法 | 第34-35页 |
4.3.1 细胞培养 | 第34页 |
4.3.2 X射线辐射处理 | 第34页 |
4.3.3 免疫细胞化学 | 第34-35页 |
4.3.4 WesternBlot | 第35页 |
4.3.5 统计分析 | 第35页 |
4.4 结果 | 第35-40页 |
4.4.1 敲低Caveolin-1增加X射线诱导的DNA双链断裂 | 第35-37页 |
4.4.2 敲低Caveolin-1抑制X射线诱导的ATM损伤修复通路的激活 | 第37-39页 |
4.4.3 敲低Caveolin-1促进X射线诱导的应激通路的激活 | 第39-40页 |
4.5 讨论 | 第40-43页 |
4.6 小结 | 第43-44页 |
5 敲低Caveolin-1对X射线诱导的7721细胞自噬的影响 | 第44-51页 |
5.1 前言 | 第44页 |
5.2 材料与仪器 | 第44-45页 |
5.2.1 材料和试剂 | 第44页 |
5.2.2 主要仪器 | 第44-45页 |
5.3 实验方法 | 第45-46页 |
5.3.1 细胞培养 | 第45页 |
5.3.2 X射线辐射处理 | 第45页 |
5.3.3 免疫细胞化学 | 第45页 |
5.3.4 WesternBlot | 第45页 |
5.3.5 统计分析 | 第45-46页 |
5.4 结果 | 第46-48页 |
5.4.1 敲低Caveolin-1促进X射线诱导的肝癌细胞自噬 | 第46-47页 |
5.4.2 敲低Caveolin-1促进X射线诱导NFκB通路的激活 | 第47-48页 |
5.5 讨论 | 第48-49页 |
5.6 小结 | 第49-51页 |
论文创新点 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录A 缩略语表 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |