| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 研究现状、成果 | 第12-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-16页 |
| 第一部分 肿瘤靶向性启动子、hNIS、hTPO及E1A基因的克隆 | 第16-53页 |
| 1.1 对象和方法 | 第18-39页 |
| 1.1.1 材料 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 1.1.4 实验方法 | 第19-39页 |
| 1.2 结果 | 第39-44页 |
| 1.2.1 RT-PCR法扩增hTERT启动子 | 第39页 |
| 1.2.2 18T-hTERT启动子测序 | 第39-40页 |
| 1.2.3 pGL3-hTERT测序及BglⅡ和HindⅢ双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 1.2.4 pGL3-GFAP测序及MluⅠ及BglⅡ双酶切 | 第41-42页 |
| 1.2.5 pGL3-SV40-hNIS测序及NcoⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定 | 第42-43页 |
| 1.2.6 pGL3-hTERT-E1A测序鉴定 | 第43-44页 |
| 1.3 讨论 | 第44-52页 |
| 1.3.1 hTERT启动子与GFAP启动子 | 第44-48页 |
| 1.3.2 hNIS基因与hTPO基因 | 第48-49页 |
| 1.3.3 E1A基因与腺病毒复制 | 第49页 |
| 1.3.4 全基因合成技术 | 第49-51页 |
| 1.3.5 cDNA文库 | 第51-52页 |
| 1.4 小结 | 第52-53页 |
| 第二部分 特异性启动子调控条件复制腺病毒的构建及鉴定 | 第53-80页 |
| 2.1 对象和方法 | 第55-70页 |
| 2.1.1 材料 | 第55-56页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第56-70页 |
| 2.2 结果 | 第70-76页 |
| 2.2.1 pGL3-GFAP-hNIS和pGL3-hTERT-hNIS重组质粒的测序鉴定 | 第70-72页 |
| 2.2.2 检测各重组启动子质粒的启动效率 | 第72-73页 |
| 2.2.3 靶向性启动子引导hNIS基因表达的重组质粒摄125I瞬时实验 | 第73-74页 |
| 2.2.4 pGL3-Tp-E1A-Gp-NIS重组质粒的测序鉴定 | 第74页 |
| 2.2.5 重组质粒pDC311-Tp-E1A-Gp-NIS的双酶切及测序鉴定 | 第74-75页 |
| 2.2.6 Ad-Tp-E1A-Gp-NIS纯化病毒的滴度及TCID50测定 | 第75页 |
| 2.2.7 Ad-CMV-hTPO和Ad-CMV-EGFP重组腺病毒扩增 | 第75-76页 |
| 2.3 讨论 | 第76-79页 |
| 2.3.1 双启动子引导基表达技术 | 第76-77页 |
| 2.3.2 AdMax重组腺病毒系统 | 第77-79页 |
| 2.4 小结 | 第79-80页 |
| 第三部分 Ad-Tp-E1A-Gp-NIS感染胶质瘤细胞介导放射性碘治疗的细胞水平研究 | 第80-109页 |
| 3.1 对象和方法 | 第83-91页 |
| 3.1.1 材料 | 第83-84页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第84-91页 |
| 3.2 结果 | 第91-104页 |
| 3.2.1 Western Blot法检测U251、U87胶质瘤细胞及MRC-5正常人细胞中蛋白表达情况 | 第91-92页 |
| 3.2.2 Ad-Tp-E1A-Gp-NIS、Ad-CMV-hNIS及Ad-CMV-hTP | 第92-94页 |
| 3.2.3 Ad-Tp-E1A-Gp-NIS在肿瘤细胞中选择性复制实验 | 第94-95页 |
| 3.2.4 测定摄~(125)I能力实验 | 第95-97页 |
| 3.2.5 测定~(125)I内流实验 | 第97-98页 |
| 3.2.6 测定~(125)I外流实验 | 第98-99页 |
| 3.2.7 过氯酸盐抑制实验 | 第99-100页 |
| 3.2.8 ~(125)I有机化测定实验 | 第100-101页 |
| 3.2.9 细胞克隆形成实验 | 第101-104页 |
| 3.3 讨论 | 第104-107页 |
| 3.3.1 胶质瘤的治疗现状 | 第104-105页 |
| 3.3.2 恶性胶质瘤细胞培养 | 第105-106页 |
| 3.3.3 病毒感染细胞的最适感染复数 | 第106-107页 |
| 3.4 小结 | 第107-109页 |
| 第四部分 Ad-Tp-E1A-Gp-NIS感染荷瘤裸鼠介导放射性碘治疗的体内研究 | 第109-124页 |
| 4.1 对象和方法 | 第111-115页 |
| 4.1.1 材料 | 第111页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第111-115页 |
| 4.2 结果 | 第115-120页 |
| 4.2.1 U87荷瘤裸鼠模型的建立 | 第115页 |
| 4.2.2 U87荷瘤裸鼠的体内~(131)I分布实验 | 第115-117页 |
| 4.2.3 ~(131)I对U87荷瘤裸鼠的治疗作用 | 第117-120页 |
| 4.3 讨论 | 第120-123页 |
| 4.3.1 裸鼠概况及饲养 | 第120-122页 |
| 4.3.2 免疫组织化学 | 第122-123页 |
| 4.4 小结 | 第123-124页 |
| 全文结论 | 第124-128页 |
| 论文创新点 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-136页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第136-137页 |
| 附录 | 第137-139页 |
| 综述 | 第139-147页 |
| 综述参考文献 | 第142-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
