摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 伪狂犬病的概况 | 第11页 |
1.2 伪狂犬病的流行病学 | 第11-13页 |
1.2.1 传染源 | 第11页 |
1.2.2 传易感动物 | 第11-12页 |
1.2.3 传播途径 | 第12页 |
1.2.4 临诊症状 | 第12-13页 |
1.2.5 潜伏感染 | 第13页 |
1.2.6 流行现状 | 第13页 |
1.3 病原学 | 第13-14页 |
1.4 PRV的分子生物学特性 | 第14-17页 |
1.4.1 PRV的基因组特征 | 第14页 |
1.4.2 PRV基因组编码蛋白 | 第14-15页 |
1.4.3 糖蛋白特性 | 第15-16页 |
1.4.4 伪狂犬病病毒毒力相关基因 | 第16-17页 |
1.5 PRV侵入机制 | 第17-18页 |
1.6 PR疫苗及研究进展 | 第18-20页 |
1.6.1 PRV活疫苗因 | 第18-19页 |
1.6.2 PRV DNA疫苗 | 第19-20页 |
1.7 PR疫苗及研究进展 | 第20-21页 |
第2章 PRV糖蛋白抗原融合表位编码序列的克隆 | 第21-33页 |
2.1 试验材料与仪器 | 第21-23页 |
2.1.1 试验材料与仪器 | 第21-22页 |
2.1.2 主要试剂及配制 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 病料处理 | 第23页 |
2.2.2 PK-15细胞的复苏 | 第23页 |
2.2.3 PRV的接种与保存 | 第23页 |
2.2.4 PRV基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.5 病毒DNA的PCR扩增 | 第24页 |
2.2.6 目的片段引物设计 | 第24-25页 |
2.2.7 目gB-C-N、gB-C-M、g B-D蛋白抗原融合表位编码序列的扩增 | 第25-26页 |
2.2.8 琼脂糖凝胶回收 | 第26-27页 |
2.2.9 g B-C-N、g B-C-M、gB-D蛋白抗原融合表位编码序列的克隆 | 第27页 |
2.2.10 质粒的提取 | 第27-28页 |
2.2.11 表达载体的构建 | 第28页 |
2.2.12 质粒的提取 | 第28页 |
2.2.13 基因测序及序列分析 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-32页 |
2.3.1 病毒的细胞培养 | 第29页 |
2.3.2 病毒PCR鉴定结果 | 第29-30页 |
2.3.3 目的片段的PCR扩增 | 第30-31页 |
2.3.4 p MD-19T克隆载体的酶切鉴定 | 第31页 |
2.3.5 pET-28a表达载体的PCR鉴定 | 第31-32页 |
2.3.6 插入片段序列的测定 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-33页 |
第3章 PRV糖蛋白抗原表位编码序列的表达及活性测定 | 第33-39页 |
3.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 主要材料与器材 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-35页 |
3.2.1 抗原表位的诱导表达 | 第34页 |
3.2.2 表达产物SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
3.2.3 Western-blotting分析 | 第35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-36页 |
3.3.1 表达产物SDS-PAGE测定 | 第35-36页 |
3.3.2 表达产物Western blotting分析 | 第36页 |
3.4 讨论 | 第36-39页 |
第4章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45页 |