摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 花色研究进展 | 第12-16页 |
1.1.1 花色与色素概述 | 第12-13页 |
1.1.2 花色素苷及其生物合成 | 第13-16页 |
1.2 蓝色花研究概况 | 第16-17页 |
1.2.1 蓝色花研究历史 | 第16页 |
1.2.2 蓝色花色素组成 | 第16-17页 |
1.2.3 蓝色花分子育种研究 | 第17页 |
1.3 二氢黄酮醇 4-还原酶(DFR)研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 DFR 基因的结构和作用机制 | 第17-18页 |
1.3.2 DFR 基因的分离 | 第18页 |
1.3.3 DFR 基因的底物特异性 | 第18页 |
1.3.4 DFR 基因的时空表达特性 | 第18-19页 |
1.4 本研究目的意义及设计思路 | 第19-21页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第19-20页 |
1.4.2 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株及质粒 | 第21-22页 |
2.2 酶及化学试剂 | 第22页 |
2.3 实验仪器 | 第22页 |
2.4 引物 | 第22-23页 |
2.5 方法 | 第23-29页 |
2.5.1 RNA 的提取及检测 | 第23页 |
2.5.2 First-Strand cDNA 合成 | 第23-24页 |
2.5.3 引物设计 | 第24页 |
2.5.4 PCR 扩增产物的回收 | 第24页 |
2.5.5 回收产物与 pMD19-T 载体连接 | 第24-25页 |
2.5.6 连接产物转化感受态细胞 | 第25页 |
2.5.7 菌液 PCR 鉴定重组克隆载体 | 第25页 |
2.5.8 重组质粒的提取 | 第25-26页 |
2.5.9 重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
2.5.10 生物信息学分析 | 第26页 |
2.5.11 亚细胞定位载体的构建 | 第26-27页 |
2.5.12 亚细胞定位 | 第27-28页 |
2.5.13 DFR 基因的表达模式分析 | 第28页 |
2.5.14 花青素含量测定 | 第28-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-50页 |
3.1 RNA 的提取 | 第29-30页 |
3.2 葡萄风信子 DFR 基因全长的克隆与序列特征 | 第30-36页 |
3.2.1 葡萄风信子 MaDFR1 基因全长克隆及序列特征 | 第30-32页 |
3.2.2 葡萄风信子 MaDFR2a、MaDFR2b 基因全长克隆及序列特征 | 第32-36页 |
3.3 葡萄风信子 DFR 编码的蛋白同源性及其进化分析 | 第36-39页 |
3.4 葡萄风信子 DFR 蛋白的生物信息学分析 | 第39-43页 |
3.4.1 葡萄风信子 DFR 蛋白亲水性/疏水性、信号肽、跨膜结构域以及磷酸化位点分析 | 第39-41页 |
3.4.2 葡萄风信子 DFR 结构域分析 | 第41页 |
3.4.3 葡萄风信子 DFR 二级结构和三级结构分析 | 第41-43页 |
3.5 葡萄风信子 DFR 基因的亚细胞定位 | 第43-46页 |
3.5.1 葡萄风信子 DFR 基因亚细胞定位载体的构建 | 第43-45页 |
3.5.2 葡萄风信子 DFR 基因亚细胞定位 | 第45-46页 |
3.6 葡萄风信子 DFR 的时空表达模式分析 | 第46-49页 |
3.7 葡萄风信子不同器官花青素含量测定分析 | 第49-50页 |
第四章 讨论 | 第50-52页 |
第五章 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
作者简介 | 第61页 |