| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词简表 | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-37页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 软骨 | 第16-21页 |
| 1.2.1 软骨的组成与结构 | 第16-18页 |
| 1.2.2 软骨的发育 | 第18-21页 |
| 1.2.3 软骨的损伤与修复 | 第21页 |
| 1.3 骨髓间充质干细胞 | 第21-26页 |
| 1.3.1 骨髓间充质干细胞的分离纯化 | 第22页 |
| 1.3.2 骨髓间充质干细胞的体外扩增 | 第22-23页 |
| 1.3.3 骨髓间充质干细胞的体外软骨分化 | 第23-25页 |
| 1.3.4 MSCs 在软骨组织工程与再生医学中的应用及障碍 | 第25-26页 |
| 1.4 ATDC5 细胞 | 第26-28页 |
| 1.4.1 ATDC5 细胞的来源 | 第26页 |
| 1.4.2 ATDC5 细胞在软骨分化机理研究中的应用 | 第26-27页 |
| 1.4.3 ATDC5 细胞在材料评价中的应用 | 第27-28页 |
| 1.5 材料影响干细胞体外分化的研究 | 第28-30页 |
| 1.5.1 表面化学基团对细胞的分化诱导 | 第28-29页 |
| 1.5.2 材料表面形貌对细胞的分化诱导 | 第29页 |
| 1.5.3 材料对细胞形状的控制及分化诱导 | 第29-30页 |
| 1.5.4 材料的硬度对细胞的分化诱导 | 第30页 |
| 1.6 I 型胶原概述 | 第30-35页 |
| 1.6.1 I 型胶原的结构 | 第30-31页 |
| 1.6.2 I 型胶原的体内组装 | 第31页 |
| 1.6.3 I 型胶原的体外重组 | 第31-33页 |
| 1.6.4 I 型胶原的功能 | 第33-34页 |
| 1.6.5 I 型胶原在软骨组织工程与再生医学中的应用 | 第34-35页 |
| 本论文的研究目的、意义及主要研究内容 | 第35-37页 |
| 第二章 不同形态 I 型胶原的制备与表征 | 第37-50页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 实验试剂与仪器 | 第37-39页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第39页 |
| 2.2.3 材料的表征 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-48页 |
| 2.3.1 胶原纤维的体外重组条件研究 | 第40-43页 |
| 2.3.2 胶原重组纤维膜制备与表征 | 第43-47页 |
| 2.3.3 胶原非重组纤维结构海绵支架的制备与表征 | 第47-48页 |
| 2.3.4 网状纤维结构胶原凝胶的制备与表征 | 第48页 |
| 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 材料对软骨分化影响细胞评价模型的建立 | 第50-76页 |
| 3.1 引言 | 第50-51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-56页 |
| 3.2.1 实验试剂与仪器 | 第51-52页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第52页 |
| 3.2.3 细胞的软骨分化诱导 | 第52-53页 |
| 3.2.4 内参基因稳定性的筛选 | 第53-54页 |
| 3.2.5 细胞增殖分析 | 第54页 |
| 3.2.6 dsDNA 定量分析 | 第54页 |
| 3.2.7 GAG 定量分析 | 第54-55页 |
| 3.2.8 阿辛蓝染色分析 | 第55页 |
| 3.2.9 mRNA 转录水平的实时定量分析 | 第55-56页 |
| 3.2.10 数据分析与处理 | 第56页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第56-74页 |
| 3.3.1 软骨分化过程中内参基因的选择 | 第56-64页 |
| 3.3.2 选中的内参基因在 mBMSCs 细胞中的适用性分析 | 第64页 |
| 3.3.3 ATDC5 软骨分化诱导液的优化 | 第64-72页 |
| 3.3.4 ATDC5 在三维培养条件下的软骨分化性能 | 第72-74页 |
| 本章小结 | 第74-76页 |
| 第四章 不同形态 I 型胶原对 ATDC5 软骨分化的影响 | 第76-87页 |
| 4.1 引言 | 第76-77页 |
| 4.2 材料与方法 | 第77-79页 |
| 4.2.1 实验试剂与仪器 | 第77-78页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第78页 |
| 4.2.3 细胞在不同形态 I 型胶原中的软骨分化诱导 | 第78页 |
| 4.2.4 mRNA 转录水平的实时定量分析 | 第78页 |
| 4.2.5 扫描电镜分析 | 第78-79页 |
| 4.2.6 数据分析与处理 | 第79页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第79-85页 |
| 4.3.1 胶原重组纤维膜对 ATDC5 细胞软骨分化的影响 | 第79-82页 |
| 4.3.2 胶原形态对 ATDC5 软骨分化的影响及机理探讨 | 第82-85页 |
| 本章小结 | 第85-87页 |
| 第五章 不同形态 I 型胶原对 ATDC5 软骨内骨化的影响 | 第87-102页 |
| 5.1 引言 | 第87页 |
| 5.2 材料与方法 | 第87-91页 |
| 5.2.1 实验试剂与仪器 | 第87-89页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第89页 |
| 5.2.3 ATDC5 细胞内骨化诱导条件的确定 | 第89页 |
| 5.2.4 ATDC5 细胞的单层内骨化诱导 | 第89-90页 |
| 5.2.5 ATDC5 细胞的三维内骨化诱导 | 第90页 |
| 5.2.6 扫描电镜分析 | 第90页 |
| 5.2.7 染色分析 | 第90-91页 |
| 5.2.8 碱性磷酸酶活性测定 | 第91页 |
| 5.2.9 数据分析与处理 | 第91页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第91-101页 |
| 5.3.1 ATDC5 细胞内骨化诱导条件的确定 | 第91-95页 |
| 5.3.2 胶原重组纤维膜对 ATDC5 软骨内骨化的影响 | 第95-98页 |
| 5.3.3 非重组纤维结构海绵支架对 ATDC5 软骨内骨化的影响 | 第98-101页 |
| 本章小结 | 第101-102页 |
| 第六章 I 型胶原促进 MSCs 软骨分化及其对 FAK 与 MAPK 信号通路影响的初步研究 | 第102-122页 |
| 6.1 引言 | 第102页 |
| 6.2 材料与方法 | 第102-106页 |
| 6.2.1 实验试剂与仪器 | 第102-104页 |
| 6.2.2 细胞的培养 | 第104页 |
| 6.2.3 胶原与细胞的复合培养及软骨分化诱导 | 第104页 |
| 6.2.4 mRNA 转录水平的实时定量分析 | 第104页 |
| 6.2.5 组织染色分析 | 第104-105页 |
| 6.2.6 Western blot 分析 | 第105-106页 |
| 6.2.7 数据分析与处理 | 第106页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第106-120页 |
| 6.3.1 凝胶-细胞团内 I 型胶原的掺入效果验证 | 第106-107页 |
| 6.3.2 I 型胶原对 MSCs 软骨细胞团生长的促进作用 | 第107-108页 |
| 6.3.3 基因表达水平分析 | 第108-109页 |
| 6.3.4 组织切片与染色分析 | 第109-113页 |
| 6.3.5 I 型胶原对 MAPK 家族信号通路的影响 | 第113-119页 |
| 6.3.6 I 型胶原对 FAK 蛋白表达的影响 | 第119-120页 |
| 本章小结 | 第120-122页 |
| 结论 | 第122-124页 |
| 本论文的创新性 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-146页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 附件 | 第149页 |
