| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 棉纤维发育分子机制研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 分化起始期 | 第13-14页 |
| 1.1.2 伸长及初生壁合成期 | 第14-15页 |
| 1.1.3 次生壁加厚期 | 第15-16页 |
| 1.1.4 脱水成熟期 | 第16页 |
| 1.2 植物 MYB 转录因子的研究 | 第16-22页 |
| 1.2.1 植物 MYB 转录因子的进化 | 第17-18页 |
| 1.2.2 植物 MYB 转录因子的特征与分类 | 第18-19页 |
| 1.2.3 植物 MYB 转录因子的功能 | 第19-22页 |
| 1.3 棉花中的 MYB 转录因子 | 第22-24页 |
| 1.4 本研究的目的意义和研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 棉花两个 MYB 转录因子的克隆及序列分析 | 第26-43页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料及菌株 | 第26页 |
| 2.1.2 工具酶及生化试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.4 PCR 引物 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 棉花总 RNA 的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 第一链 cDNA 的合成 | 第27页 |
| 2.2.3 棉花总 DNA 的提取 | 第27-29页 |
| 2.2.4 棉花两个 MYB 基因 cDNA 全长 PCR 扩增 | 第29页 |
| 2.2.5 GhMYB0 基因 DNA 全长 PCR 扩增 | 第29页 |
| 2.2.6 PCR 产物回收 | 第29-30页 |
| 2.2.7 PCR 产物的克隆 | 第30页 |
| 2.2.8 大肠杆菌 DH5α感受态细胞转化 | 第30-31页 |
| 2.2.9 转化子的蓝、白斑筛选 | 第31页 |
| 2.2.10 转化子的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.11 棉花两个 MYB 基因的序列分析 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 棉花两个 MYB 基因 cDNA 全长序列的获得 | 第32-35页 |
| 2.3.2 棉花两个 MYB 基因的序列特征分析及编码蛋白的结构功能预测 | 第35-40页 |
| 2.3.3 GhMYB0 基因结构及其内含子分析 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 GhMYB0 与 GhMYB2-like 的功能验证 | 第43-51页 |
| 3.1 材料 | 第43页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 3.1.2 菌株及质粒 | 第43页 |
| 3.1.3 工具酶及生化试剂 | 第43页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第43页 |
| 3.1.5 PCR 引物 | 第43页 |
| 3.2 方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.2 表达载体重组质粒 DNA 的提取 | 第44页 |
| 3.2.3 MYB 转录因子的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 3.2.4 GhMYB0 与 GhMYB2-like 的 qRT-PCR 分析 | 第45页 |
| 3.2.5 GhMYB2-like 可变剪接体的绝对定量分析 | 第45-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-50页 |
| 3.3.1 表达载体的构建 | 第46页 |
| 3.3.2 GhMYB0 的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| 3.3.3 GhMYB0 和 GhMYB2-like 的 qRT-PCR 分析 | 第47-48页 |
| 3.3.4 GhMYB2-like 可变剪接体的绝对定量分析 | 第48-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50页 |
| 3.5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 GhMYB0 和 GhMYB2-like 在拟南芥中的表达及其相关功能分析 | 第51-68页 |
| 4.1 材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 4.1.2 菌株及质粒 | 第51页 |
| 4.1.3 工具酶及生化试剂 | 第51页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第51页 |
| 4.1.5 PCR 引物 | 第51-52页 |
| 4.2 方法 | 第52-57页 |
| 4.2.1 植物表达载体的构建 | 第52页 |
| 4.2.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第52页 |
| 4.2.3 GhMYB0 和 GhMYB2-like 基因遗传转化拟南芥 | 第52-53页 |
| 4.2.4 转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第53-54页 |
| 4.2.5 转基因拟南芥 T3 代表皮毛发育相关基因以及赤霉素合成相关基因的表达 | 第54页 |
| 4.2.6 扫描电镜观察转基因拟南芥种皮毛 | 第54-56页 |
| 4.2.7 农杆菌介导法遗传转化棉花 | 第56-57页 |
| 4.3 结果 | 第57-64页 |
| 4.3.1 转基因拟南芥植株的筛选及检测 | 第57-58页 |
| 4.3.2 GhMYB0 拟南芥超表达株系的分析及其与野生型的比较 | 第58-59页 |
| 4.3.3 GhMYB0 与 GhMYB0d 转基因拟南芥叶片表皮毛比较 | 第59页 |
| 4.3.4 GhMYB2-like 拟南芥超表达株系的分析及其与野生型的比较 | 第59-60页 |
| 4.3.5 转基因拟南芥 T3 代表皮毛发育相关基因及赤霉素合成相关基因的表达 | 第60-63页 |
| 4.3.6 农杆菌介导法遗传转化棉花 | 第63-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-66页 |
| 4.5 小结 | 第66-68页 |
| 第五章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
