| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 研究背景及课题提出 | 第16-46页 |
| 1. 三氧化二砷治疗白血病的临床应用现状 | 第16-19页 |
| 1.1 三氧化二砷治疗APL的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 三氧化二砷治疗CML的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 三氧化二砷治疗其他肿瘤的研究进展 | 第18页 |
| 1.4 ATO抗肿瘤的分子机制 | 第18-19页 |
| 1.4.1 抑制细胞增殖 | 第18-19页 |
| 1.4.2 诱导细胞分化凋亡 | 第19页 |
| 2. 雄黄治疗白血病的临床应用现状 | 第19-20页 |
| 2.1 雄黄的治疗APL的研究进展 | 第19-20页 |
| 2.2 雄黄治疗CML的研究进展 | 第20页 |
| 2.3 雄黄治疗其他肿瘤的研究进展 | 第20页 |
| 3. 雄黄抗肿瘤的分子机制 | 第20-22页 |
| 3.1 雄黄单方药物抗白血病的分子机制 | 第20页 |
| 3.2 雄黄复方药物抗白血病的分子机制 | 第20-21页 |
| 3.3 纳米雄黄抗白血病的分子机制 | 第21-22页 |
| 4. 雄黄炮制 | 第22-24页 |
| 4.1 传统炮制方法 | 第22页 |
| 4.2 含砷硫化矿物的微生物浸出 | 第22-24页 |
| 4.2.1 砷黄铁矿的微生物浸出 | 第23页 |
| 4.2.2 雄黄的微生物浸出 | 第23-24页 |
| 5. 多药耐药与肿瘤治疗 | 第24-29页 |
| 5.1 多药耐药的发生机制及影响 | 第24-25页 |
| 5.2 多药耐药慢性髓细胞性白血病(MDR-CML)的治疗现状及研究进展 | 第25-29页 |
| 5.2.1 MDR-CML的临床治疗现状 | 第25-26页 |
| 5.2.2 砷剂治疗MDR-CML的研究进展 | 第26-29页 |
| 5.2.2.1 水通道蛋白AQPs | 第26-27页 |
| 5.2.2.2 水通道蛋白的功能和分布 | 第27页 |
| 5.2.2.3 水通道蛋白与砷的转运 | 第27-29页 |
| 6. 砷与细胞自噬 | 第29-36页 |
| 6.1 细胞凋亡的生理学意义 | 第29-31页 |
| 6.1.1 砷与细胞自噬 | 第29-30页 |
| 6.1.2 细胞自噬与细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 6.2 细胞自噬的种类、发生机制及生理学意义 | 第31-36页 |
| 6.2.1 诱导启动 | 第31-32页 |
| 6.2.2 自噬体的形成 | 第32页 |
| 6.2.3 自体吞噬的分子调控机制 | 第32-35页 |
| 6.2.3.1 TOR信号通路 | 第33页 |
| 6.2.3.2 胞质-空腔(Cytoplasm-to-vacuole,Cvt)信号通路 | 第33-34页 |
| 6.2.3.3 Vps34/PI3K信号通路 | 第34-35页 |
| 6.2.4 自体吞噬在治疗白血病方面的生物学意义 | 第35-36页 |
| 7. 去乙酰化酶和细胞自噬的作用关系研究进展 | 第36-43页 |
| 7.1 哺乳动物细胞内Sirtuins的分布、功能及作用 | 第36-37页 |
| 7.2 SirtT1功能 | 第37-43页 |
| 7.2.1 SirT1与肿瘤 | 第37-39页 |
| 7.2.2 SirT1和其它生理活动 | 第39-40页 |
| 7.2.3 SirT1与自体吞噬 | 第40-43页 |
| 7.2.3.1 SirT1:自噬激活子? | 第41-42页 |
| 7.2.3.2 高迁移率族蛋白1与SirT1 | 第42-43页 |
| 8. 课题的提出 | 第43-46页 |
| 第二章 雄黄微生物浸出液对CML/MDR-CML的体外生长抑制作用 | 第46-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第47-48页 |
| 1.1 细胞株 | 第47页 |
| 1.2 试剂和抗体 | 第47-48页 |
| 1.2.1 试剂制备 | 第47-48页 |
| 1.2.2 仪器 | 第48页 |
| 2. 实验方法 | 第48-50页 |
| 2.1 细胞培养 | 第48页 |
| 2.2 细胞耐药性能测定 | 第48页 |
| 2.3 细胞活力测定 | 第48-49页 |
| 2.4 砷的摄入 | 第49页 |
| 2.5 细胞周期分析 | 第49页 |
| 2.6 数据分析 | 第49-50页 |
| 3. 实验结果分析 | 第50-56页 |
| 3.1 耐药性测定 | 第50页 |
| 3.2 细胞活力测定 | 第50-53页 |
| 3.3 砷的摄入 | 第53-55页 |
| 3.4 细胞周期 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 雄黄微生物浸出液逆转多药耐药白血病细胞耐药性作用机制的初步探讨 | 第58-69页 |
| 1. 材料和方法 | 第58-59页 |
| 1.1 细胞株 | 第58页 |
| 1.2 试剂和抗体 | 第58-59页 |
| 1.3 仪器 | 第59页 |
| 2. 实验方法 | 第59-62页 |
| 2.1 P-gp蛋白表达分析 | 第59-60页 |
| 2.1.1 流式细胞仪测定蛋白表达 | 第59页 |
| 2.1.2 Western blot | 第59-60页 |
| 2.2 mRNA表达量分析 | 第60-61页 |
| 2.2.1 半定量RT-PCR | 第60页 |
| 2.2.2 Real-time PCR | 第60-61页 |
| 2.3 Western blot分析AQP9蛋白表达 | 第61页 |
| 2.4 荧光实时定量RT-PCR分析AQP9 mRNA表达 | 第61-62页 |
| 2.5 统计方法 | 第62页 |
| 3. 实验结果分析 | 第62-67页 |
| 3.1 流式细胞术分析P-gp蛋白表达 | 第62页 |
| 3.2 Western blot分析P-gp表达 | 第62-63页 |
| 3.3 半定量RT-PCR分析mdr1表达 | 第63-64页 |
| 3.4 荧光实时定量RT-PCR分析mdr1基因表达 | 第64页 |
| 3.5 Western blot分析AQP9表达 | 第64-66页 |
| 3.6 荧光实时定量RT-PCR分析AQP9基因表达 | 第66-67页 |
| 4. 讨论 | 第67-69页 |
| 第四章 SirT1在小鼠胚胎干细胞中表达情况 | 第69-84页 |
| 1. 材料和方法 | 第70-71页 |
| 1.1 细胞株 | 第70页 |
| 1.2 试剂和抗体 | 第70-71页 |
| 1.3 仪器 | 第71页 |
| 2. 方法 | 第71-74页 |
| 2.1 R1、B6细胞株检测 | 第71页 |
| 2.1.1 Western blot | 第71页 |
| 2.1.2 去乙酰化活力测定 | 第71页 |
| 2.2 构建GFP-SirT1 (R1(337)细胞株 | 第71-72页 |
| 2.3 R1(337)GFP表达检测 | 第72页 |
| 2.3.1 镜检 | 第72页 |
| 2.3.2 流式细胞仪 | 第72页 |
| 2.4 SirT1蛋白周期表达分析 | 第72-73页 |
| 2.5 逆境条件下SirT1蛋白表达分析 | 第73-74页 |
| 3. 实验结果分析 | 第74-81页 |
| 3.1 R1、B6及R1(337)细胞常规分析检测 | 第74-76页 |
| 3.1.1 Western blot | 第74页 |
| 3.1.2 去乙酰化活力测试 | 第74-75页 |
| 3.1.3 流式细胞仪分析细胞体积 | 第75页 |
| 3.1.4 细胞生长曲线分析 | 第75-76页 |
| 3.2 GFP-SirT1细胞检测 | 第76-77页 |
| 3.3 SirT1在细胞中的周期表达分析 | 第77-78页 |
| 3.4 不同培养条件下ES细胞中SirT1的表达 | 第78-81页 |
| 3.4.1 低氧 | 第78-79页 |
| 3.4.2 培养时间 | 第79-80页 |
| 3.4.3 热处理 | 第80页 |
| 3.4.4 葡萄糖 | 第80-81页 |
| 4. 结论 | 第81-84页 |
| 第五章 SirT1在小鼠胚胎干细胞中调节氧化应激及脂质代谢的作用 | 第84-90页 |
| 1. 材料和方法 | 第84-85页 |
| 1.1 细胞株 | 第84页 |
| 1.2 试剂和抗体 | 第84-85页 |
| 1.3 仪器 | 第85页 |
| 2. 实验方法 | 第85-86页 |
| 2.1 R1(343,224)细胞构建 | 第85页 |
| 2.2 细胞培养 | 第85-86页 |
| 2.3 干细胞诱导脂肪体系 | 第86页 |
| 2.4 生长曲线测定 | 第86页 |
| 3. 实验结果分析 | 第86-88页 |
| 3.1 ESc中的SirT1与脂肪形成能力 | 第86-87页 |
| 3.2 SirT1与ESc的氧化应激能力 | 第87-88页 |
| 4. 讨论 | 第88-90页 |
| 第六章 SirT1与自体吞噬 | 第90-105页 |
| 1. 材料和方法 | 第91-92页 |
| 1.1 细胞株 | 第91页 |
| 1.2 试剂 | 第91页 |
| 1.3 仪器 | 第91-92页 |
| 2. 实验方法 | 第92-93页 |
| 2.1 TCA微量蛋白沉淀法 | 第92页 |
| 2.2 免疫荧光检测法 | 第92页 |
| 2.3 蛋白提取 | 第92页 |
| 2.4 蛋白浓度测定 | 第92-93页 |
| 2.5 Western blot | 第93页 |
| 3. 实验结果分析 | 第93-103页 |
| 3.1 HBSS条件下R1细胞内HMGB1水平降低 | 第93页 |
| 3.2 HBSS条件下细胞内HMGB1的核质转移 | 第93-99页 |
| 3.3 HBSS条件下细胞内HMGB1表达情况及自噬发生水平 | 第99-100页 |
| 3.4 外源性HMGB1对细胞生长的影响作用 | 第100页 |
| 3.5 外源性HMGB1通过SirT1介导自噬发生 | 第100-103页 |
| 4. 讨论 | 第103-105页 |
| 第七章 结论 | 第105-107页 |
| 第八章 展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 研究成果 | 第120-121页 |
| 图表目录 | 第121-123页 |
