摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-20页 |
1.1 基因重复 | 第10-13页 |
1.1.1 基因重复及分子机制 | 第10页 |
1.1.3 重复基因可能的命运 | 第10-13页 |
1.2 交替氧化酶基因家族 | 第13-17页 |
1.2.1 植物线粒体的交替呼吸链途径 | 第13-15页 |
1.2.2 交替氧化酶基因家族 | 第15页 |
1.2.3 AOX的生理功能 | 第15-17页 |
1.3 杨树的研究 | 第17-19页 |
1.3.1 杨树的基因组进化及研究现状 | 第17-18页 |
1.3.2 胡杨和灰杨 | 第18页 |
1.3.3 胡杨和灰杨的形态差异 | 第18-19页 |
1.4 研究意义 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌种与质粒 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第20页 |
2.1.4 主要激素和抗生素 | 第20-21页 |
2.1.5 主要培养基配方 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-33页 |
2.2.1 杨树叶片DNA提取 | 第21-22页 |
2.2.2 杨树叶片RNA提取 | 第22-23页 |
2.2.3 拟南芥DNA提取 | 第23页 |
2.2.4 拟南芥RNA提取 | 第23-24页 |
2.2.5 反转录 | 第24页 |
2.2.6 PCR反应 | 第24-26页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
2.2.8 切胶回收 | 第26-27页 |
2.2.9 克隆载体的构建 | 第27页 |
2.2.10 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
2.2.11 克隆载体转化大肠杆菌 | 第28页 |
2.2.12 菌种保存 | 第28页 |
2.2.13 质粒提取 | 第28-29页 |
2.2.14 双酶切 | 第29页 |
2.2.15 表达载体的构建 | 第29-30页 |
2.2.16 表达载体转入农杆菌 | 第30页 |
2.2.17 拟南芥侵染 | 第30-31页 |
2.2.18 拟南芥抗氰呼吸测定 | 第31-32页 |
2.2.19 离子渗透率测定 | 第32页 |
2.2.20 抗氧化物含量和抗氧化酶活性测定 | 第32页 |
2.2.21 统计分析 | 第32-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-51页 |
3.1 胡杨PeuAOX1a和灰杨PprAOX1a基因的克隆 | 第33-34页 |
3.2 胡杨AOX基因家族染色体定位和共线性分析 | 第34页 |
3.3 表达载体构建 | 第34-35页 |
3.3.1 超表达载体构建 | 第34页 |
3.3.2 回补载体构建 | 第34-35页 |
3.4 转基因拟南芥的鉴定 | 第35-37页 |
3.5 AOX1a过表达对呼吸速率的影响 | 第37-38页 |
3.5.1 转基因拟南芥的Vt、Vcyt和Valt的变化 | 第37页 |
3.5.2 转基因拟南芥Vcyt/Vt和Valt/Vt变化 | 第37-38页 |
3.6 AOX1a过表达影响植物对胁迫的响应 | 第38-44页 |
3.6.1 不同处理以后拟南芥种子萌发率变化 | 第38-40页 |
3.6.2 不同处理下拟南芥的根长变化 | 第40-44页 |
3.7 AOX1a过表达可以影响胁迫下的氧化损伤 | 第44-51页 |
3.7.1 不同处理后拟南芥的离子渗透率(EL)和丙二醛(MDA)变化 | 第44-45页 |
3.7.2 不同处理下拟南芥的脯氨酸(Pro)的含量变化 | 第45-46页 |
3.7.3 不同处理后拟南芥的H2O2含量和CAT酶活变化 | 第46-48页 |
3.7.4 不同处理后拟南芥的抗氧化物酶活性变化 | 第48-51页 |
第四章 讨论 | 第51-54页 |
4.1 胡杨和灰杨AOX1a的过表达加快了拟南芥抗氰呼吸的启动 | 第51-52页 |
4.2 胡杨和灰杨AOX1a的过表达后可以影响植物的生长表型 | 第52页 |
4.3 胡杨和灰杨AOX1a通过调节植物抗氧化系统来提高植物的抗盐性和抗旱性 | 第52-54页 |
第五章 结论 | 第54-55页 |
5.1 主要结论 | 第54页 |
5.2 研究展望 | 第54-55页 |
附录 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
在学期间的研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |