| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 欧文氏杆菌在草本纤维生物提取中的应用 | 第10-11页 |
| 2 甘露聚糖酶 | 第11-16页 |
| ·甘露聚糖酶的基本概念 | 第11-12页 |
| ·甘露聚糖酶的来源 | 第12页 |
| ·甘露聚糖酶的性质和分类 | 第12-14页 |
| ·β-露聚糖酶用途 | 第14-15页 |
| ·甘露聚糖酶的基因研究进展 | 第15-16页 |
| ·甘露聚糖酶的基因序列克隆的研究 | 第15-16页 |
| ·甘露聚糖酶的基因表达研究 | 第16页 |
| 3 同源建模在蛋白分子改造中的应用 | 第16-17页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 manA基因分子结构及其缺失表达研究 | 第19-44页 |
| 1 试验材料和方法 | 第19-27页 |
| ·试验材料 | 第19-22页 |
| ·菌种和载体 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第21-22页 |
| ·引物合成 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-27页 |
| ·manA的生物信息学分析 | 第22页 |
| ·菌种的活化和培养 | 第22-23页 |
| ·细菌基因组DNA的提取及纯化 | 第23页 |
| ·质粒的小量提取 | 第23页 |
| ·目的DNA的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·表达载体的构建和转化 | 第24-25页 |
| ·阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第25页 |
| ·甘露聚糖标准曲线的制作 | 第25-27页 |
| ·重组菌甘露聚糖酶的诱导表达 | 第27页 |
| ·甘露聚糖酶酶活的测定方法 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE法测定蛋白质分子量 | 第27页 |
| 2 试验结果 | 第27-42页 |
| ·manA基因的DNA序列和蛋白序列同源性比对和进化树构建 | 第27-31页 |
| ·融合蛋白的序列分析 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白的信号肽预测 | 第32-34页 |
| ·融合蛋白的跨膜区的预测 | 第34-35页 |
| ·基于同源比对的二级结构和三级结构预测 | 第35-38页 |
| ·目的片段PCR和载体提取的结果 | 第38页 |
| ·缺失表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·四种重组菌的SDS-PAGE鉴定 | 第39-40页 |
| ·各表达载体的酶活情况 | 第40-41页 |
| ·酶活测定 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 CXJZU-120的manA高效表达体系构建 | 第44-51页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌株与质粒 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·菌种的活化与纯化 | 第44页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·manA基因PCR扩增 | 第45页 |
| ·CXJZU-120的感受态制备 | 第45页 |
| ·120-T6基因工程菌的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| ·120-T6的发酵和酶活测定 | 第46页 |
| ·浓缩发酵液的SDS-PAGE | 第46页 |
| 2 试验结果 | 第46-49页 |
| ·甘露聚糖酶基因manA的克隆和manA-T6质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·欧文氏基因工程菌120-T6的构建 | 第47-48页 |
| ·基因工程菌120-T6的产酶特性 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 全文结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 缩略语表 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
