中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 gypenosideLI诱导黑色素瘤细胞凋亡的分子机制研究 | 第18-35页 |
(一)材料和方法 | 第18-23页 |
1.实验材料 | 第18-20页 |
1.1 实验对象 | 第18页 |
1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2.实验方法 | 第20-23页 |
2.1 细胞培养 | 第20页 |
2.2 药物浓度的筛选 | 第20页 |
2.3 细胞形态学观察 | 第20-21页 |
2.4 流式细胞凋亡检测实验 | 第21页 |
2.5 细胞周期检测实验 | 第21页 |
2.6 细胞集落实验 | 第21页 |
2.7 蛋白质免疫印迹(Westernblot) | 第21-23页 |
2.8 统计学分析 | 第23页 |
(二)结果 | 第23-32页 |
1.Cisplatin和gypenoside LI对HaCat、A375和SK-MEL-28细胞的毒性作用 | 第23-25页 |
2.Gypenoside LI可诱导黑色素瘤细胞的凋亡 | 第25-27页 |
3.Gypenoside LI使黑色素瘤细胞周期阻滞在S期 | 第27-29页 |
4.Gypenoside LI抑制黑色素瘤细胞内Wnt/β-catenin信号通路 | 第29页 |
5.Gypenoside LI抑制黑色素瘤细胞集落的形成 | 第29-31页 |
6.Gypenoside LI上调黑色素瘤细胞中IL-24蛋白的表达 | 第31-32页 |
(三)讨论 | 第32-34页 |
(四)结论 | 第34-35页 |
第二部分 miR-128-3p对黑色素瘤A375细胞增殖影响的分子机制 | 第35-57页 |
(一)材料和方法 | 第35-42页 |
1.实验材料 | 第35-37页 |
1.1 实验对象 | 第35页 |
1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
2.实验方法 | 第37-42页 |
2.1 细胞培养 | 第37页 |
2.2 细胞总RNA的提取 | 第37页 |
2.3 实时荧光定量PCR实验 | 第37-39页 |
2.4 细胞转染实验 | 第39页 |
2.5 细胞增殖实验 | 第39-40页 |
2.6 细胞集落实验 | 第40页 |
2.7 Transwell迁移实验 | 第40页 |
2.8 细胞划痕实验 | 第40页 |
2.9 蛋白质免疫印迹(Westernblot) | 第40-41页 |
2.10 统计学分析 | 第41-42页 |
(二)结果 | 第42-55页 |
1.miR-128-3p在HaCat、A375细胞中表达的特异性 | 第42-43页 |
2.qPCR检测下调/上调 miR-128-3p 的 HaCat/A375 细胞中 miR-128-3p 的表达量减少/增加 | 第43-44页 |
3.过表达miR-128-3p后,A375细胞培养24h、48h的细胞活力受到抑制 | 第44-45页 |
4.下调/上调miR-128-3p促进/抑制HaCat/A375细胞的增殖 | 第45-47页 |
5.下调/上调miR-128-3p促进/抑制HaCat/A375细胞迁移相关蛋白的表达 | 第47-49页 |
6.TargetScan软件预测miR-128-3p的靶基因为DVL2和CDC | 第49-53页 |
7.下调/上调miR-128-3p促进/抑制HaCat/A375细胞增殖相关蛋白的表达 | 第53-55页 |
(三)讨论 | 第55-56页 |
(四)结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 | 第62-73页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |