| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 符号说明 | 第13-16页 |
| 综述 | 第16-42页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 H9N2亚型禽流感病毒在我国的出现和发展 | 第16-17页 |
| 1.3 H9N2病毒在我国的进化 | 第17-19页 |
| 1.4 H9N2亚型禽流感病毒在我国生物学特性的演变 | 第19-20页 |
| 1.5 H9N2亚型禽流感病毒在我国频繁提供内部基因给其它亚型流感病毒 | 第20-25页 |
| 1.5.1 H9N2亚型禽流感病毒提供内部基因给H5亚型病毒 | 第20-21页 |
| 1.5.2 H9N2亚型禽流感病毒提供内部基因给H7亚型病毒 | 第21-22页 |
| 1.5.3 H9N2亚型禽流感病毒提供内部基因给其它亚型病毒 | 第22-25页 |
| 1.6 H9N2亚型禽流感病毒在我国家禽和人类及其它哺乳动物的适应性 | 第25-29页 |
| 1.6.1 表面蛋白 | 第25-26页 |
| 1.6.2 内部蛋白 | 第26-29页 |
| 1.7 H9N2亚型禽流感病毒在我国感染家禽和人类的概况 | 第29页 |
| 1.8 总结 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-42页 |
| 第一章 S基因型H9N2内部基因盒对H5亚型重配病毒致病力的影响 | 第42-68页 |
| 2.1 引言 | 第42-43页 |
| 2.2 材料 | 第43-44页 |
| 2.2.1 毒株 | 第43页 |
| 2.2.2 细胞、鸡胚和实验动物 | 第43-44页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第44页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第44页 |
| 2.3 方法 | 第44-48页 |
| 2.3.1 重配病毒的拯救 | 第44-46页 |
| 2.3.2 病毒的滴定 | 第46页 |
| 2.3.3 病毒生长曲线的测定 | 第46页 |
| 2.3.4 聚合酶活性的检测 | 第46-47页 |
| 2.3.5 SPF鸡致病性和传播性实验 | 第47页 |
| 2.3.6 小鼠致病性实验 | 第47-48页 |
| 2.4 结果 | 第48-62页 |
| 2.4.1 内部基因盒来自S基因型H9N2的H5重配病毒的拯救 | 第48-49页 |
| 2.4.2 S基因型H9N2病毒内部基因盒降低H5重配病毒在体外细胞中的复制能力 | 第49-51页 |
| 2.4.3 S基因型H9N2病毒内部基因盒降低H5重配病毒聚合酶活性 | 第51-52页 |
| 2.4.4 S基因型H9N2病毒内部基因盒降低H5重配病毒对鸡的毒力和复制能力 | 第52-55页 |
| 2.4.5 传播效力试验 | 第55-57页 |
| 2.4.6 S基因型H9N2病毒内部基因盒降低H5重配病毒对小鼠的毒力和复制能力 | 第57-61页 |
| 2.4.7 S基因型H9N2病毒内部基因盒对重配H5病毒刺激宿主细胞因子表达的影响 | 第61-62页 |
| 2.5 讨论 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 第二章 H9N2不同进化谱系PB2和M基因对重配H5病毒在禽类动物模型上致病性的影响及机制探索 | 第68-94页 |
| 3.1 引言 | 第68-70页 |
| 3.2 材料 | 第70-71页 |
| 3.2.1 毒株 | 第70页 |
| 3.2.2 细胞、鸡胚和实验动物 | 第70页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第70页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第70-71页 |
| 3.2.5 分子生物学软件 | 第71页 |
| 3.3 方法 | 第71-73页 |
| 3.3.1 基因序列分析 | 第71页 |
| 3.3.2 重配病毒的拯救 | 第71页 |
| 3.3.3 重配病毒在禽类细胞上复制能力的测定 | 第71-72页 |
| 3.3.4 Western blot方法检测病毒蛋白的表达 | 第72页 |
| 3.3.5 免疫荧光试验 | 第72-73页 |
| 3.3.6 不同进化谱系PB2影响H9N2病毒RNP聚合酶活性检测 | 第73页 |
| 3.3.7 电镜试验 | 第73页 |
| 3.4 结果 | 第73-88页 |
| 3.4.1 携带G1-like PB2和G1-like M基因的H9N2病毒在禽源H9N2病毒中占主导地位 | 第73-75页 |
| 3.4.2 内部基因来自H9N2病毒的重配H5病毒的产生 | 第75-77页 |
| 3.4.3 G1-like M和G1-like PB2基因增强重配H5病毒对鸡的毒力和复制能力 | 第77-80页 |
| 3.4.4 G1-like M和G1-like PB2基因增强重配H5病毒在禽类细胞系上的复制能力和蛋白表达水平 | 第80-83页 |
| 3.4.5 G1-like PB2蛋白提高S基因型H9N2病毒在禽类细胞系上的聚合酶活性 | 第83-84页 |
| 3.4.6 G1-like PB2基因增强PB2蛋白在禽类细胞上核输入能力 | 第84-85页 |
| 3.4.7 G1-like M基因增加重配H5病毒在禽类细胞上的球形病毒粒子 | 第85-86页 |
| 3.4.8 G1-like M基因增强M1蛋白在禽类细胞上协助RNP核输出的能力 | 第86-88页 |
| 3.5 讨论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
| 第三章 H9N2不同进化谱系PB2和M基因对重配H5病毒在哺乳类动物模型上致病性的影响及机制探索 | 第94-119页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 材料 | 第95-96页 |
| 4.2.1 毒株 | 第95页 |
| 4.2.2 细胞、鸡胚和实验动物 | 第95页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第95-96页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第96页 |
| 4.2.5 分子生物学软件 | 第96页 |
| 4.3 方法 | 第96-98页 |
| 4.3.1 基因序列分析 | 第96页 |
| 4.3.2 重配病毒的拯救 | 第96页 |
| 4.3.3 重配病毒在哺乳类动物细胞复制能力的测定 | 第96-97页 |
| 4.3.4 病毒蛋白表达水平的检测 | 第97页 |
| 4.3.5 免疫荧光试验 | 第97页 |
| 4.3.6 聚合酶活性测定 | 第97-98页 |
| 4.3.7 电镜试验 | 第98页 |
| 4.4 结果 | 第98-113页 |
| 4.4.1 携带G1-like PB2和M基因的H9N2病毒在我国H9N2病毒中占主导地位 | 第98-100页 |
| 4.4.2 重配病毒在哺乳类动物细胞感染性测定 | 第100-102页 |
| 4.4.3 G1-like M和G1-like PB2基因增强重配H5病毒对小鼠的毒力和复制能力 | 第102-105页 |
| 4.4.4 G1-like M和G1-like PB2基因增强重配H5病毒在哺乳动物细胞系上的复制能力和蛋白表达水平 | 第105-108页 |
| 4.4.5 G1-like PB2蛋白提高S基因型H9N2病毒在哺乳动物细胞系上的聚合酶活性 | 第108-109页 |
| 4.4.6 G1-like PB2基因增强PB2蛋白在哺乳动物细胞系上核输入能力 | 第109-110页 |
| 4.4.7 G1-like M基因增加重配H5病毒在哺乳动物细胞上的球形病毒粒子 | 第110-111页 |
| 4.4.8 G1-like M基因增强M1蛋白在哺乳动物细胞上协助RNP核输出的能力 | 第111-113页 |
| 4.5 讨论 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-119页 |
| 第四章 基于TMT技术研究含S和H基因型H9N2内部基因盒的重配H5病毒感染鸡肺脏的差异表达蛋白 | 第119-147页 |
| 5.1 引言 | 第119-120页 |
| 5.2 材料 | 第120-121页 |
| 5.2.1 毒株 | 第120页 |
| 5.2.2 细胞、鸡胚和实验动物 | 第120页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第120页 |
| 5.2.4 主要仪器 | 第120-121页 |
| 5.3 方法 | 第121-123页 |
| 5.3.1 SPF鸡感染性实验 | 第121页 |
| 5.3.2 蛋白样品制备 | 第121页 |
| 5.3.3 蛋白浓度测定 | 第121-122页 |
| 5.3.4 SDS-PAGE电泳样品检测实验 | 第122页 |
| 5.3.5 蛋白还原烷基化及酶解 | 第122页 |
| 5.3.6 蛋白标记及质谱分析 | 第122页 |
| 5.3.7 数据分析 | 第122-123页 |
| 5.3.8 生物信息学分析 | 第123页 |
| 5.3.9 qRT-PCR验证 | 第123页 |
| 5.4 结果 | 第123-140页 |
| 5.4.1 比较H5/S和H5/H重配病毒对SPF鸡的毒力 | 第123-125页 |
| 5.4.2 比较H5/S和H5/H重配病毒在SPF鸡肺中的复制能力 | 第125页 |
| 5.4.3 筛选H5/H和H5/S重配病毒感染鸡的肺脏差异蛋白组 | 第125-133页 |
| 5.4.4 差异蛋白组的生物信息功能分析 | 第133-139页 |
| 5.4.5 差异蛋白的qRT-PCR验证 | 第139-140页 |
| 5.5 讨论 | 第140-143页 |
| 参考文献 | 第143-147页 |
| 全文小结 | 第147-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第149-150页 |
