摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第1章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 转录因子概述 | 第9-11页 |
1.1.1 转录因子的基本结构 | 第9-10页 |
1.1.2 转录因子的分类 | 第10页 |
1.1.3 植物转录因子的功能 | 第10-11页 |
1.2 MYB类转录因子简介 | 第11-17页 |
1.2.1 植物MYB转录因子的结构特征及分类 | 第11-14页 |
1.2.2 MYB类转录因子的起源与进化 | 第14页 |
1.2.3 MYB类转录因子的主要功能 | 第14-17页 |
1.3 CPC基因简介 | 第17-19页 |
第2章 引言 | 第19-21页 |
2.1 研究背景和意义 | 第19-20页 |
2.2 技术路线 | 第20-21页 |
第3章 蜡梅CpCPC基因的克隆和序列分析 | 第21-41页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第21-22页 |
3.1.1 蜡梅花及蜡梅花cDNA文库 | 第21页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第21页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
3.1.4 主要化学试剂及试剂盒 | 第21页 |
3.1.5 常用自配试剂 | 第21-22页 |
3.2 实验方法 | 第22-29页 |
3.2.1 蜡梅基因组DNA提取 | 第22-23页 |
3.2.2 蜡梅总RNA提取 | 第23-25页 |
3.2.3 蜡梅cDNA第一链的合成 | 第25页 |
3.2.4 CpCPC基因5’及3’RACE模板合成 | 第25-26页 |
3.2.5 蜡梅CPC基因EST序列的获得 | 第26页 |
3.2.6 利用5’RACE克隆印CPC基因5’端cDNA序列 | 第26-29页 |
3.2.7 CpCPC基因的克隆及内含子分析 | 第29页 |
3.2.8 CpCPC基因cDNA的生物信息学分析 | 第29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-39页 |
3.3.1 蜡梅基因组DNA以及总RNA结果检测 | 第29-31页 |
3.3.2 CpCPC基因的克隆及其cDNA序列特征 | 第31-33页 |
3.3.3 CpCPC基因编码蛋白的同源性比较分析 | 第33-34页 |
3.3.4 CpCPC编码蛋白的序列多重比对和进化树分析 | 第34-36页 |
3.3.5 CpCPC基因编码蛋白的结构分析 | 第36-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第4章 CpCPC基因的表达分析 | 第41-47页 |
4.1 实验材料 | 第41页 |
4.1.1 植物材料 | 第41页 |
4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
4.1.3 主要仪器设备与耗材 | 第41页 |
4.2 试验方法 | 第41-43页 |
4.2.1 蜡梅不同组织及不同花期材料的获得 | 第41页 |
4.2.2 总RNA提取 | 第41-42页 |
4.2.3 cDNA第一链合成 | 第42页 |
4.2.4 CpCPC表达特性分析 | 第42-43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-46页 |
4.3.1 实时荧光定量PCR引物熔解曲线分析 | 第43页 |
4.3.2 实时荧光定量PCR引物标准曲线分析 | 第43-44页 |
4.3.3 CpCPC表达的实时荧光定量分析 | 第44-46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
第5章 植物表达载体的构建与转化烟草 | 第47-61页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第47-48页 |
5.1.1 植物材料 | 第47页 |
5.1.2 菌株与载体 | 第47页 |
5.1.3 常用药品试剂配制 | 第47-48页 |
5.2 试验方法 | 第48-54页 |
5.2.1 植物表达载体的构建 | 第48-52页 |
5.2.2 烟草的遗传转化 | 第52-53页 |
5.2.3 转基因烟草的检测 | 第53页 |
5.2.4 转基因烟草的总黄酮含量测定 | 第53-54页 |
5.2.5 转基因烟草根毛数量观测 | 第54页 |
5.3 结果与分析 | 第54-59页 |
5.3.1 植物表达载体的构建 | 第54-55页 |
5.3.2 转基因烟草的检测 | 第55-58页 |
5.3.3 转基因烟草中类黄酮物质的定量分析 | 第58页 |
5.3.4 转基因烟草根毛观测结果 | 第58-59页 |
5.4 讨论 | 第59-61页 |
第6章 总结 | 第61-63页 |
6.1 结论 | 第61页 |
6.1.1 CpCPC分子克隆及其特征 | 第61页 |
6.1.2 CpCPC的转录表达分析 | 第61页 |
6.1.3 CpCPC植物表达载体的构建和转基因烟草的获得与分析 | 第61页 |
6.2 下一步研究计划 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
缩略词表 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |