| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1 研究背景 | 第10-22页 |
| 1.1 基因枪技术转化小麦的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 Bar筛选标记基因的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.2 PMI筛选标记基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 小麦抗赤霉病基因工程研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 糖尿病疫苗的研究概况 | 第15-18页 |
| 1.3.1 Ⅰ型糖尿病的发病机制 | 第15页 |
| 1.3.2 口服耐受 | 第15-17页 |
| 1.3.3 免疫佐剂霍乱毒素B亚基的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 禽流感疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 植物生物反应器研究进展 | 第19-21页 |
| 1.6 提高外源基因表达的策略 | 第21-22页 |
| 2 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 相关载体的构建 | 第23-30页 |
| 1 材料与方法 | 第23-26页 |
| 1.1 供试材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
| 1.1.2 酶及试剂 | 第23页 |
| 1.1.3 培养基 | 第23-24页 |
| 1.1.4 PCR扩增引物 | 第24页 |
| 1.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 1.2.1 质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
| 1.2.2 DNA片段回收 | 第25页 |
| 1.2.3 大肠杆菌DH 5α感受态细胞热击转化 | 第25-26页 |
| 1.2.4 PCR扩增体系及程序 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.1 AGD2最小表达框的制备 | 第26页 |
| 2.2 pBar-LYA-CTB和pLYA-CTB植物表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.3 用于基因枪轰击的转化品种和转化组合 | 第29-30页 |
| 第三章 基因枪介导的小麦幼胚转化 | 第30-47页 |
| 1 材料与方法 | 第30-36页 |
| 1.1 供试材料 | 第30-33页 |
| 1.1.1 质粒及最小表达框 | 第30页 |
| 1.1.2 转化受体 | 第30页 |
| 1.1.3 培养基及试剂 | 第30-32页 |
| 1.1.4 引物 | 第32-33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 1.2.1 幼胚的接种和培养 | 第33页 |
| 1.2.2 高渗处理及基因枪轰击 | 第33页 |
| 1.2.3 恢复培养及筛选 | 第33-34页 |
| 1.2.4 生根壮苗、春化及移栽 | 第34页 |
| 1.2.5 DNA的提取 | 第34页 |
| 1.2.6 PCR扩增 | 第34-35页 |
| 1.2.7 T_1代材料的萌发 | 第35页 |
| 1.2.8 T_1代材料的RNA提取 | 第35-36页 |
| 1.2.9 RT-PCR | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-44页 |
| 2.1 小麦幼胚转化及转基因植株的获得 | 第36页 |
| 2.2 不同品种小麦幼胚愈伤转化结果的比较 | 第36-39页 |
| 2.3 不同筛选剂对小麦再生植株的影响 | 第39-40页 |
| 2.4 不同培养基组分对转基因小麦生根的影响 | 第40页 |
| 2.5 转基因植株的PCR鉴定 | 第40-43页 |
| 2.5.1 转AGD2基因小麦的PCR鉴定 | 第40-42页 |
| 2.5.2 转CTB基因小麦的PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 2.6 部分T_1代材料的RT-PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 转禽流感表面抗原基因小麦的鉴定 | 第47-55页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 1.1 供试材料 | 第47-48页 |
| 1.1.1 转基因小麦材料 | 第47页 |
| 1.1.2 小麦基因组DNA和RNA提取试剂 | 第47页 |
| 1.1.3 引物 | 第47-48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48页 |
| 1.2.1 转基因植株的PCR鉴定 | 第48页 |
| 1.2.2 小麦未成熟籽粒RNA的提取 | 第48页 |
| 1.2.3 小麦常规杂交 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-54页 |
| 2.1 转基因植株后代的PCR鉴定 | 第48-50页 |
| 2.2 转基因植株后代的分离情况分析 | 第50-52页 |
| 2.3 转基因植株后代的RT-PCR鉴定 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-67页 |
| 致谢 | 第67页 |