缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-19页 |
前言 | 第20-22页 |
文献回顾 | 第22-51页 |
一、肝细胞癌的流行病学、病因学及预后 | 第22-26页 |
二、肝癌的分子生物学研究进展 | 第26-40页 |
三、LncRNA 在肿瘤研究中的作用及其临床价值 | 第40-48页 |
四、长链非编码 RNA 在肝癌中的研究进展 | 第48-51页 |
第一部分 LncRNAURHC 的初步鉴定及临床意义 | 第51-69页 |
引言 | 第51页 |
1 材料 | 第51-54页 |
1.1 标本收集 | 第51-52页 |
1.2 所用细胞系 | 第52页 |
1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
1.4 主要溶液的配置 | 第53-54页 |
1.5 主要仪器与设备 | 第54页 |
2 方法 | 第54-57页 |
2.1 细胞培养 | 第54-55页 |
2.2 总 RNA 提取并质检 | 第55-56页 |
2.3 芯片实验 | 第56页 |
2.4 实时定量 RT-PCR | 第56-57页 |
2.5 统计分析 | 第57页 |
3 结果 | 第57-66页 |
3.1 样品 RNA 的质量检测 | 第57-58页 |
3.2 芯片结果分析 | 第58-60页 |
3.3 URHC 的发现与验证 | 第60-64页 |
3.4 URHC 的表达水平与临床病理特征的关系 | 第64页 |
3.5 URHC 的表达与肝癌患者预后的关系 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-69页 |
第二部分 LncRNAURHC 对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第69-84页 |
引言 | 第69页 |
1 材料 | 第69-71页 |
1.1 所用细胞系 | 第69页 |
1.2 主要试剂 | 第69-70页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第70-71页 |
2 方法 | 第71-78页 |
2.1 细胞转染 | 第71-72页 |
2.2 MTT 实验 | 第72页 |
2.3 EdU 实验 | 第72-74页 |
2.4 平板克隆形成 | 第74页 |
2.5 细胞周期及凋亡 | 第74-75页 |
2.6 细胞侵袭能力检测 | 第75页 |
2.7 细胞迁移能力检测 | 第75页 |
2.8 Western-blot 测定蛋白表达 | 第75-77页 |
2.9 统计分析 | 第77-78页 |
3 结果 | 第78-82页 |
3.1 URHC 对肝癌细胞增殖的影响 | 第78-80页 |
3.2 URHC 对肝癌细胞凋亡的影响 | 第80-81页 |
3.3 URHC 对肝癌细胞侵袭及迁移能力的影响 | 第81-82页 |
4 讨论 | 第82-84页 |
第三部分 LncRNAURHC 调控肝癌细胞增殖与凋亡的分子机制研究 | 第84-96页 |
引言 | 第84页 |
1 材料 | 第84-86页 |
1.1 所用标本组织及细胞系 | 第84页 |
1.2 主要试剂 | 第84-85页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第85-86页 |
2 方法 | 第86-88页 |
2.1 与 URHC 相互作用的靶基因分析 | 第86页 |
2.2 实时定量 RT-PCR 验证 | 第86页 |
2.3 细胞培养 | 第86页 |
2.4 细胞转染 | 第86-87页 |
2.5 抑制剂 PD98059 共孵育 | 第87页 |
2.6 MTT 实验 | 第87页 |
2.7 细胞周期测定 | 第87页 |
2.8 Western-blot 测定蛋白表达 | 第87页 |
2.9 统计分析 | 第87-88页 |
3 结果 | 第88-93页 |
3.1 ZAK 可能是 URHC 作用的潜在靶基因 | 第88-89页 |
3.2 URHC 通过调控 ZAK 表达促进增殖及抑制凋亡 | 第89-91页 |
3.3 URHC/ZAK 通过调控下游 ERK/MAPK 通路影响细胞增殖与凋亡 | 第91-93页 |
4 讨论 | 第93-96页 |
小结 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-116页 |
个人简历和研究成果 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |