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长链非编码RNA URHC在肝癌细胞增殖与凋亡中的作用及机制研究

缩略语表第6-9页
中文摘要第9-13页
Abstract第13-19页
前言第20-22页
文献回顾第22-51页
    一、肝细胞癌的流行病学、病因学及预后第22-26页
    二、肝癌的分子生物学研究进展第26-40页
    三、LncRNA 在肿瘤研究中的作用及其临床价值第40-48页
    四、长链非编码 RNA 在肝癌中的研究进展第48-51页
第一部分 LncRNAURHC 的初步鉴定及临床意义第51-69页
    引言第51页
    1 材料第51-54页
        1.1 标本收集第51-52页
        1.2 所用细胞系第52页
        1.3 主要试剂第52-53页
        1.4 主要溶液的配置第53-54页
        1.5 主要仪器与设备第54页
    2 方法第54-57页
        2.1 细胞培养第54-55页
        2.2 总 RNA 提取并质检第55-56页
        2.3 芯片实验第56页
        2.4 实时定量 RT-PCR第56-57页
        2.5 统计分析第57页
    3 结果第57-66页
        3.1 样品 RNA 的质量检测第57-58页
        3.2 芯片结果分析第58-60页
        3.3 URHC 的发现与验证第60-64页
        3.4 URHC 的表达水平与临床病理特征的关系第64页
        3.5 URHC 的表达与肝癌患者预后的关系第64-66页
    4 讨论第66-69页
第二部分 LncRNAURHC 对肝癌细胞生物学行为的影响第69-84页
    引言第69页
    1 材料第69-71页
        1.1 所用细胞系第69页
        1.2 主要试剂第69-70页
        1.3 主要仪器及设备第70-71页
    2 方法第71-78页
        2.1 细胞转染第71-72页
        2.2 MTT 实验第72页
        2.3 EdU 实验第72-74页
        2.4 平板克隆形成第74页
        2.5 细胞周期及凋亡第74-75页
        2.6 细胞侵袭能力检测第75页
        2.7 细胞迁移能力检测第75页
        2.8 Western-blot 测定蛋白表达第75-77页
        2.9 统计分析第77-78页
    3 结果第78-82页
        3.1 URHC 对肝癌细胞增殖的影响第78-80页
        3.2 URHC 对肝癌细胞凋亡的影响第80-81页
        3.3 URHC 对肝癌细胞侵袭及迁移能力的影响第81-82页
    4 讨论第82-84页
第三部分 LncRNAURHC 调控肝癌细胞增殖与凋亡的分子机制研究第84-96页
    引言第84页
    1 材料第84-86页
        1.1 所用标本组织及细胞系第84页
        1.2 主要试剂第84-85页
        1.3 主要仪器及设备第85-86页
    2 方法第86-88页
        2.1 与 URHC 相互作用的靶基因分析第86页
        2.2 实时定量 RT-PCR 验证第86页
        2.3 细胞培养第86页
        2.4 细胞转染第86-87页
        2.5 抑制剂 PD98059 共孵育第87页
        2.6 MTT 实验第87页
        2.7 细胞周期测定第87页
        2.8 Western-blot 测定蛋白表达第87页
        2.9 统计分析第87-88页
    3 结果第88-93页
        3.1 ZAK 可能是 URHC 作用的潜在靶基因第88-89页
        3.2 URHC 通过调控 ZAK 表达促进增殖及抑制凋亡第89-91页
        3.3 URHC/ZAK 通过调控下游 ERK/MAPK 通路影响细胞增殖与凋亡第91-93页
    4 讨论第93-96页
小结第96-97页
参考文献第97-116页
个人简历和研究成果第116-117页
致谢第117页

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