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精子mRNA高通量测序及检测结果评估

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
部分缩写的中英文对照第9-10页
第一章:文献综述第10-19页
    1. 父源因子的重要作用第10页
    2、精子发生第10-12页
    3、精子RNA的研究进展第12-15页
        3.1 精子RNA的存在第12-13页
        3.2 精子RNA的种类第13-14页
        3.3 精子RNA的功能第14-15页
    4、高通量测序技术第15-17页
    5、本研究的技术路线及目的意义第17-19页
第二章:实验样品制备及检测第19-27页
    1、实验材料第19-20页
        1.1 实验动物第19页
        1.2 主要试剂第19页
        1.3 主要仪器及器材第19-20页
        1.4 主要试剂配制第20页
    2、试验方法第20-24页
        2.1 高纯度射出精子样品制备第20-21页
        2.2 显微镜检测第21页
        2.3 精子样品总RNA抽提第21页
        2.4 RT-PCR检测第21-24页
            2.4.1 cDNA制备第21-22页
            2.4.2 PCR检测第22-24页
    3、结果与分析第24-27页
        3.1 实验结果第24-25页
            3.1.1 精子样品镜检第24-25页
            3.1.2 RT-PCR检测第25页
        3.2 结果分析第25-27页
第三章:精子mRNA高通量测序第27-32页
    1、实验材料第27-28页
        1.1 实验样品第27页
        1.2 主要试剂第27页
        1.3 主要仪器第27-28页
    2、试验方法第28-29页
        2.1 总RNA的提取第28页
        2.2 总RNA质检第28页
        2.3 mRNA测序文库构建第28-29页
        2.4 文库质检第29页
        2.5 Cluster生成第29页
        2.6 mRNA上机测序第29页
    3、结果与分析第29-32页
        3.1 实验结果第29-31页
            3.1.1 总RNA质检结果第29-30页
            3.1.2 文库质检结果第30-31页
            3.1.3 数据过滤结果第31页
        3.2 结果分析第31-32页
第四章 mRNA数据分析与结果第32-44页
    1、材料与方法第32-33页
        1.1 分析平台第32页
        1.2 分析用数据库第32-33页
            1.2.1 数据处理涉及网站及相应数据版本第32-33页
            1.2.2 数据分析使用的软件第33页
    2 分析流程第33-35页
        2.1 利用FastQC对测序数据进行质量检测第33页
        2.2 使用Bowtie2建立比对索引文件第33页
        2.3 使用Tophat对测序序列与基因组进行比对第33-34页
        2.4 使用Cufflinks对比对结果进行组装和定量第34页
        2.5 基因筛选及功能分析第34-35页
    3. 结果与分析第35-44页
        3.1 实验结果第35-42页
            3.1.1 FastQC检测结果第35-36页
            3.1.2 测序序列与基因组比对结果第36-37页
            3.1.3 Cufflinks基因定量结果第37-39页
            3.1.4 功能注释分析第39-42页
        3.2 结果分析第42-44页
第五章:RT-PCR验证部分基因的表达第44-50页
    1、实验材料第44-45页
        1.1 实验样品第44页
        1.2 主要试剂第44页
        1.3 主要仪器第44-45页
    2、试验方法第45-47页
        2.2 总RNA的提取第45页
        2.3 cDNA制备第45页
        2.4 PCR检测第45-46页
        2.5 PCR反应体系第46-47页
        2.6 琼脂糖凝胶电泳检测第47页
    3、实验结果与分析第47-50页
        3.1 实验结果第47-49页
            3.1.1 PCR检测结果第47-48页
            3.1.2 测序结构第48-49页
        3.2 结果分析第49-50页
讨论第50-52页
全文结论第52-53页
参考文献第53-59页
附录第59-76页
致谢第76-77页

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