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葡萄风信子DFR基因克隆及表达分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第12-21页
    1.1 花色研究进展第12-16页
        1.1.1 花色与色素概述第12-13页
        1.1.2 花色素苷及其生物合成第13-16页
    1.2 蓝色花研究概况第16-17页
        1.2.1 蓝色花研究历史第16页
        1.2.2 蓝色花色素组成第16-17页
        1.2.3 蓝色花分子育种研究第17页
    1.3 二氢黄酮醇 4-还原酶(DFR)研究进展第17-19页
        1.3.1 DFR 基因的结构和作用机制第17-18页
        1.3.2 DFR 基因的分离第18页
        1.3.3 DFR 基因的底物特异性第18页
        1.3.4 DFR 基因的时空表达特性第18-19页
    1.4 本研究目的意义及设计思路第19-21页
        1.4.1 研究目的和意义第19-20页
        1.4.2 技术路线第20-21页
第二章 材料与方法第21-29页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 菌株及质粒第21-22页
    2.2 酶及化学试剂第22页
    2.3 实验仪器第22页
    2.4 引物第22-23页
    2.5 方法第23-29页
        2.5.1 RNA 的提取及检测第23页
        2.5.2 First-Strand cDNA 合成第23-24页
        2.5.3 引物设计第24页
        2.5.4 PCR 扩增产物的回收第24页
        2.5.5 回收产物与 pMD19-T 载体连接第24-25页
        2.5.6 连接产物转化感受态细胞第25页
        2.5.7 菌液 PCR 鉴定重组克隆载体第25页
        2.5.8 重组质粒的提取第25-26页
        2.5.9 重组质粒的酶切鉴定第26页
        2.5.10 生物信息学分析第26页
        2.5.11 亚细胞定位载体的构建第26-27页
        2.5.12 亚细胞定位第27-28页
        2.5.13 DFR 基因的表达模式分析第28页
        2.5.14 花青素含量测定第28-29页
第三章 结果与分析第29-50页
    3.1 RNA 的提取第29-30页
    3.2 葡萄风信子 DFR 基因全长的克隆与序列特征第30-36页
        3.2.1 葡萄风信子 MaDFR1 基因全长克隆及序列特征第30-32页
        3.2.2 葡萄风信子 MaDFR2a、MaDFR2b 基因全长克隆及序列特征第32-36页
    3.3 葡萄风信子 DFR 编码的蛋白同源性及其进化分析第36-39页
    3.4 葡萄风信子 DFR 蛋白的生物信息学分析第39-43页
        3.4.1 葡萄风信子 DFR 蛋白亲水性/疏水性、信号肽、跨膜结构域以及磷酸化位点分析第39-41页
        3.4.2 葡萄风信子 DFR 结构域分析第41页
        3.4.3 葡萄风信子 DFR 二级结构和三级结构分析第41-43页
    3.5 葡萄风信子 DFR 基因的亚细胞定位第43-46页
        3.5.1 葡萄风信子 DFR 基因亚细胞定位载体的构建第43-45页
        3.5.2 葡萄风信子 DFR 基因亚细胞定位第45-46页
    3.6 葡萄风信子 DFR 的时空表达模式分析第46-49页
    3.7 葡萄风信子不同器官花青素含量测定分析第49-50页
第四章 讨论第50-52页
第五章 结论第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-61页
作者简介第61页

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