| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 蜕皮信号通路 | 第13-20页 |
| 1.1.1 蜕皮激素上游调控机制 | 第14-16页 |
| 1.1.2 蜕皮激素信号通路下游调控机制 | 第16-19页 |
| 1.1.3 蜕皮激素信号调控生长的机制研究 | 第19-20页 |
| 1.2 Wnt信号通路 | 第20-22页 |
| 1.2.1 Wnt基因的发现 | 第20页 |
| 1.2.2 Wnt基因家族 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Wnt信号通路的作用 | 第21-22页 |
| 1.2.4 蜕皮信号通路与Wnt信号通路的关系 | 第22页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的主要内容和技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 凡纳滨对虾EcR和RXR基因结构、表达模式及功能分析 | 第25-47页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第25-36页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 组织取样 | 第25页 |
| 2.1.3 数据来源 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂和实验仪器 | 第26页 |
| 2.1.5 LvEcR和LvRXR基因序列分析 | 第26页 |
| 2.1.6 总RNA提取和cDNA合成 | 第26-28页 |
| 2.1.7 LvEcR和LvRCR基因克隆 | 第28-31页 |
| 2.1.8 双链RNA(dsRNA)合成及RNA干扰 | 第31-34页 |
| 2.1.9 荧光定量PCR | 第34-36页 |
| 2.2 结果和分析 | 第36-45页 |
| 2.2.1 凡纳滨对虾LvEcR和LvRXR基因的鉴定和isoforms分析 | 第36-38页 |
| 2.2.2 系统发生分析 | 第38-40页 |
| 2.2.3 基因表达模式 | 第40-43页 |
| 2.2.4 LvEcR和LvRXR基因干扰 | 第43页 |
| 2.2.5 LvEcR和LvRXR基因被干扰后对下游信号通路基因表达的调控 | 第43-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 凡纳滨对虾E75基因可变剪切形式鉴定、表达模式及功能分析 | 第47-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-51页 |
| 3.1.1 实验材料及组织取样 | 第47页 |
| 3.1.2 数据来源 | 第47页 |
| 3.1.3 主要试剂及实验仪器 | 第47页 |
| 3.1.4 序列分析 | 第47页 |
| 3.1.5 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第47-48页 |
| 3.1.6 E75基因克隆 | 第48-49页 |
| 3.1.7 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第49-50页 |
| 3.1.8 双链RAN合成及最佳干扰剂量摸索 | 第50-51页 |
| 3.1.9 双链RNA对蜕皮率和死亡率的影响 | 第51页 |
| 3.2 结果和分析 | 第51-59页 |
| 3.2.1 凡纳滨对虾E75基因的鉴定和isoforms分析 | 第51-56页 |
| 3.2.2 LvE75基因各可变剪切形式在蜕皮周期和不同组织的表达分布 | 第56-57页 |
| 3.2.3 LvE75基因干扰剂量 | 第57页 |
| 3.2.4 LvE75基因被干扰后对凡纳滨对虾蜕皮和存活情况的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.5 LvE75基因沉默对蜕皮激素信号通路上下游基因表达的影响 | 第58-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 凡纳滨对虾HR3基因和FTZ-F1基因可变剪切鉴定及表达模式分析 | 第61-73页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 4.1.2 数据来源 | 第61页 |
| 4.1.3 主要试剂及实验材料 | 第61页 |
| 4.1.4 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第61页 |
| 4.1.5 LvHR3和LvFTZ-F1序列分析 | 第61页 |
| 4.1.6 LvHR3和LvFTZ-F1基因克隆 | 第61-62页 |
| 4.1.7 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第62页 |
| 4.1.8 双链RNA(dsRNA)合成及最佳干扰剂量摸索 | 第62-63页 |
| 4.1.9 dsRNA干扰对蜕皮率和死亡率的影响 | 第63页 |
| 4.2 结果 | 第63-71页 |
| 4.2.1 凡纳滨对虾HR3和FTZ-F1基因可变剪切形式鉴定、结构分析 | 第63-66页 |
| 4.2.2 凡纳滨对虾HR3和FTZ-F1基因在不同发育时期的表达模式 | 第66-67页 |
| 4.2.3 凡纳滨对虾HR3和FTZ-F1基因在不同组织中的表达模式 | 第67-68页 |
| 4.2.4 凡纳滨对虾HR3和FTZ-F1基因在蜕皮不同阶段的表达模式 | 第68页 |
| 4.2.5 LvHR3和LvFTZ-F1基因干扰的最佳剂量筛选 | 第68-69页 |
| 4.2.6 LvHR3和LvFTZ-F1基因干扰对蜕皮率和死亡率的影响 | 第69-70页 |
| 4.2.7 LvFTZ-F1基因干扰对蜕皮通路其他基因的影响 | 第70-71页 |
| 4.3 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 凡纳滨对虾Wnt基因家族鉴定及表达模式分析 | 第73-89页 |
| 5.1 材料与方法 | 第73-75页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第73页 |
| 5.1.2 Wnt基因鉴定 | 第73页 |
| 5.1.3 序列分析 | 第73-74页 |
| 5.1.4 进化树分析 | 第74页 |
| 5.1.5 LvWnt基因表达模式分析 | 第74页 |
| 5.1.6 RNA提取和cDNA合成 | 第74页 |
| 5.1.7 荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第74-75页 |
| 5.2 结果 | 第75-86页 |
| 5.2.1 LvWnt基因鉴定和结构分析 | 第75-81页 |
| 5.2.2 系统发生分析 | 第81-82页 |
| 5.2.3 LvWnt基因表达模式 | 第82-86页 |
| 5.2.3.1 LvWnt基因在不同发育时期的表达模式 | 第82-84页 |
| 5.2.3.2 不同蜕皮时期的表达模式 | 第84-85页 |
| 5.2.3.3 不同组织中的表达模式 | 第85-86页 |
| 5.3 讨论 | 第86-89页 |
| 第六章 凡纳滨对虾蜕皮信号通路与Wnt通路的相互联系 | 第89-95页 |
| 6.1 材料和方法 | 第89-90页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第89页 |
| 6.1.2 序列分析 | 第89页 |
| 6.1.3 荧光定量PCR | 第89-90页 |
| 6.2 结果与分析 | 第90-93页 |
| 6.2.1 LvZW3和LvSulf-1基因序列分析 | 第90页 |
| 6.2.2 20E处理及蜕皮激素应答基因干扰对LvZW3和LvSulf-1基因的影 | 第90-91页 |
| 6.2.3 20E处理及LvEcR、LvRXR、LvE75基因干扰对Wnt基因的影响 | 第91-93页 |
| 6.3 讨论 | 第93-95页 |
| 结论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 个人简历 | 第107-108页 |
| 硕士期间发表和完成的文章 | 第108页 |
