| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写词 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 植物应答非生物胁迫的相关转录因子 | 第11-14页 |
| 1.1.1 WRKY转录因子家族 | 第12页 |
| 1.1.2 NAC转录因子家族 | 第12-13页 |
| 1.1.3 MYB转录因子家族 | 第13页 |
| 1.1.4 AP2/EREBP转录因子家族 | 第13-14页 |
| 1.2 WRKY转录因子家族结构特征和分类 | 第14页 |
| 1.3 WRKY转录因子在非生物胁迫中的功能 | 第14-18页 |
| 1.3.1 WRKY转录因子调控非生物胁迫的机理 | 第15页 |
| 1.3.2 干旱和盐胁迫 | 第15-16页 |
| 1.3.3 温度胁迫 | 第16-17页 |
| 1.3.4 氧化胁迫 | 第17页 |
| 1.3.5 其他非生物胁迫 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究中两个候选WRKY基因研究现状 | 第18页 |
| 1.4.1 非生物胁迫 | 第18页 |
| 1.4.2 生物胁迫 | 第18页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第18-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株、载体和植物材料 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器设备和设计引物序列 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 引物 | 第22-23页 |
| 2.3 实验试剂 | 第23页 |
| 2.4 常用培养基及溶液的配制 | 第23-26页 |
| 2.4.1 Hoagland营养液配制 | 第24-25页 |
| 2.4.2 原生质体转化相关溶液 | 第25-26页 |
| 2.5 植物材料的培养和处理 | 第26页 |
| 2.6 基因的克隆和分析 | 第26-30页 |
| 2.6.1 RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.6.2 RNA的反转录 | 第27-28页 |
| 2.6.3 SSWRKY28和SSWRKY76基因CDS全长序列的克隆 | 第28-29页 |
| 2.6.4 序列的生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.6.5 甜高粱WRKY基因的实时荧光定量表达检测和分析 | 第29-30页 |
| 2.7 SSWRKY28基因的亚细胞定位 | 第30-34页 |
| 2.7.1 目的基因扩增 | 第30页 |
| 2.7.2 目的基因回收与纯化 | 第30页 |
| 2.7.3 质粒的提取 | 第30-31页 |
| 2.7.4 一步克隆法构建载体 | 第31-32页 |
| 2.7.5 大肠杆菌DH5α感受态的制备及转化 | 第32-33页 |
| 2.7.6 质粒DNA转化DH5α感受态细胞 | 第33-34页 |
| 2.7.7 重组质粒的鉴定 | 第34页 |
| 2.8 PEG/CA2+法介导拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达方法 | 第34-35页 |
| 2.9 共聚焦显微镜观察GFP荧光 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| 3.1 基因的克隆和序列分析 | 第37-40页 |
| 3.2 SSWRKY28和SSWRKY76蛋白聚类分析 | 第40页 |
| 3.3 不同植物中SSWRKY28和SSWRKY76的氨基酸序列比对 | 第40-42页 |
| 3.4 SSWRKY28和SSWRKY76蛋白二级级结构分析 | 第42-44页 |
| 3.5 SSWRKY28和SSWRKY76蛋白理化性质分析和三级结构预测 | 第44-48页 |
| 3.6 SSWRKY28和SSWRKY76基因的表达量分析 | 第48-49页 |
| 3.7 SSWRKY28::PHBT-GFP-NOS瞬时表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.8 SSWRKY28::PHBT-GFP的荧光在原生质体中 | 第50-53页 |
| 4 讨论与结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
