摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一部分 文献综述 | 第13-22页 |
1.1 天祝白牦牛简介 | 第13页 |
1.2 角蛋白关联蛋白 | 第13-17页 |
1.2.1 角蛋白关联蛋白分类 | 第13-14页 |
1.2.2 角蛋白关联蛋白的结构 | 第14页 |
1.2.3 角蛋白关联蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
1.2.4 高硫角蛋白关联蛋白研究进展 | 第15页 |
1.2.5 超高硫角蛋白关联蛋白研究进展 | 第15-16页 |
1.2.6 高甘氨酸/酪氨酸角蛋白关联蛋白研究进展 | 第16-17页 |
1.3 毛囊相关概述 | 第17-19页 |
1.3.1 毛囊的基本结构 | 第17-18页 |
1.3.2 毛囊周期性生长规律 | 第18-19页 |
1.4 实时荧光定量PCR | 第19-21页 |
1.4.1 实时荧光定量PCR原理 | 第19-20页 |
1.4.2 实时荧光定量PCR检测方法 | 第20页 |
1.4.3 实时荧光定量PCR定量分析方法 | 第20页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR的优点 | 第20-21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二部分 KAP家族基因的克隆 | 第22-50页 |
2.1 试验材料 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22-24页 |
2.2.1 总RNA的提取及检测 | 第22页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第22页 |
2.2.3 引物的设计 | 第22-23页 |
2.2.4 引物的配置 | 第23页 |
2.2.5 PCR扩增 | 第23页 |
2.2.6 克隆载体pGEM-T-rKAP的构建、检测 | 第23-24页 |
2.2.7 序列分析 | 第24页 |
2.3 试验结果 | 第24-48页 |
2.3.1 KAP1.1基因克隆序列分析结果 | 第24-31页 |
2.3.2 KAP3.1基因克隆序列分析结果 | 第31-37页 |
2.3.3 KAP11.1基因克隆序列分析结果 | 第37-43页 |
2.3.4 KAP13.1基因克隆序列分析结果 | 第43-48页 |
2.4 分析讨论 | 第48-50页 |
第三部分 KAP家族基因的原核表达 | 第50-62页 |
3.1 试验材料 | 第50页 |
3.2 试验步骤和方法 | 第50-53页 |
3.2.1 KAP家族基因的亚克隆 | 第50-53页 |
3.3 试验结果 | 第53-60页 |
3.3.1 原核表达鉴定 | 第53页 |
3.3.2 天祝白牦牛KAP家族蛋白的SDS-PAGE和Western-Blot结果 | 第53-60页 |
3.4 讨论 | 第60-62页 |
第四部分 KAP家族基因的表达差异分析 | 第62-68页 |
4.1 试验材料 | 第62页 |
4.2 试验步骤和方法 | 第62-63页 |
4.2.1 引物设计 | 第62页 |
4.2.2 cDNA的合成 | 第62页 |
4.2.3 Real-time PCR | 第62-63页 |
4.2.4 基因表达量分析 | 第63页 |
4.3 试验结果 | 第63-67页 |
4.3.1 生长期KAP家族基因在天祝白牦牛皮肤的表达量 | 第63-65页 |
4.3.2 休止期KAP家族基因在天祝白牦牛皮肤的表达量 | 第65-66页 |
4.3.3 天祝白牦牛KAP家族基因在绒毛生长期和休止期表达量差异分析 | 第66-67页 |
4.4 讨论 | 第67-68页 |
第五部分 结论 | 第68-69页 |
1. KAP家族基因的克隆 | 第68页 |
2. KAP家族基因的原核表达 | 第68页 |
3. KAP家族基因的表达差异分析 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
附录 | 第74-81页 |
作者简介 | 第81页 |
硕士期间发表论文 | 第81页 |
硕士期间参加的课题研究 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |