中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
符号说明 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-35页 |
1.1 引言 | 第15页 |
1.2 荧光适体传感器 | 第15-20页 |
1.2.1 识别组件——适体 | 第15-16页 |
1.2.2 信号转导组件——荧光 | 第16-18页 |
1.2.3 荧光适体传感器的发展 | 第18-20页 |
1.3 信号放大技术 | 第20-31页 |
1.3.1 基于蛋白酶催化的信号放大策略 | 第20-26页 |
1.3.2 基于脱氧核酶的信号放大策略 | 第26-29页 |
1.3.3 无酶的信号放大策略 | 第29-31页 |
1.4 腺苷 | 第31-34页 |
1.4.1 腺苷的检测意义 | 第31-32页 |
1.4.2 腺苷主要的检测方法 | 第32-33页 |
1.4.3 腺苷适体传感器面临的问题 | 第33-34页 |
1.5 本论文拟开展的工作 | 第34-35页 |
第二章 基于发卡结构自组装的新型腺苷适体传感器 | 第35-55页 |
2.1 引言 | 第35-36页 |
2.2 实验部分 | 第36-38页 |
2.2.1 仪器装置 | 第36页 |
2.2.2 试剂 | 第36-37页 |
2.2.3 实验方法 | 第37-38页 |
2.2.4 凝胶的制备和电泳实验 | 第38页 |
2.3 结果与讨论 | 第38-54页 |
2.3.1 适体传感器的工作原理 | 第38-39页 |
2.3.2 发卡探针的设计 | 第39页 |
2.3.3 四分体结构的设计 | 第39-41页 |
2.3.4 阻滞链的设计 | 第41-42页 |
2.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验 | 第42-43页 |
2.3.6 体系的荧光图谱 | 第43-44页 |
2.3.7 反应条件的优化 | 第44-50页 |
2.3.7.1 适体催化链浓度的优化 | 第44-45页 |
2.3.7.2 发卡结构的浓度和比例的优化 | 第45-48页 |
2.3.7.3 反应时间的优化 | 第48-49页 |
2.3.7.4 NMM的用量优化 | 第49-50页 |
2.3.8 腺苷的分析检测 | 第50-52页 |
2.3.9 建立适体传感器的方法学验证 | 第52-54页 |
2.4 结论 | 第54-55页 |
第三章 基于共区域化触发的HCR的腺苷适体传感器 | 第55-75页 |
3.1 引言 | 第55-57页 |
3.2 实验部分 | 第57-58页 |
3.2.1 仪器装置 | 第57页 |
3.2.2 试剂 | 第57-58页 |
3.3 实验步骤 | 第58-60页 |
3.3.1 磁球的活化 | 第58页 |
3.3.2 生物素化DNA的固定 | 第58-59页 |
3.3.3 腺苷诱导的共区域化 | 第59页 |
3.3.4 HCR反应 | 第59页 |
3.3.5 插入SYBR Green I和荧光检测 | 第59-60页 |
3.4 结果与讨论 | 第60-74页 |
3.4.1 腺苷诱导共区域化的适体传感器的工作原理 | 第60-61页 |
3.4.2 适体传感器的设计 | 第61页 |
3.4.3 配对碱基个数的优化 | 第61-62页 |
3.4.4 聚丙烯酰胺凝胶的配置与电泳实验 | 第62-63页 |
3.4.5 荧光实验验证 | 第63页 |
3.4.6 系统条件优化 | 第63-67页 |
3.4.7 腺苷的分析检测 | 第67-68页 |
3.4.8 建立适体传感器的方法学验证 | 第68-70页 |
3.4.9 生物样本中的分析应用 | 第70-74页 |
3.4.9.1 尿样中腺苷的校准曲线 | 第70-72页 |
3.4.9.2 尿样中腺苷分析检测的方法学验证 | 第72-73页 |
3.4.9.3 尿样中腺苷的检测 | 第73-74页 |
3.5 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
硕士期间发表论文 | 第91-92页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第92页 |