| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 结直肠癌发病率及死亡率 | 第13页 |
| 1.2 CRC的发病机制 | 第13-17页 |
| 1.2.1 CRC的发生与肠道微生物 | 第14页 |
| 1.2.2 CRC的发生与基因突变 | 第14-16页 |
| 1.2.3 饮食、生活习惯等因素导致CRC的发生 | 第16-17页 |
| 1.3 CRC的治疗现状 | 第17-19页 |
| 1.3.1 传统治疗 | 第17-18页 |
| 1.3.2 免疫治疗 | 第18-19页 |
| 1.3.3 基因治疗 | 第19页 |
| 1.4 益生菌 | 第19-20页 |
| 1.5 益生菌抗CRC功能研究进展 | 第20-23页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 1.7 研究内容 | 第24页 |
| 1.8 研究路线 | 第24-25页 |
| 第二章 抑制HT-29细胞生长的益生菌菌株初筛 | 第25-43页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第26页 |
| 2.2.2 CRC细胞 | 第26页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.4 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.5 实验用培养基及试剂配制 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.3.1 实验菌株的复壮与活化 | 第28-29页 |
| 2.3.2 实验菌株的计数及扩大培养 | 第29页 |
| 2.3.3 实验菌株培养代谢产物冻干粉的制备及溶解 | 第29-30页 |
| 2.3.4 HT-29细胞的复苏与培养 | 第30页 |
| 2.3.5 MTT法筛选对HT-29细胞生长具有抑制能力的乳酸菌 | 第30-31页 |
| 2.3.6 阳性对照5-FU的IC50测定 | 第31-32页 |
| 2.3.7 不同浓度的AY01、JSL8-2对HT-29细胞的抑制效果测定 | 第32页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第32-40页 |
| 2.4.1 5-FU对HT-29细胞抑制作用的IC50测定 | 第32-33页 |
| 2.4.2 不同浓度下的冻干粉溶液对HT-29细胞的影响 | 第33-36页 |
| 2.4.3 不同浓度的AY01、JSL8-2对HT-29细胞的抑制作用 | 第36-40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-42页 |
| 2.6 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 AY01与JSL8-2的进一步筛选及抑癌机理初探 | 第43-61页 |
| 3.1 引言 | 第43-45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第45页 |
| 3.2.2 CRC细胞 | 第45页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第45页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.5 培养基及主要试剂配制 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3.1 冻干粉溶液的制备 | 第46页 |
| 3.3.2 各种CRC细胞的培养 | 第46-47页 |
| 3.3.3 不同浓度的AY01、JSL8-2对不同种CRC细胞的抑制效果 | 第47页 |
| 3.3.4 细胞周期和细胞凋亡的检测 | 第47-48页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第48-59页 |
| 3.4.1 不同浓度的AY01、JSL8-2对不同CRC细胞的抑制作用 | 第48-51页 |
| 3.4.2 AY01、JSL8-2处理后HT-29细胞周期和细胞凋亡检测 | 第51-59页 |
| 3.5 讨论 | 第59-60页 |
| 3.6 本章小结 | 第60-61页 |
| 第四章 利用转录组学从分子水平上探究AY01的抑癌机理 | 第61-80页 |
| 4.1 引言 | 第61-62页 |
| 4.2 实验材料 | 第62-63页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第62页 |
| 4.2.2 实验CRC细胞株 | 第62页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第62页 |
| 4.2.4 实验试剂 | 第62页 |
| 4.2.5 培养基及主要试剂配制 | 第62-63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-68页 |
| 4.3.1 AY01处理HT-29细胞 | 第63页 |
| 4.3.2 HT-29细胞总RNA提取 | 第63-64页 |
| 4.3.3 RNA样品质量检测 | 第64页 |
| 4.3.4 mRNA纯化 | 第64页 |
| 4.3.5 cDNA文库构建 | 第64-65页 |
| 4.3.6 文库质检及上机测序 | 第65页 |
| 4.3.7 生物信息学分析 | 第65-68页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第68-76页 |
| 4.4.1 基因表达差异分析及其条件优化 | 第68-72页 |
| 4.4.2 样品间基因表达差异 | 第72-74页 |
| 4.4.3 KEGG富集分析 | 第74-76页 |
| 4.5 讨论 | 第76-79页 |
| 4.6 本章小结 | 第79-80页 |
| 第五章 总结 | 第80-83页 |
| 5.1 本文小结 | 第80-81页 |
| 5.2 应用展望 | 第81页 |
| 5.3 本文创新点 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
