| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 植物再生体系的研究 | 第13-14页 |
| 1.1.1 植物器官发生途径的研究 | 第13页 |
| 1.1.2 植物胚胎发生途径 | 第13-14页 |
| 1.1.3 影响植物再生体系的因素 | 第14页 |
| 1.2 大豆再生体系及其转化的研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 大豆器官再生体系及其转化的研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 大豆体细胞胚再生体系及其转化的研究 | 第16-17页 |
| 1.2.3 大豆器官再生体系转化与体细胞胚再生体系转化比较 | 第17页 |
| 1.3 大豆遗传转化方法 | 第17-21页 |
| 1.3.1 基因枪在大豆转基因上的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.2 农杆菌法在大豆转基因上的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 其他大豆遗传转化方法 | 第19-21页 |
| 1.3.3.1 电激法 | 第20页 |
| 1.3.3.2 花粉管途径转化方法 | 第20页 |
| 1.3.3.3 PEG 转化方法 | 第20-21页 |
| 1.3.3.4 大豆原位转化方法 | 第21页 |
| 1.4 分子检测在转基因植物中的应用 | 第21-26页 |
| 1.4.1 PCR 检测 | 第21页 |
| 1.4.2 Southern 和 Northern 杂交技术 | 第21-22页 |
| 1.4.3 Western 杂交和 ELISA 技术 | 第22页 |
| 1.4.4 cDNA-AFLP 转录组分析 | 第22-23页 |
| 1.4.5 荧光探针技术在分子生物学中的应用 | 第23-26页 |
| 1.4.5.1 荧光蛋白 | 第23-24页 |
| 1.4.5.2 小分子荧光探针 | 第24-25页 |
| 1.4.5.3 量子点荧光探针 | 第25页 |
| 1.4.5.4 同位素标记 | 第25-26页 |
| 1.4.5.5 自旋标记 | 第26页 |
| 1.5 本试验的研究目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 大豆体细胞胚再生体系的优化 | 第28-47页 |
| 2.1 材料和方法 | 第28-32页 |
| 2.1.1 试验时间和地点 | 第28页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.3 统计分析 | 第28页 |
| 2.1.4 试验方法 | 第28-32页 |
| 2.1.4.1 大豆体细胞胚的诱导 | 第28-29页 |
| 2.1.4.2 次生体细胞胚的继代和繁殖 | 第29-30页 |
| 2.1.4.3 体细胞胚到子叶胚的分化时间比较 | 第30-31页 |
| 2.1.4.4 子叶胚到完整植株的分化 | 第31页 |
| 2.1.4.5 抗生素浓度 | 第31页 |
| 2.1.4.6 各种培养基成分 | 第31-32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-44页 |
| 2.2.1 不同品种在不同条件下所获得的幼胚及其诱导体细胞胚的异同 | 第32-33页 |
| 2.2.2 大豆体细胞胚在不同的继代培养中生长差异比较 | 第33-41页 |
| 2.2.2.1 激素对大豆体细胞胚的影响 | 第33-35页 |
| 2.2.2.2 培养基中体细胞胚团块的大小对其增殖的影响 | 第35-37页 |
| 2.2.2.3 蔗糖及培养基对大豆体细胞胚的影响 | 第37-41页 |
| 2.2.3 不同时间获得的子叶胚再生率比较 | 第41-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-47页 |
| 2.3.1 春播大豆所获得的幼胚其诱导体细胞胚的能力最强 | 第44页 |
| 2.3.2 液体培养基中适宜的 2，4-D 浓度 | 第44-45页 |
| 2.3.3 继代培养的适宜体细胞胚团直径 | 第45页 |
| 2.3.4 液体较固体培养，高浓度蔗糖较低浓度蔗糖培养增殖速率高 | 第45-46页 |
| 2.3.5 4 周的分化时间有利于植株的再生率 | 第46-47页 |
| 第三章 大豆体细胞胚遗传转化的初步研究 | 第47-60页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-51页 |
| 3.1.1 细菌菌株及转化的质粒 | 第47页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.3 试验时间和地点 | 第47-48页 |
| 3.1.4 YFP 检测设备和试剂 | 第48页 |
| 3.1.5 试验方法 | 第48-51页 |
| 3.1.5.1 农杆菌对大豆体细胞胚的瞬时转化研究 | 第48页 |
| 3.1.5.2 基因枪对大豆体细胞胚的瞬时转化研究 | 第48-50页 |
| 3.1.5.3 基因枪-农杆菌转化方法 | 第50页 |
| 3.1.5.4 阳性体细胞胚团的筛选 | 第50-51页 |
| 3.1.5.5 PCR 的检测 | 第51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-58页 |
| 3.2.1 农杆菌侵染浓度的选择 | 第51-52页 |
| 3.2.2 基因枪最适条件的优化 | 第52-53页 |
| 3.2.3 基因枪-农杆菌共转化的研究 | 第53-54页 |
| 3.2.4 农杆菌、基因枪和基因枪-农杆菌共转化三种转化方法的比较 | 第54-56页 |
| 3.2.5 三种转化方法在后期筛选的比较 | 第56-58页 |
| 3.3 讨论 | 第58-60页 |
| 3.3.1 OD600为 0.5 对于体细胞胚的侵染是有利的 | 第58页 |
| 3.3.2 使用基因枪可以提高 YFP 的瞬时表达率 | 第58页 |
| 3.3.3 基因枪-农杆菌共转化体系的建立 | 第58-59页 |
| 3.3.4 筛选效果影响转化效率 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文和专利 | 第74-77页 |
