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五指山小型猪近交系中猪内源性反转录病毒pol基因缺陷型的筛选与鉴定

个人简历第3-7页
缩略词表第7-9页
摘要第9-12页
Abstract第12-15页
前言第16-21页
1 材料与方法第21-34页
    1.1 材料第21-23页
    1.2 外周血单个核细胞分离第23页
    1.3 细胞共培养第23页
    1.4 PCR检测基因组DNA中PERV的存在情况第23-25页
        1.4.1 TRIzol法提DNA第23-24页
        1.4.2 PCR检测PBMC去除情况第24页
        1.4.3 PCR检测PERV的存在情况第24-25页
    1.5 RT-PCR检测mRNA中PERV的表达情况第25-26页
        1.5.1 TRIzol法提RNA第25-26页
        1.5.2 RT-PCR检测PERV的表达情况第26页
    1.6 反转录酶活性检测第26-28页
    1.7 无PERV传染性猪全基因组重测序鉴定第28-29页
    1.8 带有N碱基的pol序列基因克隆与序列分析第29-34页
        1.8.1 引物设计与合成第29-30页
        1.8.2 提取PBMC基因组DNA第30页
        1.8.3 PCR扩增及产物末端加“A”尾第30-31页
        1.8.4 目的片段回收与纯化第31-32页
        1.8.5 PERV-640pol基因与pMD-18T载体连接第32页
        1.8.6 转化第32页
        1.8.7 菌落PCR筛选第32页
        1.8.8 重组质粒酶切鉴定第32-33页
        1.8.9 序列分析第33-34页
2 结果第34-47页
    2.1 无PERV传染性猪的初步筛选结果第34-36页
        2.1.1 PCR检测PBMC残留情况第34页
        2.1.2 RT-PCR检测PERV的表达情况第34-36页
    2.2 无PERV传染性猪的确证实验结果第36-38页
        2.2.1 PCR检测PERV的存在情况第36页
        2.2.2 RT-PCR检测PERV的表达情况第36-37页
        2.2.3 反转录酶活性检测结果第37-38页
    2.3 全基因组序列分析与鉴定第38-44页
        2.3.1 质量控制的结果与分析第38-40页
        2.3.2 测序结果数据统计第40页
        2.3.3 与参考基因组比对结果统计第40-41页
        2.3.4 变异信息注释结果统计第41页
        2.3.5 分析WZSP452中PERV-pol基因情况第41-42页
        2.3.6 WZSP452与其它猪PERV-pol基因比较第42-43页
        2.3.7 对WZSP452中PERV长片段进行分析第43-44页
    2.4 带有N碱基的pol序列基因克隆与序列分析结果第44-47页
        2.4.1 PCR扩增结果第44页
        2.4.2 菌落PCR筛选第44-45页
        2.4.3 双酶切鉴定第45-46页
        2.4.4 序列分析第46-47页
3 讨论第47-52页
结论第52-53页
参考文献第53-65页
综述:异种移植中猪内源性反转录病毒感染控制的研究进展第65-78页
    参考文献第73-78页
致谢第78-80页
攻读学位期间发表的学位论文第80-81页
附件第81-87页

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