中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-17页 |
研究现状、成果 | 第14-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、水通道蛋白-4在缺血/缺氧损伤后神经血管单元的组成成分中的作用 | 第17-31页 |
1.1 材料与方法 | 第17-22页 |
1.1.1 在bEnd-3细胞株水通道蛋白-4表达的免疫印迹分析 | 第18-19页 |
1.1.1.1 bEnd-3细胞培养 | 第18页 |
1.1.1.2 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达 | 第18-19页 |
1.1.2 缺血/再灌注损伤时脑微血管内皮细胞水通道蛋白-4免疫印迹法检测 | 第19-20页 |
1.1.2.1 实验动物及手术 | 第19页 |
1.1.2.2 动物分组 | 第19页 |
1.1.2.3 脑微血管分离 | 第19页 |
1.1.2.4 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达 | 第19-20页 |
1.1.3 免疫印迹法在缺氧缺糖损伤的星形胶质细胞检测水通道蛋白-4表达 | 第20页 |
1.1.3.1 星形胶质细胞培养 | 第20页 |
1.1.3.2 缺氧缺糖损伤 | 第20页 |
1.1.3.3 免疫印迹法检测水通道蛋白-4的表达 | 第20页 |
1.1.4 免疫印迹法检测在低氧和常氧条件下神经干细胞水通道蛋白-4的表达 | 第20-21页 |
1.1.4.1 胎鼠神经干细胞分离和培养 | 第20-21页 |
1.1.4.2 细胞分组 | 第21页 |
1.1.4.3 免疫印迹法检测水通道蛋白-4在常氧和缺氧条件下的表达 | 第21页 |
1.1.5 免疫印迹法检测水通道蛋白-4基因敲弱后βⅢ型微管蛋白在神经干细胞的表达 | 第21-22页 |
1.1.5.1 胎鼠神经干细胞分离和培养 | 第21页 |
1.1.5.2 小干扰RNA转染和处理 | 第21-22页 |
1.1.5.3 细胞分组 | 第22页 |
1.1.5.4 免疫印迹法检测水通道蛋白-4及βⅢ型微管蛋白的表达 | 第22页 |
1.1.5.5 统计分析 | 第22页 |
1.2 结果 | 第22-25页 |
1.2.1 水通道蛋白-4在bEnd.3细胞株表达 | 第22页 |
1.2.2 在分离的脑血管内皮细胞缺血/再灌注损伤后水通道蛋白-4的表达 | 第22-23页 |
1.2.3 在培养的大鼠星形胶质细胞缺氧缺糖损伤并复氧后水通道蛋白-4的表达 | 第23页 |
1.2.4 缺氧及常氧条件下在培养的神经干细胞水通道蛋白-4的表达 | 第23-24页 |
1.2.5 水通道蛋白-4基因敲弱后βⅢ型微管蛋白在培养神经干细胞的表达 | 第24-25页 |
1.3 讨论 | 第25-30页 |
1.3.1 水通道蛋白概述 | 第25-27页 |
1.3.2 缺血/缺氧后神经血管单元细胞成分水通道蛋白-4的表达 | 第27-30页 |
1.4 结论 | 第30-31页 |
二、小凹蛋白-1调节缺氧/缺血后脑微血管内皮细胞基质金属蛋白酶的表达 | 第31-44页 |
2.1 材料与方法 | 第31-36页 |
2.1.1 实验动物及手术 | 第32页 |
2.1.2 动物分组 | 第32页 |
2.1.3 脑微血管分离 | 第32页 |
2.1.4 免疫印迹分析法检测小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶-2/-9的表达 | 第32-33页 |
2.1.5 免疫荧光法检测小凹蛋白-1蛋白的表达 | 第33页 |
2.1.6 原位明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶的活性 | 第33-34页 |
2.1.7 大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养 | 第34页 |
2.1.8 小干扰RNA的转染和处理 | 第34页 |
2.1.9 体外明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2活性 | 第34-36页 |
2.2 结果 | 第36-41页 |
2.2.1 基质金属蛋白酶-2/-9在分离的缺血/再灌注的大鼠脑微血管的表达 | 第36-37页 |
2.2.2 小凹蛋白-1在缺血/再灌注后分离的脑微血管的表达 | 第37-38页 |
2.2.3 原位基质金属蛋白酶酶谱法检测缺血/再灌注后基质金属蛋白酶的活性 | 第38页 |
2.2.4 在缺血/再灌注损伤后脑微血管小凹蛋白-1染色 | 第38-39页 |
2.2.5 在体外明胶酶谱法检测小凹蛋白-1敲弱脑微血管内皮细胞培养基中基质金属蛋白酶-2的活性 | 第39-41页 |
2.3 讨论 | 第41-43页 |
2.3.1 缺氧/缺血后基质金属蛋白酶在脑微血管内皮细胞的表达 | 第41-42页 |
2.3.2 缺氧/缺血后小凹蛋白-1在脑组织微血管内皮细胞的表达 | 第42页 |
2.3.3 在脑微血管内皮细贿小凹蛋白-1对基质金属蛋白酶-2表达的调节作用 | 第42-43页 |
2.4 结论 | 第43-44页 |
三、在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型一氧化氮合酶抑制剂降低血脑屏障通透性 | 第44-59页 |
3.1 材料与方法 | 第45-48页 |
3.1.1 实验动物及手术 | 第45-46页 |
3.1.2 动物分组和处理 | 第46页 |
3.1.3 血脑屏障通透性评估 | 第46页 |
3.1.4 脑微血管分离 | 第46-47页 |
3.1.5 免疫印迹法检测在分离的脑微血管小凹蛋白-1蛋白的表达 | 第47页 |
3.1.6 原位明胶酶谱法 | 第47页 |
3.1.7 免疫荧光法检测3-硝基酪氨酸,小凹蛋白-1和闭锁小带蛋白-1的表达 | 第47-48页 |
3.2 结果 | 第48-54页 |
3.2.1 L-NAME诱导血脑屏障通透性下降 | 第48-49页 |
3.2.2 7-硝基吲唑诱导血脑屏障通透性下降 | 第49页 |
3.2.3 脑缺血/再灌注时一氧化氮合酶抑制剂对分离的脑血管小凹蛋白-1表达的作用 | 第49-50页 |
3.2.4 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中3-硝基酪氨酸的作用 | 第50-51页 |
3.2.5 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中小凹蛋白-1的作用 | 第51-52页 |
3.2.6 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中基质金属蛋白酶的作用 | 第52-53页 |
3.2.7 一氧化氮合酶抑制剂对大鼠大脑中动脉闭塞模型缺血/再灌注脑组织中闭锁小带蛋白-1的作用 | 第53-54页 |
3.3 讨论 | 第54-57页 |
3.3.1 活性氮族,一氧化氮和血脑屏障 | 第54-55页 |
3.3.2 一氧化氮,基质金属蛋白酶与血脑屏障 | 第55-56页 |
3.3.3 一氧化氮,小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶与血脑屏障 | 第56-57页 |
3.3.4 一氧化氮,小凹蛋白-1,基质金属蛋白酶,紧密连接相关蛋白与血脑屏障 | 第57页 |
3.4 结论 | 第57-59页 |
全文结论 | 第59-61页 |
论文创新点 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-80页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第80-84页 |
附录 | 第84-102页 |
综述 水通道蛋白-4与缺血性中风后的脑水肿和神经再生 | 第102-114页 |
综述参考文献 | 第108-114页 |
致谢 | 第114页 |