缺血缺氧状态下内皮祖细胞的自噬变化及其对细胞存活和增殖的作用
| 英文縮略词表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 EPCs在缺血缺氧微环境中的自噬变化 | 第13-24页 |
| 材料和方法 | 第13-18页 |
| 1 实验材料和实验动物 | 第13页 |
| 2 仪器和试剂 | 第13-14页 |
| 2.1 仪器 | 第13页 |
| 2.2 试剂 | 第13-14页 |
| 3 脐带血单形核细胞的分离 | 第14页 |
| 3.1 Percoll液的制备 | 第14页 |
| 3.2 单形核细胞分离 | 第14页 |
| 4 EPCs的分选及鉴定 | 第14-15页 |
| 5 大鼠心肌梗死模型建立与细胞移植 | 第15-17页 |
| 5.1 心肌梗死模型建立 | 第15-16页 |
| 5.2 FG移植复合物的制备 | 第16页 |
| 5.3 细胞移植 | 第16-17页 |
| 6. 自噬检测 | 第17-18页 |
| 6.1 取材及透射电镜标本制备 | 第17页 |
| 6.2 半薄切片及自噬超微结构的电镜观察 | 第17-18页 |
| 结果 | 第18-22页 |
| 1 EPC的生物学特征 | 第18-19页 |
| 1.1 EPCs的含量及表面标记物观察 | 第18-19页 |
| 1.2 EPCs的形态特征 | 第19页 |
| 2 移植后的EPCs数目和超微结构变化 | 第19-22页 |
| 讨论 | 第22-24页 |
| 第二部分 自噬对缺氧条件下EPCs存活的调节作用 | 第24-45页 |
| 材料和方法 | 第24-31页 |
| 1 实验材料 | 第24页 |
| 2 仪器和试剂 | 第24-25页 |
| 2.1 仪器 | 第24页 |
| 2.2 试剂 | 第24-25页 |
| 3 细胞增殖检测 | 第25-26页 |
| 3.1 流式细胞仪分析细胞周期 | 第25-26页 |
| 3.2 MTT法检测细胞活力 | 第26页 |
| 4 缺氧模型建立及实验分组 | 第26-27页 |
| 5 自噬基因、蛋白及相关结构的检测 | 第27-29页 |
| 5.1 自噬基因Beclin-1的检测 | 第27-28页 |
| 5.2 MDC染色 | 第28-29页 |
| 5.3 LC3免疫化学染色 | 第29页 |
| 6 自噬的超微结构检测 | 第29页 |
| 7 溶酶体标记 | 第29页 |
| 8 细胞凋亡与存活的检测 | 第29-30页 |
| 8.1 AO/EB染色 | 第29-30页 |
| 8.2 流式细胞仪分析 | 第30页 |
| 9 统计学分析 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-42页 |
| 1 自噬对细胞增殖和活性的影响 | 第31-32页 |
| 1.1 自噬抑制后细胞增殖周期变化 | 第31页 |
| 1.2 自噬抑制后细胞活性变化 | 第31-32页 |
| 2 缺氧后Beclin-1的表达变化 | 第32-34页 |
| 3 缺氧后的自噬结构变化 | 第34-37页 |
| 3.1 MDC阳性结构数目变化 | 第34-36页 |
| 3.2 LC3阳性结构数目变化 | 第36-37页 |
| 4 缺氧对细胞自噬超微结构的影响 | 第37-38页 |
| 5 缺氧后溶酶体数目变化 | 第38-39页 |
| 6 自噬抑制后细胞凋亡变化 | 第39-42页 |
| 6.1 凋亡细胞形态及数目变化 | 第39-40页 |
| 6.2 凋亡细胞的流式分析结果 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 全文小结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 综述 | 第50-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 在读期间发表论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
