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缺血缺氧时神经血管单元损伤的机制

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第12-14页
前言第14-17页
    研究现状、成果第14-15页
    研究目的、方法第15-17页
一、水通道蛋白-4在缺血/缺氧损伤后神经血管单元的组成成分中的作用第17-31页
    1.1 材料与方法第17-22页
        1.1.1 在bEnd-3细胞株水通道蛋白-4表达的免疫印迹分析第18-19页
            1.1.1.1 bEnd-3细胞培养第18页
            1.1.1.2 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达第18-19页
        1.1.2 缺血/再灌注损伤时脑微血管内皮细胞水通道蛋白-4免疫印迹法检测第19-20页
            1.1.2.1 实验动物及手术第19页
            1.1.2.2 动物分组第19页
            1.1.2.3 脑微血管分离第19页
            1.1.2.4 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达第19-20页
        1.1.3 免疫印迹法在缺氧缺糖损伤的星形胶质细胞检测水通道蛋白-4表达第20页
            1.1.3.1 星形胶质细胞培养第20页
            1.1.3.2 缺氧缺糖损伤第20页
            1.1.3.3 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达第20页
        1.1.4 免疫印迹法检测在低氧和常氧条件下神经干细胞水通道蛋白-4的表达第20-21页
            1.1.4.1 胎鼠神经干细胞分离和培养第20-21页
            1.1.4.2 细胞分组第21页
            1.1.4.3 免疫印迹法检测水通道蛋白-4在常氧和缺氧条件下的表达第21页
        1.1.5 免疫印迹法检测水通道蛋白-4基因敲弱后βⅢ型微管蛋白在神经干细胞的表达第21-22页
            1.1.5.1 胎鼠神经干细胞分离和培养第21页
            1.1.5.2 小干扰RNA转染和处理第21-22页
            1.1.5.3 细胞分组第22页
            1.1.5.4 免疫印迹法检测水通道蛋白-4及βⅢ型微管蛋白的表达第22页
            1.1.5.5 统计分析第22页
    1.2 结果第22-25页
        1.2.1 水通道蛋白-4在bEnd.3细胞株表达第22页
        1.2.2 在分离的脑血管内皮细胞缺血/再灌注损伤后水通道蛋白-4的表达第22-23页
        1.2.3 在培养的大鼠星形胶质细胞缺氧缺糖损伤并复氧后水通道蛋白-4的表达第23页
        1.2.4 缺氧及常氧条件下在培养的神经干细胞水通道蛋白-4的表达第23-24页
        1.2.5 水通道蛋白-4基因敲弱后βⅢ型微管蛋白在培养神经干细胞的表达第24-25页
    1.3 讨论第25-30页
        1.3.1 水通道蛋白概述第25-27页
        1.3.2 缺血/缺氧后神经血管单元细胞成分水通道蛋白-4的表达第27-30页
    1.4 结论第30-31页
二、小凹蛋白-1调节缺氧/缺血后脑微血管内皮细胞基质金属蛋白酶的表达第31-44页
    2.1 材料与方法第31-36页
        2.1.1 实验动物及手术第32页
        2.1.2 动物分组第32页
        2.1.3 脑微血管分离第32页
        2.1.4 免疫印迹分析法检测小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶-2/-9的表达第32-33页
        2.1.5 免疫荧光法检测小凹蛋白-1蛋白的表达第33页
        2.1.6 原位明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶的活性第33-34页
        2.1.7 大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养第34页
        2.1.8 小干扰RNA的转染和处理第34页
        2.1.9 体外明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2活性第34-36页
    2.2 结果第36-41页
        2.2.1 基质金属蛋白酶-2/-9在分离的缺血/再灌注的大鼠脑微血管的表达第36-37页
        2.2.2 小凹蛋白-1在缺血/再灌注后分离的脑微血管的表达第37-38页
        2.2.3 原位基质金属蛋白酶酶谱法检测缺血/再灌注后基质金属蛋白酶的活性第38页
        2.2.4 在缺血/再灌注损伤后脑微血管小凹蛋白-1染色第38-39页
        2.2.5 在体外明胶酶谱法检测小凹蛋白-1敲弱脑微血管内皮细胞培养基中基质金属蛋白酶-2的活性第39-41页
    2.3 讨论第41-43页
        2.3.1 缺氧/缺血后基质金属蛋白酶在脑微血管内皮细胞的表达第41-42页
        2.3.2 缺氧/缺血后小凹蛋白-1在脑组织微血管内皮细胞的表达第42页
        2.3.3 在脑微血管内皮细贿小凹蛋白-1对基质金属蛋白酶-2表达的调节作用第42-43页
    2.4 结论第43-44页
三、在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型一氧化氮合酶抑制剂降低血脑屏障通透性第44-59页
    3.1 材料与方法第45-48页
        3.1.1 实验动物及手术第45-46页
        3.1.2 动物分组和处理第46页
        3.1.3 血脑屏障通透性评估第46页
        3.1.4 脑微血管分离第46-47页
        3.1.5 免疫印迹法检测在分离的脑微血管小凹蛋白-1蛋白的表达第47页
        3.1.6 原位明胶酶谱法第47页
        3.1.7 免疫荧光法检测3-硝基酪氨酸,小凹蛋白-1和闭锁小带蛋白-1的表达第47-48页
    3.2 结果第48-54页
        3.2.1 L-NAME诱导血脑屏障通透性下降第48-49页
        3.2.2 7-硝基吲唑诱导血脑屏障通透性下降第49页
        3.2.3 脑缺血/再灌注时一氧化氮合酶抑制剂对分离的脑血管小凹蛋白-1表达的作用第49-50页
        3.2.4 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中3-硝基酪氨酸的作用第50-51页
        3.2.5 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中小凹蛋白-1的作用第51-52页
        3.2.6 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中基质金属蛋白酶的作用第52-53页
        3.2.7 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中闭锁小带蛋白-1的作用第53-54页
    3.3 讨论第54-57页
        3.3.1 活性氮族,一氧化氮和血脑屏障第54-55页
        3.3.2 一氧化氮,基质金属蛋白酶与血脑屏障第55-56页
        3.3.3 一氧化氮,小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶与血脑屏障第56-57页
        3.3.4 一氧化氮,小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶,紧密连接相关蛋白与血脑屏障第57页
    3.4 结论第57-59页
全文结论第59-61页
论文创新点第61-63页
参考文献第63-80页
发表论文和参加科研情况说明第80-84页
附录第84-102页
综述 水通道蛋白-4与缺血性中风后的脑水肿和神经再生第102-114页
    综述参考文献第108-114页
致谢第114页

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