| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 根瘤菌与豆科植物的共生固氮体系 | 第13-15页 |
| 1.1.1 引言 | 第13页 |
| 1.1.2 根瘤菌及其分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 豆科植物 | 第14-15页 |
| 1.1.4 苜蓿 | 第15页 |
| 1.2 根瘤菌与豆科植物共生结瘤的相关研究 | 第15-21页 |
| 1.2.1 根瘤菌与豆科植物的共生结瘤过程 | 第15-16页 |
| 1.2.2 根瘤菌对宿主植物根部的早期侵染 | 第16-17页 |
| 1.2.3 根瘤菌对宿主植物根毛壁的水解 | 第17-21页 |
| 1.3 研究内容及技术路线 | 第21-23页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 SM0020_04885基因的敲除 | 第23-35页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 材料、试剂和仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2.2.2 试剂及缓冲液 | 第23-24页 |
| 2.2.3 仪器 | 第24页 |
| 2.3 试验方法 | 第24-28页 |
| 2.3.1 菌株的活化 | 第24-25页 |
| 2.3.2 根瘤菌总DNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.3 04885基因上下游同源片段的扩增 | 第25页 |
| 2.3.4 上下游同源片段的回收 | 第25页 |
| 2.3.5 上下游同源片段的连接 | 第25-26页 |
| 2.3.6 质粒的提取 | 第26页 |
| 2.3.7 双酶切及连接 | 第26页 |
| 2.3.8 大肠杆菌感受态的制备 | 第26-27页 |
| 2.3.9 转化 | 第27页 |
| 2.3.10 三亲本杂交 | 第27页 |
| 2.3.11 单交换和双交换突变体的筛选 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.4.1 目的基因的相关分析 | 第28-31页 |
| 2.4.2 目的基因敲除突变体的构建 | 第31-32页 |
| 2.4.3 04885基因缺失突变菌株的筛选 | 第32-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 SM0020_04885基因的过表达菌株及回补菌株的构建 | 第35-46页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 材料、试剂和仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第35-36页 |
| 3.2.2 试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 培养基 | 第36页 |
| 3.2.4 仪器 | 第36页 |
| 3.3 试验方法 | 第36-41页 |
| 3.3.1 根瘤菌DNA的提取 | 第36页 |
| 3.3.2 04885基因过表达菌株的构建 | 第36-39页 |
| 3.3.3 回补菌株的构建 | 第39-41页 |
| 3.4 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.4.1 目的基因过表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.4.2 目的基因过表达菌株的筛选 | 第42-43页 |
| 3.4.3 目的基因回补载体的构建及筛选 | 第43-44页 |
| 3.5 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 SM0020_04885基因对共生结瘤影响的研究 | 第46-61页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 材料、试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.1 材料 | 第46页 |
| 4.2.2 仪器 | 第46页 |
| 4.2.3 试剂与配方 | 第46-47页 |
| 4.3 试验方法 | 第47-48页 |
| 4.3.1 根瘤菌生长曲线的测定 | 第47页 |
| 4.3.2 植物实验 | 第47页 |
| 4.3.3 植株生物量的测定 | 第47页 |
| 4.3.4 结瘤实验 | 第47页 |
| 4.3.5 根瘤石蜡切片的制作 | 第47页 |
| 4.3.6 固氮酶活性的测定 | 第47-48页 |
| 4.3.7 侵染实验 | 第48页 |
| 4.4 结果与分析 | 第48-59页 |
| 4.4.1 生长曲线的测定 | 第48-49页 |
| 4.4.2 植株表型 | 第49-51页 |
| 4.4.3 植株生物量的测定 | 第51-52页 |
| 4.4.4 结瘤实验 | 第52-53页 |
| 4.4.5 石蜡切片 | 第53-54页 |
| 4.4.6 固氮酶活性检测结果 | 第54页 |
| 4.4.7 侵染实验 | 第54-59页 |
| 4.5 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61-62页 |
| 5.2 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |