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蜡梅(Chimonanthus praecox)CpCPC基因的克隆及功能初步分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第1章 文献综述第9-19页
    1.1 转录因子概述第9-11页
        1.1.1 转录因子的基本结构第9-10页
        1.1.2 转录因子的分类第10页
        1.1.3 植物转录因子的功能第10-11页
    1.2 MYB类转录因子简介第11-17页
        1.2.1 植物MYB转录因子的结构特征及分类第11-14页
        1.2.2 MYB类转录因子的起源与进化第14页
        1.2.3 MYB类转录因子的主要功能第14-17页
    1.3 CPC基因简介第17-19页
第2章 引言第19-21页
    2.1 研究背景和意义第19-20页
    2.2 技术路线第20-21页
第3章 蜡梅CpCPC基因的克隆和序列分析第21-41页
    3.1 实验材料与试剂第21-22页
        3.1.1 蜡梅花及蜡梅花cDNA文库第21页
        3.1.2 菌株与载体第21页
        3.1.3 主要仪器设备第21页
        3.1.4 主要化学试剂及试剂盒第21页
        3.1.5 常用自配试剂第21-22页
    3.2 实验方法第22-29页
        3.2.1 蜡梅基因组DNA提取第22-23页
        3.2.2 蜡梅总RNA提取第23-25页
        3.2.3 蜡梅cDNA第一链的合成第25页
        3.2.4 CpCPC基因5’及3’RACE模板合成第25-26页
        3.2.5 蜡梅CPC基因EST序列的获得第26页
        3.2.6 利用5’RACE克隆印CPC基因5’端cDNA序列第26-29页
        3.2.7 CpCPC基因的克隆及内含子分析第29页
        3.2.8 CpCPC基因cDNA的生物信息学分析第29页
    3.3 结果与分析第29-39页
        3.3.1 蜡梅基因组DNA以及总RNA结果检测第29-31页
        3.3.2 CpCPC基因的克隆及其cDNA序列特征第31-33页
        3.3.3 CpCPC基因编码蛋白的同源性比较分析第33-34页
        3.3.4 CpCPC编码蛋白的序列多重比对和进化树分析第34-36页
        3.3.5 CpCPC基因编码蛋白的结构分析第36-39页
    3.4 讨论第39-41页
第4章 CpCPC基因的表达分析第41-47页
    4.1 实验材料第41页
        4.1.1 植物材料第41页
        4.1.2 主要试剂第41页
        4.1.3 主要仪器设备与耗材第41页
    4.2 试验方法第41-43页
        4.2.1 蜡梅不同组织及不同花期材料的获得第41页
        4.2.2 总RNA提取第41-42页
        4.2.3 cDNA第一链合成第42页
        4.2.4 CpCPC表达特性分析第42-43页
    4.3 结果与分析第43-46页
        4.3.1 实时荧光定量PCR引物熔解曲线分析第43页
        4.3.2 实时荧光定量PCR引物标准曲线分析第43-44页
        4.3.3 CpCPC表达的实时荧光定量分析第44-46页
    4.4 讨论第46-47页
第5章 植物表达载体的构建与转化烟草第47-61页
    5.1 实验材料与试剂第47-48页
        5.1.1 植物材料第47页
        5.1.2 菌株与载体第47页
        5.1.3 常用药品试剂配制第47-48页
    5.2 试验方法第48-54页
        5.2.1 植物表达载体的构建第48-52页
        5.2.2 烟草的遗传转化第52-53页
        5.2.3 转基因烟草的检测第53页
        5.2.4 转基因烟草的总黄酮含量测定第53-54页
        5.2.5 转基因烟草根毛数量观测第54页
    5.3 结果与分析第54-59页
        5.3.1 植物表达载体的构建第54-55页
        5.3.2 转基因烟草的检测第55-58页
        5.3.3 转基因烟草中类黄酮物质的定量分析第58页
        5.3.4 转基因烟草根毛观测结果第58-59页
    5.4 讨论第59-61页
第6章 总结第61-63页
    6.1 结论第61页
        6.1.1 CpCPC分子克隆及其特征第61页
        6.1.2 CpCPC的转录表达分析第61页
        6.1.3 CpCPC植物表达载体的构建和转基因烟草的获得与分析第61页
    6.2 下一步研究计划第61-63页
参考文献第63-69页
缩略词表第69-71页
致谢第71页

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